病理生理学实验指导

病理生理学实验指导汪思应郑红邓松华安徽医科大学基础医学院病理生理教研室目录概论┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈1病理生理实验大致操作方式┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈2实验性肺水肿┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3兔小肠浇灌的水肿模型复制┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈3缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈4再吸入式缺氧┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5钾代谢障碍┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5失血性休克┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈5喜树碱诱导细胞凋亡┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈6急性左心衰竭┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈7急性右心衰┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8病例讨论—肝性脑病┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈8病例讨论—急性肾功效不全┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈9病例讨论—MODS┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈10病理生理学实验教学大纲┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈11病理生理学教学大纲┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈┈12概论病理生理学（Pathophysiology）是一门联系基础医学和临床医学的重要桥梁学科之一。它在理论课程中要紧介绍了在致病因素作用下机体的性能代谢：=1\*GB3①发生何种变化（即临床病症及体征）；=2\*GB3②为什么发生变化（即临床病症及体征显现的机制）；=3\*GB3③这些变化的规律性及与疾病的关系；=4\*GB3④防止和处置这些变化的机理（即疾病防治办法的原理）。因此，病理生理学是一门理论性科学。同时它又是一门实验性科学。病理生理学的实验方式有两种，即临床研究和动物实验研究。临床研究的成果虽能直接应用于患者，但有专门大的局限性。因此，病理生理学要紧采用动物实验研究方式。在动物身上复制各类疾病或病理进程，作为人类对应疾病的模型。实验者可操纵或变化实验条件，以研究疾病的病因、发病环节、发病机制等。还可用于疾病的实验性防止、医治及新型药品和医治手腕的开发研究等。人类疾病动物模型的复制有诸多方式。大致归纳为下列几个：=1\*GB3①从自然界当选择发病动物（如选择生长有肿瘤的鼠、狗等）作为疾病动物模型。但该动物模型个体间不同专门大，且发病条件及病程等不易操纵，已极少被直接采纳。现要紧用经人工选择哺育的不同品系的发病动物如由Okamoto和Aoki选育成功的SHR大鼠，其成年后100%发生高血压，经常使用作自发性高血压的动物模型。我国天津医学院哺育成功的津白-Ⅱ小鼠，成年后易发生乳腺癌等;=2\*GB3②根据疾病发生缘故来复制疾病的动物模型。如用二乙基亚硝胺、二甲基偶氮苯来复制大鼠肝癌动物模型；我室张载福专家用盲肠结扎穿孔法造成小鼠腹腔感染来复制全身性炎症反映综合症（SIRS）的动物模型；=3\*GB3③根据疾病发生机制复制动物模型。如本指导顶用大剂量快速输液提高家兔肺毛细血管流体静压以复制的实验性肺水肿模型，动脉操纵性放血造成的失血性休克模型。=4\*GB3④根据疾病的发生环节复制疾病的动物模型。本室将Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)接种小鼠足掌复制的肿瘤自发肺转移模型，将LLC及B16黑色素瘤（B16Melanoma,B16M）细胞直接注入小鼠眼球后静脉所复制的肿瘤血道转移模型。