地表水水质监测 BOD5测定稀释与接种法关键技术

BOD5测定稀释与接种法关键技术1.稀释与接种法概述（1）方法依据：见《水中-五日生化需氧量（BOD5）的测定-稀释与接种法（HJ505-2009）》；（2）适用对象：适用于地表水、工业废水和生活污水的BOD5测定；（3）检出与测定限：检出限0.5mg/L，测定限6~6000mg/L。22.稀释与接种法原理

BOD5是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度DO1和DO2，则：

BOD5（mg/L）=DO1−DO2①稀释：有机物含量过高（BOD5>6mg/L）的样品需适当稀释后测定；②接种：不含或含微生物少的工业废水（如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存废水和氯化处理废水等）应接种后测定BOD5以引进能分解废水中有机物的微生物。③驯化接种：废水含有剧毒物质，或所含有机物难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。33.稀释水制备（1）纯水曝气：取一定量不含氯或氯胺物质的三级纯水于5～20L的玻璃瓶中，在(20±1)℃水温下曝气1h，使其DO值达到8mg/L以上。（2）加营养盐：临用前，向每升水中加入氯化钙溶液（27.6g/L）、氯化铁溶液（0.15g/L）、硫酸镁溶液（11.0g/L）和磷酸盐缓冲液(pH=7.2)各1.0ml，混匀，使其pH=7.2、BOD5<0.2mg/L，20℃保存。（3）氧平衡：使用前需在(20±1)℃下开口放置1h（防止稀释水的氧过饱和）。（4）使用限时：制备好的稀释水应在24h内使用，剩余的稀释水应弃去。43.接种水制备（1）生活污水：采集COD≤300mg/L、TOC≤100mg/L的未受工业废水污染的生活污水适量，室温下放置一昼夜，取上清液使用。（2）表土浸出液：取100g生长植物的花园或农田表层土壤于2L的烧杯中，加入1L水，混匀后静置10min，取上清液使用。（3）含城镇污水的河水或湖水：室温下静置24h，上清液备用。（4）污水处理厂出水：二沉池出水。（5）购买微生物接种物质：接种液的配制和使用参见其说明书。54.驯化接种水制备（1）天然驯化：待测工业废水排污口下游3~8km处地表水水样。（2）人工驯化：①取中和或经适当稀释后废水连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生活污水，使适应该种废水的微生物大量繁殖。②培养3～8d后，当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖，其上清液作接种液。65.接种稀释水制备（1）制备方法：取适量接种液加于稀释水中混匀，于（20±1）℃的环境中备用，要求当天配制当天使用。（2）接种液用量：依来源不同而异，一般每1000mL稀释水中加入城市生活污水或污水处理厂出水1～10ml，而加入河水或湖水10～100ml。（3）水质指标：配制好的接种稀释水pH=7.2，BOD5<1.5mg/L。76.BOD5水样采集（1）水样应充满并密封于棕色玻璃瓶中，样品量>1000ml；（2）密封于棕色玻璃瓶的水样应在0～4℃的暗处运输和保存，并于24h内尽快分析；（3）24h内不能分析的水样应冷冻保存，分析前样品需解冻、均质化和接种。87.BOD5水样预处理（1）调节pH：测定前要用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节pH值至6～8。（2）去除余氯：含有少量余氯的水样，应采样后放置1～2h，或加入适量亚硫酸钠溶液去除。（3）均质化：含有大量颗粒物样品、需大倍数稀释样品和冷冻保存样品，测定前均需将样品搅拌均匀。（4）除藻类：含大量藻类的样品，测定前要用1.6μm滤孔的滤膜过滤。（5）补充营养盐：电导率<125μS/cm的原水样，需加入适量等体积的四种营养盐溶液，使其电导率大于125μS/cm。9（6）

调节水温和溶解氧：①调节水温：测定前应将使待测试样的温度达应到20±2℃；②调节溶解氧量：测定前试样溶解氧含量过低，需曝气15min、振摇赶走样品中残留的气泡；若试样中氧过饱和，则样品充满容器2/3体积，用力振荡赶出过饱和氧。108.稀释倍数确定（1）确定原则：使培养过程消耗的溶解氧和培养后剩余的溶解氧均不小于2mg/L，且剩余的溶解氧含量为培养前的1/3~2/3最佳。（2）确定方法：①根据待测水样的高锰酸盐指数IMn、化学需氧量CODCr或总有机碳TOC的测定值，按照表1中的BOD5与Imn、CODCr或TOC的比值R，估计BOD5的期望值；118.稀释倍数确定（2）确定方法：②再根据表2确定稀释因子。③当不能准确选择稀释倍数时，一个样品做2~3个不同的稀释倍数。129.稀释方法（1）取适量稀释水或接种稀释水，于稀释容器中备用；（2）按照确定的稀释倍数，将一定体积的试样或处理后试样用虹吸管注入稀释容器中；（3）再次注入稀释水或接种稀释水至刻度，轻轻混合避免残留气泡，待测定；（4）如果若稀释倍数超过100倍，可进行两步或多步稀释。1310.空白试样（1）稀释法测定：空白试样为稀释水，需要时每升稀释水中加入2ml丙烯基硫脲硝化抑制剂；（2）稀释接种法测定：空白试样为接种稀释水，必要时每升接种稀释水中加入2ml丙烯基硫脲硝化抑制剂。1411.溶解氧测定（1）碘量法：

将处理好的试样充满两个溶解氧瓶中，使试样少量溢出；将一瓶盖上瓶盖、加水封、罩上密封罩，在恒温培养箱中培养5d±4h后测定DO2值；另一瓶于恒温培养箱中15min后测定DO1值；BOD5=DO1-DO2。1511.溶解氧测定（2）电化学探头法：将试样充满一个溶解氧瓶中，使试样少量溢出；测定培养前试样DO1值中；盖上瓶盖、加上水封，在瓶盖外罩上一个密封罩；将试样瓶放入恒温培养箱中培养5d±4h后测定其DO2值；BOD5=DO1-DO2。（3）空白测试方法与试样相同。1612.结果计算式中：ρ—五日生化需氧量质量浓度，mg/L；ρ1—接种稀释水样在培养前的溶解氧质量浓度，mg/L；ρ2—接种稀释水样在培养后的溶解氧质量浓度，mg/L；ρ3—空白样在培养前的溶解氧质量浓度，mg/L；ρ4—空白样在培养后的溶解氧质量浓度，mg/L；f1—接种稀释水或稀释水在培养液中所占的比例；f2—原样品在培养液中所占的比例1713.检测结果报告（1）BOD5测定结果以氧的质量浓度（mg/L）报出；（2）如果多个稀释倍数下的测定结果均满足要求，则以这些稀释倍数测定结果的平均值为最终检测结果；（3）测定结果<100mg/L的保留一位小数，在100～1000mg/L的取整数位，>1000mg/L的以科学计数法报出；（4）报告应注明样品是否经过过滤、冷冻或均质化处理。1814.检测质量控制（1）空白控制：每一批样品做两个分析空白试样，稀释法空白试样的测定结果≤

0.5mg/