玉米须中的总黄酮含量用紫外分光光度法测定

PAGE18玉米须中的总黄酮含量用紫外分光光度法测定摘要使用分光光度计在波长下测定玉米须得黄酮类化合物的含量可达2.27%,通过紫外分光光度法可重复性精度稳定性和恢复方法的调查,确定紫外分光光度法测定的是稳定的和可靠的类黄酮病耻感的有效方法紫外分光光度法测定黄酮类化合物具有以下优点：玉米须广泛应用于医药、蔬菜等领域，引起人们的关注。同时，玉米须具有巨大的市场潜力。玉米，又称芦笋，水喝对身体的好处。“花草茶”口感好，喝的口味，价格实惠，保健茶可以做整个家庭。高血压，高血脂，高血糖患者饮用，可降血压，降血脂，降血糖..重型夏季清热，凉血芦笋茶，泻热效应可在高温和潮湿空气对身体。此外，玉米须饮健脾、和胃、润肺止咳。还有冬瓜皮玉米须水、木耳玉米甜汤、玉米须红枣甜汤、玉米茶、玉米须红糖茶都是很好的保健饮料。玉米具有相当大的治疗价值。对近年来的保健功能研究玉米总结，发现玉米须煎煮取汁，然后中国传统医药饮料的独特品味适当的细菌发酵，吃饭不仅方便，而且还充分发挥其作用医疗保健。关键词：玉米须；紫外分光光度法；含量测定；应用领域论文类型：理论研究目录1绪论1.1玉米须的概论 11.1.1植物学的基本特征 11.1.2玉米须的文献考证 21.2玉米须化学成分的研究 21.2.1黄酮及其苷类成分 21.2.2玉米须中的矿质元素类 21.2.3玉米须中的有机酸类 31.2.4玉米须中的多糖类 31.2.5玉米须中的挥发性成分类 31.3玉米须中的药理作用的研究 31.3.1玉米须中的利尿作用 31.3.2玉米须中的抗肿瘤作用 41.3.3玉米须中的降血糖作用 41.3.4利胆作用及急性毒性 41.3.5恢复免疫作用 41.3.6抗氧化活性作用 51.4临床应用的研究 51.4.1玉米须煎剂针对黄疸型肝炎的保护作用 51.4.2针对老年恶化劳力型心绞痛玉米须煎剂所产生的治疗作用 51.4.3玉米须煎剂能对高脂血症产生治疗作用 61.4.4玉米须煎剂可以提高机体的免疫力 61.5针对玉米须中黄酮成分提取的研究方法 61.5.1用水煎煮的方法提取 61.5.2用超声的方法提取 61.5.3用微波的方法提取 61.6测定黄酮含量特点可以用 紫外分光光度法71.7开发利用前景 71.7.1可以作为药用 81.7.2可以作为保健饮品 82实验的部分2.1实验的仪器和试药 92.1.1实验中的仪器和设备 92.1.2实验的试剂与药材 92.2实验中供试品溶液的调制 92.3绘制实验标准曲线 92.3.1芦丁的对照品调制 92.3.2实验中选择最大吸收波长 92.3.3制备芦丁的标准曲线 102.4方法学的考察 112.4.1实验的重复性试验 112.4.2实验的精密度试验 112.4.3实验的稳定性试验 122.4.4实验的回收率试验 122.5实验的样品含量测定 132.6实验的结果和分析 13讨论 14参考文献 15致谢 171绪论1.1论文的选题意义/背景及目的要研究玉米须柱头总黄酮含量就要用紫外分光光度法来测定。标准品是芦丁，可以绘制回归线性方程以及标准曲线。在使用的光谱仪中最大的吸收波长是510nm样品。。亚硝酸钠AlCl3比色测定的，测量黄酮含量可达玉米2.27％，调查可以是紫外分光光度法稳定性和修复方法的可重复性，黄酮类物质的稳定是用紫外分光光度法来感测的1.2国以及国外研究现状分析玉米须黄酮含量的测定可达2.27%,通过紫外分光光度法可重复性精度稳定性和恢复方法的调查得出结论2.1玉米须的概述2.1.1玉米须的植物特征玉米须，是禾本科植物玉米.