⑤转基因动物(TransgenicAnimal)或基因敲除(GeneKnock-out)复制疾病动物模型。要紧用于遗传性疾病、重要基因功效的研究。一，病理生理的实验目的病理生理学实验课的要紧目的是：=1\*GB3①通过教学实验指导学生初步把握人类疾病动物模型复制的大致方式；=2\*GB3②通过典型临床病例的课堂讨论，哺育学生分析病例的能力，为临床思维和临床决策打下基础；=3\*GB3③帮忙学习者锻炼操作技术、验证和温习理论知识；=4\*GB3④通过实验与课堂讨论的具体环节，使学生初步含有进行医学研究与临床思维所必备的“严肃的科学态度、周密的科学方式和严谨的科学作风”等。二，病理生理学实验课的规定实验前=1\*GB3①认真温习实验有关理论及预习实验指导，理解实验的大致情形;=2\*GB3②用心听取指导教师对实验内容的解说，熟悉实验的具体方式及操作规程;=3\*GB3③领取并检查实验器材和药品是不是齐全;=4\*GB3④小构组员应有分工，但同时应注意合作，使每人都能获得应有的技术训练。实验时=1\*GB3①每人应确立严谨、实事求是的科学态度，正规和精确的技术操作耐心、细致地观看实验中显现的每一种现象；并且要精确、及时、客观地统计。整个实验进程都不得敷衍、马虎和主观臆测;=2\*GB3②必需随着整个实验进程进行科学思维，力求理解每一种环节和每一种现象的意义;=3\*GB3③要注意尽量减少对实验动物的没必要要损伤;=4\*GB3④爱惜实验器材，运用药品应注意节省。实验后=1\*GB3①认真整顿和分析实验成果;=2\*GB3②仪器和药品用完后要清点，并放回原处。应清洗者必需及时清洗干净。每一种实验组，应维持自己桌面的清洁，每次下课后，清扫、整顿好实验室;=3\*GB3③准时完毕实验报告，交教师评阅。三，病理生理实验报告应书写的项目和内容1，姓名、班次、组别、日期。2，实验名称。3，实验目的及原理。4,实验动物及材料：涉及种类、数量、性别、体重。5,实验的具体环节：简要写出要紧实验方式。6,实验成果。依如实验目的将原始统计系统化、层次化。其体现方式有：=1\*GB3①体现式：用文字将观看到的、与实验目的有关的现象客观地加以描述，描述时需要有时刻概念与次序。=2\*GB3②表格式：能够较为清晰地反映观看内容，有助于彼此对照。每一图表应阐明必然的中心问题。图表应由学生自己设计。表内的项目及计量单位应填明。=3\*GB3③曲线式：实验中描记的血压、呼吸等曲线应写于实验报告中。书写时，须根据原始的描记图，取其明显转变的有关各段连接而成。7,实验成果分析或讨论。由于实验指导中的每一种实验，都通过编写单位重复试做，成果靠得住。同窗所做实验，次数虽少，假设与这成果大致一致，即可作为分析的根据。讨论要涉及：=1\*GB3①运用所学理论，讨论和阐明实验成果，论证明验目的。=2\*GB3②实验成果提示了哪些新问题。若是显现“异样现象”，应加以分析。8,结论：依如实验成果简腹地写明。(汪思应)实验一大致实验操作训练[实验目的]理解病理生理学动物实验的大致用途、技术；把握气管、颈动脉、静脉及股动脉插管，输液及血压测量技术。[药品和器材]生理盐水（%NaCl），%NaCl、%肝素、普鲁卡因。小动物手术器械一套（每套大号止血钳各两把，中号采止血钳两把，弯直小号止血钳各两把，有齿镊各一把，眼科剪和镊各一把，组织剪和粗剪各一把，手术刀片的刀柄一副）、粗细缝线各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6号针头），标本架（弹簧夹）一种，搪瓷搪瓷碗（25ml）和方盘各一种。[实验动物]家兔，体重kg。[要紧内容]病理生理学教学经常使用实验动物介绍病理生理学实验研究采纳何种动物，是决定研究成功与否的一种重要问题。同样应针对实验目的，根据各类实验动物疾病模型的体会，一一考虑下述一系列问题：所规定的大致模型可否复制成功，成功率大小，采纳的方式和所观看指标是不是简朴易行，实验成果稳固一致的程度如何，动物是不是便于治理，所获得的实验成果和人的临床情形相较相似性的大小，需耗费的人力、物力、财力等。只有对这些因素进行综合考虑，比较后来，才干确信采纳何种动物较为适合。在教学上，不仅要考虑以上这些问题，还应考虑教学成效，才干知足实验的目的和规定。病理生理学实验经常使用的动物有：兔、大白鼠、小白鼠、狗等。它们和人同样，都属于哺乳类动物。它们的生理特性与人靠近。