ELSD药典方法和实验整理

ELSD药典方法和实验整理1．药典规定：产品名检测化合物药典中所在页数1黄芪黄芪甲苷一部P2122炙黄芪黄芪甲苷一部P2133银杏叶制剂中萜类内酯白果内酯一部P2204银杏叶提取物银杏内酯A，银杏内酯B，银杏内酯C，白果内酯一部P2815银杏叶片白果内酯一部P5976地肤子地肤子皂苷Ic一部P817知母菝葜皂苷元一部P1488浙贝母贝母素甲，贝母素乙一部P2059路路通路路通酸一部P24810薏苡仁甘油三油酸酯一部P26011乙肝宁颗粒黄芪甲苷一部P29012三金片羟基积雪草苷一部P32613玉屏风口服液黄芪甲苷一部P40914补中益气丸（水丸）黄芪甲苷一部P48015硫酸卡那霉素卡那霉素二部P72516硫酸卡那霉素注射液卡那霉素二部P72517硫酸卡那霉素滴眼液卡那霉素二部P72518注射用硫酸卡那霉素卡那霉素二部P72619硫酸依替米星依替米星二部P74120硫酸依替米星注射液依替米星二部P74121注射用硫酸依替米星依替米星二部P74222硫酸庆大霉素庆大霉素、小诺霉素二部P73123硫酸庆大霉素片庆大霉素、小诺霉素二部P73124硫酸庆大霉素注射液庆大霉素、小诺霉素二部P73125硫酸庆大霉素颗粒庆大霉素、小诺霉素二部P73226硫酸庆大霉素滴眼液庆大霉素、小诺霉素二部P7322．实验整理：（1）黄芪药典要求：（一部P212）；C18色谱柱，流动相-乙腈：水=32：68，蒸发光散射检测器，理论塔板数（以黄芪甲苷为标准）不小于4000。实际实验：黄芪样品：用户提供实验方法：色谱柱：UnimicrotechC18，250×4.6mm

,5µm流动相：乙腈:水梯度洗脱

流速：1mL/min时间

min0204056607075乙腈42545658090100水9675553520100蒸发光散射检测器条件：气体流速：3L/min蒸发温度：40℃实验结果：1．黄芪甲苷对照品2.黄芪样品甘肃样品吉林样品：小结：实验还未按照药典方法进行对照实验；根据实际用户的样品实验，黄芪皂苷类物质在蒸发光散射检测器上有良好的检测。（2）银杏药典要求：（一部P220）；C18色谱柱，流动相-甲醇：四氢呋喃：水=25：10：65，蒸发光散射检测器，理论塔板数（以白果内酯为标准）不小于3000。实际实验：白果内酯样品：标准对照品实验方法：色谱柱：C18，250*4.6，5um流动相：正丙醇：四氢呋喃：水=1：25：74进样量：10ul流速：1ml/min柱温：30蒸发光散射检测器条件：检测器：UM3000ELSD蒸发温度：100载气流量：2.5L/min实验结果：小结：实验还未按照药典方法进行对照实验；（3）卡那霉素药典要求：（二部P725）；C18色谱柱；流动相-0.2mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（95:5）；蒸发光散射检测器；以卡那霉素和卡那霉素B对照品适量，用水溶解并制成每1ml各约含80ug的混合溶液，取20ul注入液相色谱仪，连续进5针。分离度都大于5；峰面积重现性都小于2%。实际实验：卡那霉素样品：标准对照品实验方法：色谱柱：ProntoSILC18(250*4.6mm,5um)；流动相：0.2mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（95:5），流速：1ml/min蒸发光散射检测器条件：蒸发温度：110度气体流速：3L/min实验结果：重复性实验：样品卡那霉素卡那霉素B分离度项目ATATtest11867594.2251261225.5046.07test21882434.2111244185.5036.05test31874394.2191266665.5065.99test41825834.1991224955.4956.24test51890224.2231234565.5076.09AVE186809.24.2154124631.45.5036.088SD2510.5880.0106211757.3270.004743RSD%1.340.2521.410.861定量分析：按药典要求，取卡那霉素对照品适量，精密称定，用水溶解并制成每1ml中约含卡那霉素0.1、0.15、0.2的溶液。取20ul注入液相色谱仪，以对照品浓度的对数植与相应的峰面积对数植计算回归方程。结果线性相关系数大于0.99。浓度g/ml0.10.150.2A峰面积261797429352656244260325428246643096247391448778622726AVE256504.3435458.7640688.7Log(浓度）-1-0.82391-0.69897Log(Aave)5.4090955.6389475.806647小结：已按照药典方法完成对照实验，实验结果表明，UM3000蒸发光检测器可完全符合药典检测方法要求。（4）依替米星药典要求：（二部P741）；C18色谱柱；流动相-0.2mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（84:16），流速0.5ml/min；蒸发光散射检测器；以依替米星和萘替米星对照品适量，用水溶解并制成每1ml各约含0.2mg的混合溶液，取20ul注入液相色谱仪，连续进5针。分离度不小于1.2；峰面积重现性都不大于2%。实际实验：依替米星和萘替米星对照品；实验方法：流动相：甲醇：水（16：84）含0.2%TFA色谱柱：UnimicroC18250*4.65um流速：0.5ml/min样品浓度：0.5mg/ml蒸发光散射检测器条件：检测器：UM3000ELSD蒸发温度：100度气体流速：3L/min实验结果：小结：未按药典做对照品重复性和定量性实验。（5）庆大霉素、小诺霉素药典要求：（二部P731）；C18色谱柱；流动相-0.2mol/L三氟乙酸溶液-甲醇（92：8），流速0.6ml/min；蒸发光散射检测器；以庆大霉素和小诺霉素对照品适量，用水溶解并制成每1ml各约含0.2mg的混合溶液，取20ul注入液相色谱仪。分离度应符合要求；峰面积重现性都不大于2%。实际实验：庆大霉素和小诺霉素对照品；实验方法：色谱柱：UnimicroC18(5μm，4.6*250mm)流动相：甲醇:水（8：92）（含0.15%TFA）流速：0.6ml/min浓度：0.2mg/ml蒸发光散射检测器条件：检测器：UM3000ELSD蒸发温度：90℃载气流速：2.8L对照品：样品：硫酸庆大霉素注射液浓度：0.5mg/ml小结：未按药典方法进行对照品实验（TFA浓度低于药典方法）；未进行重复性和定量性实验。其他ELSD相关实验（1）酯维注射液实验方法：色谱柱：硅胶柱，250*4.6，5um流动相：正己烷：异丙醇：乙酸=98.9：1：0.1流速：1ml/min柱温：室温对照品20ul蒸发光散射检测器条件：检测器：UM3000ELSD蒸发温度：60载气流量：2.5L/min实验结果：（2）氨基酸实验方法：色谱柱：ProntoSILC18（250×4.6mm,5流动相：乙腈/水（10/90），含TFA0.1%流动相流速：1ml/min蒸发光散射检测器条件：检测器：UM3000ELSD蒸发管温度：40℃载气流速：3L/min应用研发建议按照药典方法，将黄芪、依替米星和萘替米星、庆大霉素和小诺霉素的对照实验（完全按照药典方