的柱头和花柱。玉米为较高的一年长栽培植物，茎杆秆粗壮，高大概是一米到四米之间，玉米的叶片宽又大，边边是褶皱的波状，具有非常强壮的中脉。在对所开展的男性出生穗茎;雄性花序分枝三角形形状，每个节点2只雄性小穗数，无梗1，其他与短柄升;含有2％的小花雄性小花;。图2.1玉米须植物图2.1.2玉米须本草考证在美洲起源，明代传入中国，药品被包含在“滇南本草图说。”中国玉米具有相对显著的药理活性。玉米须的性平和，味道甘甜、较淡，归膀胱，胆经。玉米须具有降血压，利胆以及止血的功效。对肝，肾炎，以及尿路结石和其它病症有治疗作用。另外，有玉米待冷却肿胀，腹泻发烧，血压，降血脂，降血糖，心血管保护，预防习惯性流产和怀孕的肿胀。《本草纲目》云：“玉蜀黍种出西土，种者亦罕。秧苗和叶子都像小米，又肥又短，还相似于薏苡仁。长,苞片分割,颗颗保存集群。当w它可以炒炒它。炒分裂白色的花朵，如拆迁般的生炒糯米谷。”取决于它的收成不好，酒面粉，大米和小麦被使用;肉用猪饲料煮熟，秆茎干做饭，而不是扔掉。”2.2化学成分的研究2.2.1苷类物质和黄酮化合物经过实验研究证实，黄酮类物质在柱头中的含量可达2.110%，在叶片中含量为1.101%。在16个柱头中，类黄酮的含量仅为0.141%，类黄酮的含量与多种因素有关。如来源和收获时间，如果延迟收获时间，含量就会降低，不同的溶剂，黄酮类化合物就会不同。乙酸乙酯提取物中黄酮类化合物为三叶草和芹菜素，而正丁醇提取物主要为黄酮类卡波苷..张慧恩等采用大孔树脂对玉米晶须水提物进行分离纯化，并对其化学结构进行了核磁共振、红外光谱分析，分别得到了三种黄酮类化合物。2.2.2玉米须中的矿质元素类玉米须里面含有多种微量元素。其中以Fe、Co、Cu、K中的含量最为丰富，矿物质元素仅体内细胞新陈代谢，生物，生理，生化合成和功能在人体中起重要作用2.2.3玉米须中的有机酸物质玉米须中有很多的有机酸，经实验研究发现，玉米须的里面有十六多种氨基酸物质，总氨基酸的含量更是达到了13.3%，总氨基酸里人体所必要的氨基酸就7种之多。苯丙素是植物在呼吸的过程中形成的被称为绿原素，具有产胆性低血压、抗菌性白细胞升高和兴奋性中枢的药理作用2.2.4玉米须中的多糖物质玉米须里面含有很多种低聚糖以及多糖基，比如：葡萄糖，木糖，半乳糖等。根据相关的研究显示,玉米须的部位不同和品种不同以及多糖的含量也不完全相同，依照药理学研究得出的结论为玉米须具有明显的利尿、抑制病菌，降血糖、降血压和增强免疫力和抗肿瘤的功效。可用于尿道结石，高血脂，高血压，糖尿病等疾病的辅助治疗.2.2.5挥发性成分类李静和他的同伴们运用了计算机联用分离以及气象色谱质谱的方法，鉴定得出玉米的玉米须里面有挥发油的化学成分。结果得出，五十个色谱峰中有四十二个成分。2.3玉米须药理试验研究2.3.1玉米须可以利尿许启泰和他的同伴们用了代谢笼和滤纸法用来检测小鼠的尿中Na+、NS负荷大、K+、Cl-尿量的含量用来研究玉米须中含有的多糖的利尿作用。结果显示了中、高剂量的SMPS可增加大鼠以及小鼠的排尿量的多少。2.3.2玉米须中的抗肿瘤作用王维佳人探讨了玉米须提取物的抗肿瘤，将肝，胃癌细胞接种到小白鼠的身体里随机的分组，注射SME10d，24小时小时以后处死小鼠，称取小鼠重量，把小鼠身体里的肿瘤取出来，然后称肿瘤重量，可以得到小鼠生化指标结果。