现将病理生理学实验经常使用的动物用途介绍以下：家兔家兔能用于复制许多病理进程和疾病，如：水肿、炎症、电解质紊乱、酸碱平稳紊乱、出血性休克、DIC、肺癌、动脉粥样硬化、高脂血症、心律失常、慢性肺心病、慢性肺动脉高压、肺水肿、肝炎、胆管炎、阻塞性黄疸、肾性高血压、肾小球肾炎、急性肾功效衰竭等。特点：=1\*GB3①价钱较低，性温顺，易喂养，繁衍率高，容易选到调剂类似的对照组兔。因此，当实验中必需用较大动物时，经常使用家兔；=2\*GB3②在血液循环方面，家兔血管虽较狗略细，但很容易做到直接描记颈动脉压、股动脉压、肺小动脉契压、中心静脉压等。兔的心血管系统性能较猫、狗为差，用来观看血压反映不如狗。手术时，兔易发生反射性衰竭，血压反映不稳固，故给兔做手术时，动作要轻。兔的减压神经是独立走向的，便于观看减压神经对心、血管系统的作用。家兔心脏在离体情形下，搏动很久，是观看有害因子对哺乳类动物心脏直接作用较适合的一种模型。离体兔耳，又可作为观看有害因子对血管直接作用的一种模型；=3\*GB3③家兔合用于研究发热、解热药和检查致热源；=4\*GB3④消化系统方面：家兔系草食动物，消化系统与人类相差较远，缺少呕吐反射，因此不能用家兔作消化系统方面的研究；⑤其它：家兔对组织胺不敏捷，对注射组织胺并非产生血压下降，乃至显现升压反映；因此，对家兔注射大量组织胺，并非能造成过敏性休克模型。实验用家兔体重必需公斤以上。小鼠小鼠能用于复制许多病理进程和疾病，如：水肿、炎症、缺氧、多个癌、肉瘤、白血病、多个传染病、慢性气管炎等。特点：=1\*GB3①小鼠是实验室最经常使用的一种动物，价钱低廉，便于大量繁衍，对动物实验同种、纯种、性别和年纪的规定，比较容易知足，生活条件也容易操纵。因此只要符合实验规定，应尽量采纳。它适合于需要大量动物的实验，容易知足统计学的规定。例如：胰岛素、促肾上腺皮质激素的生物效价测定，毒物半致死量的测定；=2\*GB3②小鼠对许多疾病有易感性，因此合用于研究这种疾病，例如：血吸虫病、疟疾、流感、脑炎等病。小鼠的纯种品系甚多，每系有其独特的生物特性，对某些疾病易感，例如：C3HA系对癌瘤敏捷，C58系那么抗癌；因此，纯系小鼠普遍应用于各类肿瘤的研究；=3\*GB3③当研究指标要紧为组织学专门是电镜观看时，应用小鼠因器官较小，可节省人力、物力。例如：用于研究慢性气管炎时肺的转变；=4\*GB3④小鼠含有发达的神经系统，能应用于复制神经官能症模型；⑤小鼠对外界环境适应性差，不耐冷热，经不起饥饱，比较娇嫩；因此，做实验时要耐心细致，动作要轻，否则会干扰实验成果。实验用小鼠经常使用品系有昆明种小鼠、BALB/C、C57BL/6等,必需6-8周龄，18-20克。可依如实验规定选择性别。大白鼠大白鼠能用于复制许多病理进程和疾病，如：水肿、炎症、缺氧、休克、DIC、心肌梗塞、肝炎、肾性高血压、各类肿瘤等。特点：=1\*GB3①大白鼠和小白鼠相似，便于大量繁衍、对动物实验同种、纯种、性别和年纪的规定，比较容易知足，生活条件也容易操纵，适合于需要大量动物而小白鼠不能知足实验规定时，如：中断亚硝胺口服或胃肠道外给药能诱发大白鼠食道癌，而在小白鼠那么极少引发食道癌；因此，在这种情形下，采纳大白鼠较为适合；=2\*GB3②大白鼠较小白鼠体大，对需要作大致型的实验，用大白鼠较为适合，例如：可用于直接统计血压，其血压反映较家兔为宜，大白鼠可用于研究休克，DIC时血液循环转变，大白鼠后肢可用作肢体血管灌流实验，其心脏可用作离体心脏实验，从大白鼠胸导管采用淋巴能研究疾病时淋巴的转变；=3\*GB3③大白鼠无胆囊，因此，经常使用大白鼠胆管收集胆汁，进行疾病时胆汁功效研究；=4\*GB3④大白鼠的垂体-肾上腺系统功效很发达，经常使用作应急反映和肾上腺、垂体等内分泌功效实验，大白鼠的高级神经活动发达，因此，也普遍用于神经官能症的研究。大白鼠经常使用品系有SD、Wister，经常使用6-8周龄，体重250克的大鼠。动物的缉捕和固定及其它操作方式动物的缉捕和固定是进行动物实验的大致操作之一，实验者应当把握娴熟，第一，应付动物的同样习性有所理解，然后依其习性的不同，采纳对应温顺的方式，快速将其固定在便于实验操作和观看统计的体位。下面介绍几个经常使用动物的缉捕和固定方式。家兔的缉捕和固定,颈部手术、股动脉分离及插管1，家兔的缉捕和固定：家兔习性温顺，除脚爪锐利应幸免被其抓伤，较易捕获，缉捕时切忌以手提兔耳。拖沓四肢或提拿腰背部。对的的方式是用右手抓住其项背部皮毛，轻提动物，再以左手托住其臀部，使兔的体重要紧落在左手掌心。家兔的固定，依不同的实验需要，经常使用兔盒固定或兔台固定。