薄荷浸提物抑菌性研究

薄荷浸提物抑菌性研究

食品保护是食品保护的关键，因此，它是食品科学领域的研究热点和难点。由于食品本身含有大量的水分和丰富的营养成分,是微生物天然的良好培养基,只要条件适宜,微生物就会大量繁殖,导致食品腐败变质。为防止腐败,向食品中添加防腐剂是比较普遍采用的方法。长期以来,在食品工业中都习惯于使用化学合成品作为食品的防腐剂,如苯甲酸及其盐类、山梨酸及其盐类和对羟基苯甲酸酯类等,但这些化学合成的食品防腐剂在使用过程中或多或少地会对食品的风味产生一定的不良影响。同时,这些防腐剂在食品加工中的添加量都比较大,容易超标使用而对人体产生毒副作用。现在人民生活水平不断提高,对健康的日益关注以及对食品的卫生安全性的日趋重视,人们对防腐剂之类的食品添加剂的要求也越来越高,不但在安全性上提出了更高的要求,而且追求添加剂的营养化和功能化,因而极大地促进了高安全性的生物型防腐剂的研究、开发和应用。香辛科植物的抑菌防腐作用可以追溯到三、四千年前古埃及的木仍伊。将近一个世纪以来,科学家们对多种香辛料植物进行了抑菌抗菌试验,发现许多香辛科植物及其精油都含抗菌成分,有不同程度的抗菌效力,此外还有着色、抗氧化、防腐以及生理药理作用。因此,本研究选择薄荷这种芳香类植物做抑菌性研究,以期能提供一种安全无副作用的生物防腐剂。1材料和方法1.1西南科技大学大学科学研究中心金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、红曲霉(Monascusanka)、根霉(Rhizopusstolonifer)、黑曲霉(Aspergillusniger):由西南科技大学生命科学与工程学院实验中心提供。1.2薄荷购买自绵阳市天诚大药房。1.3培养基培养细菌用牛肉膏蛋白胨固体培养基,培养真菌用PDA培养基。1.4不同ph值的提取液制备用三种方法分别提取薄荷浸提液。提取液A:取样50g洗净晾干,捣碎破壁,盛于烧杯中,加入150mL无水乙醇、90mL冰醋酸,补充蒸馏水至600mL,浸泡16h,溶液颜色变成黄棕色或棕色后用四层纱布过滤,取180mL滤液进行蒸馏,蒸出乙醇和部分醋酸后定溶到25mL。用适宜量的氢氧化钠中和剩余的乙酸,此时测得提取液A的pH值为7.0。提取液B:取样50g洗净晾干,捣碎破壁,盛于烧杯中,加入150mL无水乙醇,补充蒸馏水至600mL,浸泡16h,溶液颜色变成黄棕色或棕色后用四层纱布过滤,取180mL滤液进行蒸馏,蒸出乙醇和部分醋酸后定溶到25mL。用适宜量的氢氧化钠中和剩余的乙酸,此时测得提取液B的pH值为7.0。C号提取液:取样50g洗净晾干,捣碎破壁,盛于烧杯中,加蒸馏水至600mL,微火煮沸0.5h。用四层纱布过滤,取180mL滤液进行蒸馏,蒸馏后定溶至25mL,此时测得C提取液的pH值为7.0。将上述提取得到的原液视为100%,再将其稀释到50%、10%备用。1.5菌液制备及培养抑菌圈直径大小的测定用琼脂扩散纸片法。预先把各种供试菌种用相应培养基分别进行菌种活化。然后挑取菌落,接种到平板培养皿培养24h,用无菌生理盐水洗脱分别制成含菌约106~107CFU/ml的菌液,备用。将吸水性强的滤纸,用打孔器打成若干直径为6mm的圆形纸片,经高压灭菌后,用无菌摄子夹取浸在浓度为(100%、50%、10%)的A、B、C提取液中过夜,备用。将滴入0.2mL供试菌液分别用无菌涂布器涂布均匀于相应平板培养基,再用无菌摄子夹取浸有提取液的滤纸片贴于上述平板培养皿中,每个培养皿贴三张。然后放入适宜温度的培养箱中培养(真菌28℃、培养48小时,细菌37℃、培养24小时),测抑菌圈大小,并记录数据。1.6水浸泡的制备在不同浓度的薄荷浸提液中,浸泡同样重量(50g)的新鲜猪肉约1小时,同时以无菌水浸泡,作为对照,取出,置于灭过菌的干燥容器中,于常温(实验室温度为25℃)下保存。猪肉变质以其是否出现颜色变化及臭味的出现为标准(与鲜猪肉对比)。2结果与讨论2.1不同浓度浸提液对真菌生长的影响从结果可以看出:薄荷浸提液A液(三种浓度)对实验所用的七种细菌及真菌的生长均有抑制作用。且抑菌效果随着浸提液浓度的降低而减弱。对红曲霉的抑制效果相对于金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、啤酒酵母、黑曲霉、根霉等六种细菌及真菌的抑菌圈比较小。2.2不同浓度浸提液对生长的抑制作用薄荷浸提液B液对实验所用的七种细菌及真菌的生长均有抑制作用。且抑菌效果随着浸提液浓度的降低而减弱。但当浓度降到10%时,浸提液B对啤酒酵母、黑曲霉、根霉,没有抑制作用。2.3不同浓度浸提液对生长的抑制作用薄荷浸提液C液对实验所用的七种细菌及真菌的生长均有抑制作用。且抑菌效果随着浸提液浓度的降低而减弱。但当浓度降到10%时,浸提液C对啤酒酵母、黑曲霉、根霉,没有抑制作用。2.4薄薄液浸提液的保鲜效果由表2对比结果可以看出:相对于用无菌水浸泡的对照组,用薄荷浸提液浸泡的猪肉变质的时间要长得多。其中以100%和50%的浸提液A鲜效果最长,为7天。在室温下25℃,保存的猪肉,其色、香、味与鲜肉相似。因此,试验证明薄荷浸提液对猪肉具有很好的防腐效果。但是实验中,存在一点缺憾就是,没有用抗生素做阳性对照。如能结合低温保存,相信效果会更好。3薄荷精油作食品和天然食品通过本实验研究,证明薄荷浸提液具有一定的抑制细菌及真菌生长的作用。同时,通过前人大量研究发现,它是一种纯天然的芳香类植物,它安全无毒,无副作用。并且在提取浸提液的过程中,没有使用任何有毒物质,提取薄荷浸提液使用的是我们日常生活中都要食用的乙醇和乙酸,所以不会对人体产生任何毒副作用。这是薄荷能开发成为食品天然植物防腐剂的前提。若能将其开发成为一种天然的食品防腐剂,将会是天然食品防腐剂的又一起点。薄荷已被广泛种植,很容易得到。且若薄荷能被大量开