结果SME能抑制小鼠的身体的肿瘤生长，得出了玉米须中的提取物里具有明显的可以抗肿瘤活性物质的存在.2.3.3玉米须可以降糖姜博和他的伙伴们阐明了作用机制，得出玉米须里面的多糖物质可以治疗糖尿病。建模方法采用的是四氧嘧啶法，观察对葡萄糖代谢的影响SMPS中的糖尿病的器官损伤小鼠代谢后通过测量修理观测的相关性测量肝损伤的糖原含量方法SMPS酶修理。最后得出纤维多糖可以降低得了糖尿病的小鼠的血糖，并且促进小鼠体内肝糖原的合成，还可以复原因为糖尿病小鼠造成的小鼠器官损伤。得出了玉米中所含有的黄质对患有糖尿病的小鼠有非常良好的治疗效果.2.3.4玉米须的利胆作用许启泰和他的同伴们研究玉米须里面多糖物质的利胆以及清热作用，他们用了二硝基苯酚、干酵母粉导致大鼠发热的模型来观看了解玉米须多糖的清热作用。结果得出玉米须里面的多糖物质有非常显著的清热利胆的作用。2.3.5恢复免疫作用姚嵩坡和他的伙伴们实验玉米须粗多糖对于老小鼠的细胞免疫测定老年小鼠胸腺的指数的影响,检测测定得出血清的水煎剂和粗多糖的研究老年小鼠模的胸腺指数值明显减少,血清的IL-2含量明显低于老年的小鼠模型组，给药组增加了胸腺以及脾脏中T淋巴细胞的亚群从失衡状态变成了平衡状态，血清中的IL-2的含量明显降低。细胞衰老小鼠的免疫功能恢复,和玉米汤粗多糖的免疫增强用扮演了一个角色。2.3.6抗氧化活性作用汤鲁宏和他的同伴们运用了DPPH法还有FRAP法想知道玉米须中乙醇的提取物的抗氧化的活性对恒重80%的乙醇以新鲜的添加量进行抗氧化活性测试。玉米的玉米须里面发现了DPPH法自由基清除活性效果最好的是乙醇的提取物。2.4玉米须临床研究2.4.1黄疸型肝炎可以用玉米须来保护陈沛林和他的伙伴们实验得到玉米须汤对于治疗五十四例黄疸型的肝炎的临床效果。总共小组有：实验对照组，普通法退黄小组、保肝治疗的小组以及玉米须治疗小组，在这个治疗的上给黄疸型肝炎病人加入玉米须的水煎剂，治疗周期是十四天。实验研究结论显示得出：玉米须的煎剂可以起到退黄利胆的作用，因此对黄疸型的肝炎的肝功能有明显的改善作用。2.4.2针对老年恶化劳力型心绞痛玉米须煎剂所产生的治疗作用张秀云和她的伙伴们针对于老年恶化劳力型所造成的心绞痛，玉米须煎剂可以产生的部分治疗作用。结果得出：两组患者给予硝酸甘油治疗结果最后结果得出玉米须煎剂对老年恶化劳力型心绞痛有明显的治疗作用。2.4.3玉米须煎剂能对高血脂产生治疗作用龚丽娟就她的伙伴们通过观察玉米须煎剂可以高血脂产生的临床的作用。结果得出来高脂血可以用玉米须煎汤来进行治疗。选出了高脂血症六十例，把六十例分成两组，治疗组是三十例，每天给治疗组口服玉米须煎剂一百毫升，一天三次；对照组为三十例，每日给对照组服用安慰剂，两个月以后观察这六十例病例的血脂变化。结果得出：通过服用玉米煎汤的治疗组的甘油三酯指标均明显降低2.4.4玉米须煎剂对提高机体免疫力的作用一些研究人员发现，玉米片增加了小鼠脾脏的量、血清溶菌酶的量和血凝素效价以及T淋巴细胞的化率、T淋巴细胞ANSE细胞的分率均有显著影响.2.5玉米须黄酮提取方法的研究2.5.1水煎煮提取法谢彩侠等人提高配方颗粒中有效成分含量，并且，在玉米须的煎剂中，黄酮以及多糖的指数的总含量的影响了水煎剂的浸泡时间，煎煮时间，以及液固比的数目，煮沸时间上由所述方法产生的玉米汤制剂颗粒在浆料里和多糖含量的影响,浸泡时间、煎煮、液固比、玉米浓汤沸腾时间制备粒子的数量产生的方法所描述的标准煎剂测试,确定了柱头方颗粒的液比为25:1是最佳的水煎剂的煎煮工艺，煎面煮六十分钟，并且煎煮三次，每一次煎煮的时间是三十分钟用稳定性法确定了最佳的水煎剂的煎煮工艺产生的颗粒。