我室采纳兔台固定：在需要观看血压、呼吸和进行颈、胸、腹部手术时，应将家兔以仰卧位固定于兔手术台上，固定方式是，先以四条宽的布带做成活的骗局，别离套在家兔的四肢腕或踝关节上方，抽紧布带的长头，将兔仰卧位放在兔台上，再将兔头固定器固定。然后将两前肢放平直，把两前肢的系带从背部交叉穿过，使对侧的布带压住本侧的前肢，将四肢别离系在兔台的木桩上。练习耳缘静脉注射。2，家兔颈部手术、股动脉分离及插管：家兔称重固定于兔台后，剪去其颈部兔毛，在取普鲁卡因皮下浸润麻醉，沿颈正中切开颈部皮肤约，分离皮下筋膜组织，可见三块肌肉：即颈正中的胸骨舌骨肌，双侧的胸锁乳突肌。在胸锁乳突肌外缘与皮瓣交壤处是颈外静脉，钝性分离滑腻一侧颈外静脉，在下面穿两条线，结扎颈外静脉远心端，在近心端靠近结扎处剪一小口插入静脉导管（静脉导管连接静脉输液装置，注意排除管道的气体），结扎固定，打开静脉输液装置的螺旋夹，若是输液畅通时，即调节螺旋夹使液体维持5-10滴/分钟以维持插管畅通。分离开胸骨舌骨肌，其下方是气管，分离并“倒T型”切开气管，插入气管插管及结扎。预备描计呼吸。在气管的左右后方，各有一条与交感神经、迷走神经伴行的颈动脉，分离颈动脉并穿线两条，结扎颈动脉远心端，用动脉夹夹住近心端，在近心端靠近结扎处剪一小口插入动脉导管（动脉导管内充含肝素的生理盐水，并与血压计相连，血压计压力140mmHg左右），结扎并固定导管，松开动脉夹可测量血压。剪去一侧腹股沟兔毛，触摸股动脉搏动以确信其位置，在%普鲁卡因皮下浸润麻醉下，沿股动脉走行方向切开皮肤，分离皮下组织，在股动脉隐窝处找出并警惕分离出股动脉，穿线两条，结扎股动脉远心端，用动脉夹夹住近心端，在近心端靠近结扎处剪一小口插入动脉导管（动脉导管与50mL注射器相连，并用肝素抗凝），结扎并固定导管，松开动脉夹可放血。大白鼠的缉捕和固定大白鼠牙齿锋利，要提防被其咬伤，从鼠笼内缉捕时右手最佳带手套，抓住其尾巴，提出置于实验台上，以左手拇指和食指、中指抓住两耳后项背部皮肤，将鼠固定在左手掌中，右手进行操作，也可张开左手之虎口，敏捷地从背部插向腋下，使食指位于左前肢前，拇指、中指位于左前肢后来，一把抓住，右手进行操作，如操作时刻较长，可参考家兔固定方式将其固定在大白鼠固定板上。小鼠的捕获和固定小鼠较大白鼠温和，虽也要提防被其咬伤手指，但勿需带手套捕获。可先用右手抓住鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上，用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后项背部皮肤，将鼠体置于左手心中，拉直后肢，以无名指及小指按住鼠尾。同时右手可手持注射器作小鼠腹腔等注射。（汪思应）实验二实验性肺水肿［目的规定］复制实验性肺水肿结合理论把握肺水肿的体现及其发生机理［实验原理］大剂量快速输液致使兔肺毛细血管流体静压升高，肺组织液生成不小于回流，引发肺水肿的发生。［实验动物］家兔，体重kg。[药品及器材]%普鲁卡因，肾上腺素,生理盐水（%NaCl）,常规小动物实验用器材。[环节及观看]一实验组取兔一只，称体重后仰卧固定于兔台上、剪去颈部被毛，在1%普鲁卡因局麻下切开颈部皮肤，按常规操作，分离气管和一侧颈外静脉，在下面穿一线。切开气管，插入气管插管。预备描计呼吸。把静脉导管连接静脉输液装置，注意排除管道的气体。结扎颈外静脉远心端，在近心端靠近结扎处剪一小口插入静脉导管，结扎固定，打开静脉输液装置的螺旋夹，若是输液畅通时，即拧紧螺旋夹。描计同样正常呼吸，并用听诊器听肺的呼吸音，然后输入37℃生理盐水（输入总量按100-120ml/kg,输记速度为180-200滴/分）待滴注将近完毕当即从输液瓶中加入稀释肾上腺素生理盐水（按肾上腺素kg体重）。紧密观看呼吸变化和气管插管是不是有粉红色泡沫液体流出，并用听诊器听诊肺部有无湿性罗音显现，当证明肺水肿显现时，那么夹住气管，处死动物，打开胸腔，用线在气管分叉处结扎（避免肺水肿液流出）在结扎处上方切断气管，警惕把心脏及其血管分开，（勿损伤肺）把肺掏出，用滤纸吸去肺表面的水分后称取肺重，计算肺系数，用排水法测肺体积。然后肉眼观看肺大致的变化，并切开肺，观看肺水肿和正常肺组织切片。肺系数=肺重（克）/兔体重（公斤）正常肺系数二对照组与实验组大致相似，除不加肾上腺素外。[注意事项]实验兔和对照兔的输记速度应大致一致，输液不要太快，以操纵在180-200滴/分为宜。解剖掏出肺时，注意勿损伤肺表面和挤压肺组织，以避免水肿液流出，妨碍肺的数值。（郑红、汪思应）参考实验一兔小肠浇灌的水肿模型复制[实验目的]学会小肠浇灌标本的制作。理解毛细血管压，胶体渗入压，晶体渗入压在水肿发生中的作用。[实验目的]运用血管机械阻断与否，使局部组织液生成增加或减少。[药品和器材]生理盐水（%NaCl），%NaCl、%肝素、普鲁卡因。小动物手术器械一套（每套大号止血钳各两把，中号采止血钳两把，弯直小号止血钳各两把，有齿镊各一把，眼科剪和镊各一把，组织剪和粗剪各一把，手术刀片的刀柄一副）、粗细缝线各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6号针头），标本架（弹簧夹）一种，搪瓷碗（25ml）和搪瓷方盘各一种。[实验动物]家兔，体重kg。[实验环节]兔小肠灌流标本的制作取家兔一只，称重后背位固定于兔板，1%普鲁卡因局部麻醉后，自剑突下做腹部正中切口约，打开腹腔，用温盐水纱布覆盖切口及周边皮毛。在左腹侧腔将小肠轻轻牵出，并一侧（使动脉位于静脉之上）。找到肠系膜前动、静脉（相称于人的肠系膜上A、V），管径较细，色红且有搏动的一根为动脉，另一根为静脉。在靠近肠系膜前动脉的根部用小弯止血钳分离动脉约cm，分离时注意不要损伤动脉的分支。然后穿两根细线备用。自耳缘静脉注射%肝素ml/kg，1-2分钟后结扎肠系膜前动脉的近心端，向远心方向插入细塑料管约。扎牢后，将此线在细塑料管上再做一次结扎以防脱落。于动脉插管结扎线下第一根动脉分支的上方，动脉和静脉之间穿一根粗线将肠管和静脉一并结扎，然后在第一根分支的上方再穿一线将肠管单独结扎，并从两扎线间将肠管和静脉切断。注意标本侧的静脉是游离的，其内的液体能够自由流出。自扎线处开始向下排空小肠约cm，在小肠cm和离动脉插管5.0cm的血管处穿两根粗线，将肠管和血管一并结扎两次，然后在两结扎线间剪断，最后沿图中虚线所示游离标本。将标本悬挂在标本架上，在肠游离缘上支肠长垂直剪3-4个小口，以肠腔内容物能流出为度。以5ml注射器吸取生理盐水，经动脉插管冲去血管中的血液，该标本即可用于浇灌。灌流装置的预备。灌流:①%NaCl;②中分子右旋糖苷灌流,25cm水柱压力加压灌流;③%NaCl灌流;④%NaCl灌流;⑤100cm水柱压力加压灌流。[成果与讨论]（郑红、汪思应）实验三缺氧[实验目的]：在动物身上复制缺氧性、血液性等缺氧模型；并观看缺氧动物呼吸，活动状态、皮肤及内脏颜色的转变，分析不同类型缺氧的发病机理；观看麻醉、年纪等因素对缺氧耐受性的妨碍。[实验原理]：人为制造小白鼠处在密闭环境，由于不停用氧，使其吸入气体氧分压下降，复制小鼠低张性缺氧动物模型，腹腔注射亚硝酸盐、吸如CO复制小鼠等张性缺氧动物模型。[实验动物]：小白鼠（18-22g,雌性或雄性）。[药品器材]：碳酸氢钠、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%美兰、10%乌拉坦，%氰化钾、生理盐水、凡士林、25ml广口瓶、一氧化碳发生装置、手术剪子、镊子、30ml、5ml及1ml注射器、氧气袋。低张性低氧血症：取体重相似，性别相似的小白鼠三只别离装入三个广口瓶内，观看小白鼠正常活动情形，呼吸频率（次/10秒），深度、皮肤和口唇的颜色，然后塞紧瓶塞，统计时刻，后来每三分钟重复观看上述指标一次（如有其它转变那么随时统计）直到动物死亡为止。动物尸身在实验做完后，依次打开腹腔，比较血液或肝脏颜色。2，麻醉对机体耐受缺氧的妨碍：体重相近的小白鼠两只，其中一只腹腔内注入%乌拉坦10g。别离放在广口瓶中，塞紧瓶塞后，开始记时。下列环节同实验1。3，年纪对机体耐受缺氧的妨碍：取1只成年鼠和一只新生红皮鼠，同放在一种广口瓶（红皮小鼠放入一小青霉素瓶中）盖紧瓶塞，观看小鼠活动等情形，统计生存时刻。4，亚硝酸的中毒缺氧：取体重相近小鼠3只，甲鼠腹腔内注射%亚硝酸钠ml，乙鼠在注射亚硝酸钠后（同剂量），再注射1%美兰ml，丙鼠腹腔内注射生理盐水ml对照。观看各鼠呼吸、皮肤颜色和全身活动，存活时刻。5，一氧化碳中毒缺氧：取小鼠两只，观看正常活动，口唇、鼻、尾部皮肤颜色，呼吸频率。取1只小鼠放入250ml广口瓶内，用注射器抽10ml一氧化碳注入瓶内，当即盖上瓶盖，注意动物行为状态和皮肤颜色转变，呼吸频率。待小鼠痉挛摔倒时，快速打开瓶盖，掏出小鼠并进行通氧等急救办法，观看恢复情形；另一只小鼠重复CO中毒实验，但不进行急救，身后进行解剖，观看皮肤、内脏和血液的颜色。6，请自己设计一实验，观看环境温度对小鼠缺氧耐受性的妨碍（附于实验报告中）。（汪思应、郑红）参考实验二再吸入式缺氧[实验目的]：在动物身上复制乏氧性缺氧模型；并观看缺氧动物血氧指标转变，分析不同类型缺氧的发病机理；[实验原理]：人为制造家兔处在密闭环境，使其吸入气体氧分压下降，复制家兔低张性缺氧动物模型，并观察血氧指标的转变。