2.5.2超声提取法吴保承和他的同事们通过研究玉米须中的黄酮的超声波的提取工艺，得到了更为优化的提取条件，那就是用水来作为溶剂用来进行提取。提取的温度为50℃，提取的时间为三十分钟，就在这个提取的条件下，玉米须的黄酮的得率是2.58%。2.5.3微波提取法周鸿立等人研究提取技术的完全的类黄酮,并且准备在不同的时期还有不同的药用的部位的的黄酮的含量比较,分别研究了微波和热回流方法生成的类黄酮提取工艺正交试验,结果单因素的基础上,优化微波提取的过程是一个60%的乙醇浓度的600w和固液比和16分钟时间来自微波法和热回流法所得的总黄酮提取得率分别为4.55%和3.17%。和成熟的黄酮内容高于th2.6紫外分光光度法测定黄酮含量特点紫外分光光度法，测定黄酮类化合物，一共有以下优点：和其他光谱方法相比，其设备和操作相对简单、成本低、分析速度快、灵敏度高、选择性好由于入射光分光单色光栅或棱镜，可以得到同时在与狭缝控制窄带单色光，因此测量灵敏度，选择性和精度高于比色高法。紫外-可见分光光度法可测定微量标准物质，测定灵敏度可达1~10ug/m，光度计定量测定的精密度可达0.5%，甚至可以更低。这一步极大地提高了电流对元素测定的灵敏度，特别是由于使用了各种配合物和表面活性剂，使许多元素的摩尔吸收率从数万提高到数十万。高精度、高精度。相对误差在1-3%之间。如果采用差示分光光度法，结果会更准确。2.7开发利用前景2.7.1玉米须可以入药玉米须的利尿作用：玉米须经常用在治疗肾炎浮肿上，每天了可以用五十克到一百克，用水煎服。玉米须八克到十克制成水煎剂口服，对一般的正常人可以起到轻微度的利尿，但玉米须的利尿作用没有猪苓以及咖啡因好。玉米须针对胆囊炎的效果:脂肪肝治疗一般经常应用五十克玉米须以及郁金起到清胆固醇的作用玉米须的止血效果：荠菜花配白茅根以及玉米须各三十克，用水煎服。水煎剂对吐血以及衄血和尿血都有明显的效果。玉米须改善三高症状：改善高血压症状时可以用普通玉米和菊花，决明子茶。玉米须针对腹泻：玉米芯或玉米须煎汤具有止泻的功效尤其是水泻，2.7.2玉米须可以做成养生饮品玉米须应用于医药以及蔬菜等领域，引起人们的关注。同时，玉米须具有巨大的市场潜力。玉米，又称芦笋，水喝对身体的好处。“花草茶”口感好，喝的口味，价格实惠，保健茶可以做整个家庭。高血压，高血脂，高血糖患者饮用，可降血压，降血脂，降血糖..重型夏季清热，凉血芦笋茶，泻热效应可在高温和潮湿空气对身体。此外，玉米须饮健脾、和胃、润肺止咳。还有玉米冬瓜皮水、玉米木耳甜汤、甘蔗红枣玉米须、玉米须茶、玉米须红糖茶都是很好的保健饮料。玉米具有相当大的治疗价值。对近年来的保健功能研究玉米总结，发现玉米须煎煮取汁，然后中国传统医药饮料的独特品味适当的细菌发酵，吃饭不仅方便，而且还充分发挥其作用医疗保健。3实验的部分3.1实验用的仪器以及试药3.1.1实验中用到的仪器和设备可见分光光度计，电热恒温水浴锅，超声波提取机，电子天平、分析天平（艾德姆衡武汉有限公司），索氏提取器（郑州欧佰仪器设备有限公司），旋转蒸发仪器（日产），GB204电子天平（瑞典），循环水多用真空泵（西安大福仪器），高速万能粉碎机（天津鑫博得仪器有限公司），聚酰胺柱（蒙达化工原料有限公司）。3.1.2试剂及药材玉米须药材，要用到的芦丁的对照品。