[实验动物]：家兔，体重kg。[药品器材]：生理盐水（%NaCl），%NaOH、%肝素、普鲁卡因。小动物手术器械一套（每套大号止血钳各两把，中号采止血钳两把，弯直小号止血钳各两把，有齿镊各一把，眼科剪和镊各一把，组织剪和粗剪各一把，手术刀片的刀柄一副）、粗细缝线各一卷，2ml和5ml和30ml注射器（第6号针头），标本架（弹簧夹）一种，搪瓷碗（25ml）和搪瓷方盘各一种，氧气袋，血压计，血红素测定装置等。[实验环节]：称重后背位固定于兔台上，手术部位去毛。1%普鲁卡因局麻下，切开颈部正中皮肤约5-8cm，分离气管并作气管插管，于气管双侧分离颈总A穿线备用。局麻下，切开腹股沟部皮肤，分离一侧股动脉，穿线备用。耳缘V注入肝素kg(500u/ml),使全身肝素化。侧颈总A做动脉插管结扎固定并与血压描计相连。气管插管与呼吸描计相连，股A内插入通针头的细塑料管，结扎备用。描计正常呼吸曲线（涉及血压曲线）。以另一侧颈总A行夹闭反射。自股A放血数滴于表面器皿上测动物HB含量。8，用吸管吸取%NaOH10-20ml于再吸入式缺氧瓶内，塞紧瓶塞。将瓶之A端与气管插管之侧管相连，使兔的呼吸只能与缺氧瓶水柱压记相通，当即统计开始缺氧时刻，缺氧进程中，不停摇动缺氧瓶，使兔呼出气之CO2充足为NaOH所吸取。意动物血压及呼吸转变，当血压降至原水平1/2时，当即自股动脉采血（开始几滴血液弃去），测定HB含量，并行颈A夹闭反射。血压降至20mmHg时，停止缺氧，观看其恢复情形改良沙利氏血色素测定法于血色素稀释管内加1%盐酸至%刻度处。用血红蛋白吸管于表面皿内吸血至20立方毫米刻度处，用脱脂棉擦去管口周边的血液。将吸管快速浸入稀释管中的盐酸内，轻轻将管内血液吹出，重复吸入上部之盐酸将吸管的血洗净，将稀释管插入血色素比色架内，静止10分钟。10分钟后于比色管内缓慢加入蒸馏水稀释，边加边混匀，当管内颜色靠近于原则比色柱时，加水的速度要慢。当管内颜色与原则比色柱一致时，从管壁刻度记下读数，即为100ml血压所含血红蛋白的克数。（郑红、汪思应）参考实验三钾代谢障碍[目的规定]观看高血钾对心脏的毒性作用理解和把握高血钾心电图变化的特点。[实验原理]腹腔或静脉注射钾，造成动物血清钾增高。[实验动物]鼠(SD或Wister,或家兔(体重kg)。[药品与器材]%乌拉坦溶液、%、%、%氯化钾溶液。5ml注射器、小儿头皮针、手术剪、心电图机或二导生理统计仪。[实验环节与观看]鼠高血钾（1）动物称重、仰卧固定，用%乌拉坦100g体重腹腔注射麻醉。（2）在心电图机原有的电极检紧包铝皮，套上6号注射针头（勿松动）。然后将电极别离入四肢踝部皮下，导线按右前肢（红），左前肢（黄）、右后肢（黑）、左后肢（绿）次序。（如用生理二导统计仪，那么按二导仪导线联后方式连接）。（3）统计一段正常心电图，纸长以每实验小组内每人分到4-5个园形为度。（4）由腹腔推入%氯化钾ml，注射后5分钟统计一次心电图转变。（或注射%氯化钾ml）（5）从第一次推注氯化钾起，每5分钟再注射%氯化钾ml。每次注后5分钟统计一次心电图变化（有可能要随时统计）发生室颤时，当即开胸观看心跳状态。兔高血钾（1）称重后仰卧固定，可不麻醉，假设躁动可用%乌拉坦ml/kg耳缘静脉麻醉。（2）局麻下由胸壁正中线切开皮肤，切口约4-5厘米，分离左侧胸壁肌肉，用粗剪子在靠近胸骨缘处剪断第二及第三肋骨，用扩胸器撑开胸腔切口，暴露心脏。（3）连接心电图导线，按右前肢（红）、左前肢（黄）、右后肢（黑）、左后肢（绿）次序。（4）统计一段正常心电图。（或二导仪）（5）用小儿头皮针插入耳缘静脉，并用胶布固定，经耳缘静脉推注%氯化钾ml/kg1分钟注完，注射后5分钟统计一次心电图或二导仪的转变。（6）后来每5分钟由耳缘静脉注入%氯化钾2ml，中断统计心电转变，假设在30分钟仍未显现室颤，可由耳缘静脉缓慢注入10%氯化钾，并观看心电转变情形，直至家兔心脏停博。[注意事项]1.腹腔注射氯化钾，应选择下腹部前1/4处，以幸免将溶液注入膀胱内。2.尽量幸免导线纵横交错，动物固定台上维持干燥，每次运用针形电极时要用酒精或盐水擦净，以维持良好的导电状态。（郑红、汪思应）实验四失血性休克[实验目的]复制失血性休克的动物模型；检测休克时部份体液因子的转变；通过比较扩血管药和缩血管药对失血性休克的疗效，分析休克发生机制。[实验原理]用操纵性动脉放血造成家兔急性失血，复制失血性休克的动物模型。[实验动物]家兔，体重kg。[药品和器材]动物手术器械一套，呼吸血压描记装置，静脉输液装置一套，三通开关，50ml、20ml、10ml注射器各一种，肝素（500μ/ml），1%普鲁卡因，生理盐水，低分子右旋糖苷，山莨菪碱，去甲肾上腺素。[实验方式和环节]1.家兔一只称重，麻醉，剪去颈部、股部兔毛。%普鲁卡因局麻下颈部正中切开皮肤，分离气管，分离左侧颈动脉及右边颈静脉，穿线备用，分离一侧股动脉穿线备用。3.耳缘静脉注入肝素（ml/kg）4.作气管插管；颈静脉插管连接中心静脉压装置；颈动脉插管（内有含肝素的生理盐水）并连接血压描记装置；股动脉插入带有三通开关的乳胶管备用。5.剑突下处在腹正中线切开皮肤cm，将腹白线轻轻拖起，切开腹白线，注意止血，用手轻轻将一段二十指肠和系膜拉出腹前用温生理盐水纱布包裹，然后将家兔向左侧位固定，把肠系膜放在置于微循环装置的观看孔上，用大头针固定，用显微镜直接观看血前后的肠系膜毛细血管的血流状况。6.打开连接股动脉的三通开关，一次快速放血于50ml注射器内，待血压降到40mmHg水平，取血备用。维持血压40mmHg30分钟，每隔10分钟取血，别离检测休克不同时刻TNF，MDF，儿茶酚胺等的水平。休克急救——实验分组对照组：动脉血压降至40mmHg后维持1小时，然后将放出的血自颈静脉全数快速点滴输回，必要时加低分子右旋糖苷ml，观看输液进程中各项指标转变。（呼吸、血压）去甲肾上腺素组：放血后血压降至40mmHg后，维持30分钟，然后自颈静脉缓慢滴入去甲肾上腺素生理盐水ml（含去甲肾上腺素），在20-30分钟内滴完，将放出的血快速自颈静脉输回，观看20分钟，观看各项指标。654-2组：在动脉血压降至于40mmHg30分钟后，自颈静脉缓慢滴入654-2生理盐水ml（含654-2）于30分钟内滴完，再将放出的血自颈静脉快速回，必要时加低分子右旋糖苷，观看20分钟各项指标。分析各组实验成果讨论：失血性休克进程中，微循环转变特点。（郑红、汪思应）实验五喜树碱诱导K562细胞凋亡[实验目的]：初步把握检测细胞凋亡（Apoptosis）这一特殊的细胞生命活动现象；结合理论讨论细胞凋亡与疾病的关系。[实验原理]：喜树碱（camptothecin）是一种抗肿瘤药品，研究发现其能够诱导多个肿瘤细胞发生凋亡。本实验用含必然量喜树碱的哺育液哺育K562细胞，诱导哺育3小时后，提取K562细胞的DNA，用凝胶电泳法分析其是不是发生凋亡，并用正常及坏死的K562细胞DNA作对照。[实验器材]：100mA电泳仪，电泳槽，紫外观看仪，高速离心机，OLYPMUS显微镜，水浴箱，K562细胞，喜树碱，琼脂糖，溴化乙锭，ml蛋白酶K，，NP40，，RNase，1×TBE缓冲液，上样缓冲液，TE缓冲液,DLMarker.[实验环节]：取指数生长久的K562细胞×106个，用含喜树碱的哺育液哺育3小时(对照组不加喜树碱)，取少量细胞滴片，染色后高倍镜观看；用含、的PBS离心洗两遍（1200rpm），弃上清，。加μlTBE（临历时加%NP40），μlRNase至ml，37℃，30分钟。加蛋白酶K（ml）μl，37℃，30分钟。14000rpm，4离心15分钟，收集上清（-70℃）。取上清μl，加上样缓冲液μl，%琼脂糖凝胶电泳30分钟，紫外线透视仪下观看，凋亡细胞显现DNALadder，DNA多为100-300bp。下列图为示教成果：（汪思应）实验六急性右心衰竭[实验目的]复制急性右心衰竭动物模型；观看急性右心衰竭时血液动力学的要紧变化。[实验目的]运用液体石腊阻塞兔大部份肺毛细血管，造成右心后负荷增加；大剂量快速输液增加右心前负荷，诱发家兔急性右心衰。[实验动物]家兔，体重kg。[药品和器材]%戊巴比妥钠溶液；%普鲁卡因溶液；%肝素溶液、液体石蜡、山梗菜碱。手术器械一套：1ml、5ml、10ml注射器；中心静脉压测量装置、输液装置、二导仪、秒表[实验环节]家兔称重，仰卧固定。颈部正中皮下注射%普鲁卡因局部麻醉，作颈部正中切口，游离出双侧颈外静脉和一侧颈总动脉。由耳缘静脉注入%肝素液（ml/kg），经右边颈外静脉插入中心静脉压导管；测量中心静脉压，经左侧颈外静脉插管连接输液装置，经颈总动脉插管连接二导仪描记血压，剑突下皮下穿大头针一只，连接二导仪统计呼吸。测量实验前各类指标动脉血压：呼吸；中心静脉压；循环时刻侧记。（自耳缘静脉快速注入%山梗菜碱，计由注入至显现呼吸变深变快的时刻）。实验进程实验前各项指标观看完毕，即用1ml注射器，由耳缘静脉注入液体石蜡（ml/kg），注射速度要慢（注射到血压下降到70mmHg为度），10分钟后再观看上述指标有何转变。待动物血压、呼吸稳固后，加速输液速度（180-200滴/分）快速输入生理盐水后，再重复上述指标测定。