亚硝酸钠，氢氧化钠，硝酸铝盐酸，锌粉（成都核八五七新材料有限公司），无水乙醇（天津市河东区红岩试剂厂），甲醇（西安化学试剂厂），三氯化铝等。所有实验用的试剂都为检验纯度。3.2实验里供试品溶液的调制玉米须干燥到恒重即可过60目的筛子，精密的称取十克用75%的乙醇在室温下浸提2次（每次2.5小时），过滤，滤液浓缩到1/5体积，得到了粗提取物，每0.5毫升粗提取聚酰胺柱层析，30毫升水洗，50毫升甲醇洗，收集甲醇洗脱液，浓缩至干，加甲醇50毫升后定容备用。3.3绘制实验标准曲线3.3.1芦丁的对照品调制 取在一百零五摄氏度干燥到恒重的芦丁的标准品零点零一毫克，加60%乙醇适量，放在水浴里面微热搅拌直到溶解，等到试剂冷却了以后用60%的乙醇用五十毫升的容量瓶定容至刻度，摇均匀以后，得到了浓度是0.0002mg/mL的对照品的溶液。3.3.2实验中选择了最大吸收波长选取了芦丁的对照品溶液，取没有水的乙醇来做空白的对照，在两百到六百纳米的波长的范围里面来进行扫描，检测到最佳测定波长。得到对照品的溶液在510nm处有最大的吸收峰，如图3.1所示。所以可以确定最佳的检测波长是510nm。图3.1波长的扫描图3.3.3制备芦丁的标准曲线取芦丁的标准溶液要精密零毫升、一毫升、二毫升、三毫升、四毫升、五毫升分别放到六个二十五毫升比色管中，加零点二毫升的5%NaNO2溶液，摇匀，再加零点二毫升的10%Al(NO3)3溶液摇匀之后放置五分钟，加五毫升的1moL/LNaOH溶液和零点五毫升的水摇晃均匀，放置十分钟，再用60%乙醇水溶液为空白，在510nm处来检测吸光值，用吸光度A为纵坐标，浓度C是横坐标，得到一个回归方程：A=5.1700C-0.0007，R2=0.9990。芦丁的标准品在0.23-0.5mg范围内是良好的线性的关系，结果见表3.1和图3.2。表3.1芦丁的标准的曲线的实验的结果浓度C(mg/mL)0.000.020.040.060.080.10吸光度A0.000.1100.2010.3020.4110.523图3.2芦丁的标准的曲线3.4方法学经过的考察3.4.1实验的重复性的试验取供试品溶液样品一共三份，各一毫升放入十毫升容量瓶中，加0.1moL/L的三氯化铝甲醇溶液毫升，用甲醇定容至刻度，摇晃均匀，放置十五分钟，可以得到测量的溶液。在最大波长伍佰壹拾纳米处测定了吸收度，分别记录得到吸光度值，计算之后得出总黄酮的含量。结果样品中的总黄酮的平均的含量为2.27%，如表3.2所示，RSD=1.38%，表明本方法重复性良好。吸光度浓度（mg/mL）称量(mg)含量（%）平均值（%）0.160.121937210.092.262.270.160.121937210.112.30RSD=1.38%0.160.121937210.032.25表3.2重复性试验结果3.4.2精密度的试验量取芦丁的对照品溶液一毫升置十毫升容量瓶中，加入五毫升l0.1moL/L的三氯化铝甲醇的溶液，用甲醇定容到刻度，摇晃均匀，放置十五分钟。另一个三氯化铝甲醇五毫升，放置十毫升量瓶中，根据连续的UV-可见光吸收分光光度法测定用甲醇稀释到刻度，用来作为对照的溶液。结果显示样品的平均的吸收值0.165，RSD=1.13%，如3.3所示，表明仪器精密度良好。表2.3精密度试验结果浓度吸光度数据分析0.0120.165平均吸收值0.165RSD=1.13%0.0120.1650.0120.1663.4.3实验的稳定性的试验对照品的实验的稳定性的实验的考察，精密的量取芦丁对照品溶液一毫升置十毫升的容量瓶中，加五毫升0.1moL/L的三氯化铝的甲醇溶液，用甲醇的定容至刻度，摇晃均匀，放置十五分钟，得到测量溶液。在最大波长伍佰壹拾纳米处测定吸收度，静置二十分钟，每过五分钟测定一次吸收度值共测五次，分别记录吸光度值。结果，RSD=1.26%(n=5)，如下表3.4所示，表明了对照品的溶液在四小时内的性质稳定。表3.4稳定性试验结果时间/h浓度吸光度数据分析00.0160.21RSD=1.26%(n=5)10.0160.2120.0160.2130.0160.2140.0实验的回收率的试验取已知的含量的供试品溶液各一毫升共三份，均精密的加入芦丁标准品溶液一毫升，在五百一十纳米处测定其吸光度，计算得出平均的回收率为93.37%，RSD值为1.95%。如表3.5所显示。故方法准确、可靠，可用于该物质的测定。表3.5回收率试验结果加样回收率93.30%93.29%92.52%平均值93.37%RSD1.95%3.5实验的样品含量得测定精密的取五毫升的供试品溶液一共三份，放入二十五毫升的容量瓶中，测定出吸光值，并把吸光值带入回归方程中，计算得到了总黄酮的平均的含量为2.27%。3.6实验的结果以及结果的分析玉米须里面的总黄酮用紫外分光，光度法含量的测定。用芦丁做为标准，校正了曲线以及曲线方程。紫外分光光度计测定得出了玉米须中的总类黄酮的含量是2.27%讨论运用紫外分光光度法测定在最大吸收波长为510nm的情况下，用分光度计将标准产品曲线简化为线性方程。NaNO2。摘要采用紫外分光光度法、重复性、精密度、稳定性、回收率等方法，测定玉米须柱头里类黄酮的含量。紫外分光，光度法测定柱头里面的总黄酮是一种非常稳定可靠的方法，但其灵敏度高于其他光谱分析方法。致谢在撰写这篇论文的过程中，我得到了老师，同学，同事的很多帮助，感谢导师严谨细致的工作作风，一丝不苟的作风一直是我在学习中的榜样；他们的指导和不拘一格的思维给了我无尽的启发..这张纸的每一个实验细节和每一个数据都是从老师的悉心指导分不开的。感谢我的爸爸妈妈，我怎么能有草，有树，有恩典的养育，没有回报，你永远的健康和幸福是我最大的愿望。在论文即将在完成之际，我的心情无法平静，从开始到纸张的顺利完成为多少可敬的老师，同学们的问题，朋友给了我无言的帮助在这里请接受我诚挚的谢意！同时也感谢学院为我提供良好的做毕业设计的环境。最后，我感谢所有在毕业设计中帮助我的导师和同学，以及我在设计中引用或引用的作品的作者。最后，向在百忙之中抽出时间来对本论文进行评审并提出宝贵意见的各位评审老师表示衷心地感谢！参考文献[1]张慧恩,徐德平.玉米须黄酮类成分的研究[J].中药材,2007,19(2):18-37.[2]许玉华,李静.玉米须治疗水肿[J].疾病控制杂志,2002,32(1):78-80.[3]窦传斌,杜娟,许启泰.玉米须多糖的利尿作用研究[J].河南大学学报(医学版),2007,2(3):17-27.[4]昌友权,杨世杰，王维佳,等.玉米须提取物抗肿瘤作用的实验研究[J].营养学报,2005,4(6):70-90.[5]刘娟,韩晓强,姜博.玉米须多糖治疗糖尿病作用机制的研究[J].中药新药与临床药理,2006,21(4):34-54.[6]吴绍宇,鲁彦,姚嵩坡,等.玉米须对老年小鼠细胞免疫功能的影响[J].中国老年学杂志,2005,9(11):98-102.[7]汤鲁宏,丁霄霖,尤丽芬,等,玉米须生物活性成分的初步研