待动物死后来，剖开胸、腹腔，观看有无腹水及其量，肠壁有无水肿，肝脏体积、心脏体积有无胸水，肺脏外观及切面转变，最后剪破静脉，放出血液，注意肝脏和心脏体积转变。（郑红、汪思应）性能综合实验三、急性中毒性肾功效不全【实验目的】（1）观察正常家兔尿量及ADH对尿量的妨碍；（2）急性中毒性肾功效不全的动物模型；（3）观看比较急性肾功效不全与正常动物血气、酸碱、血清钾及尿的转变，分析其发生机制；（4）运用有关药品对急性肾功效进行初步医治。【实验原理】采纳肾毒物重金属HgCl2溶液造成家兔急性肾小管坏死，复制急性肾功效不全的动物模型，通过观看动物的血气、酸碱、血尿素氮（BUN）、血清钾及尿的转变，学习急性肾衰时内环境的转变。【实验动物】家兔3只，体重kg。【实验药品与器材】%HgCl2溶液，%戊巴比妥钠溶液或%氨基甲酸乙醇溶液，%普鲁卡因溶液，生理盐水，%肝素生理盐水溶液；兔台，手术器械，1ml和5ml注射器，试管，滴管，漏斗，吸管，试管夹，酒精灯，试管架，颈动脉插管，血气分析仪，生化分析仪，离心机，光电比色仪，水浴锅。【观看指标】全血血气分析仪测定pH值、PaCO2、HCO3-、K+、Na+和Cl-。血清生化分析仪测定BUN。尿尿量、尿蛋白定性和镜检。肾大致、剖面。【实验方式与环节】（1）取家兔三只，一只为正常对照（A），一只为中毒实验兔（B），另一只为ADH处置兔（C）。于实验前一天称重后，实验兔皮下或肌内注射%HgCl2（按~ml/kg，一次注射），造成急性中毒性肾功效不全模型，C兔注射ADH对照兔那么在相似部位注射同量的生理盐水，作为对照。将三只兔笼别离置于大漏斗上，收集尿液，测量24h尿量。（2）实验开始，家兔称重后，%氨基甲酸乙酯溶液（~g/kg体重）或%戊巴比妥钠（mg/kg体重）耳缘静脉注入麻醉后，仰卧固定于兔台。下腹部剪毛，在耻骨联合上±cm处做长约cm的正中切口，分离皮下组织，沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，插管掏出全数尿液，供尿蛋白定性和尿液镜检。（3）颈部正中切口，分离一侧颈总动脉，颈动脉插管内注入肝素生理盐水溶液，进行颈动脉插管。（4）抽取ml动脉血做血气分析，取ml动脉血（滴入肝素数滴后）离心（1500r/min,5~10min）,取血清供BUN测定用。（5）尿常规检查。1）将尿液1500r/min离心5~10min。2）显微镜检查取尿沉渣，涂在玻片上，观看有无异样成分（细胞和管型）。3）尿蛋白定性检查取大试管盛尿液，倾斜试管于酒精灯上，将试管中的尿加热至沸腾，观看有无混浊，加数滴醋酸，再加热至沸腾，混浊不退为蛋白阳性，按其混浊程度以-、+、++、+++、++++表达之。“-”表达尿液清晰无混浊“+”表达尿液显现轻度白色混浊（含蛋白~g/L）“++”表达尿液稀薄乳样混浊（含蛋白质~g/L）“+++”表达尿液乳浊或有少量絮片存在（含蛋白~g/L）“++++”表达尿液显现絮状混浊（含蛋白质>g/L）如加醋酸后混浊消失，是因加醋酸可除去磷酸盐或碳酸盐所形成的白色混浊。（6）血清BUN的测定。取三只试管别离标号后按下表操作：试剂（ml）1(空白管)2（原则管）3（样品管）BUN试剂二乙酰单肟试剂蒸馏水尿素原则液1∶5稀释的血清将上述各管充足摇匀，置滚水浴中加热15min，用自来水冷却3min，在540nm波长下比色，统计原则管的光密度读数（D标）及样品管的光密度读数（D样）。计算每100ml血清中BUN的含量（mg）=（D样/D标）××(5×100g，蒸馏水溶解并加至ml。（2）BUN试剂取浓H2SO444.0ml,%H3PO4ml,溶于ml蒸馏水中，冷至室温依次加硫氨脲mg，溶解后再加硫酸镉μg（3CdSO4·8H2O）或g(3CdSO4·6H2O),溶解后加蒸馏水至，存冰箱，可保存6月。（3）BUN原则储蓄液（mg%）精确称取尿素mg，溶于50ml蒸馏水中加氯仿6滴，再用蒸馏水稀释至ml，可贮存冰箱6个月。（4）BUN原则液（每毫升含微克）取上述BUN原则储蓄液ml，加蒸馏水至ml。参考实验四急性左心衰竭[实验目的]复制急性左心衰的动物模型。观看心肌梗塞前、后的心率高低和血液动力学的变化。[实验原理]运用冠状动脉结扎术，结扎家兔冠状动脉左室支，造成急性心肌梗塞，诱发急性左心衰。[实验动物]家兔[药品和器材]%戊巴比妥钠溶液、%普鲁卡因溶液、%肝素溶液、碳素墨水。手术器械一套、小拉钩一付、2ml、5ml、10ml注射器，固定支架、大木夹、大头针、二导仪。[实验环节]称重、麻醉，按kg由家兔耳缘静脉注入%戊巴比妥钠，仰卧固定。在1%普鲁卡因局部麻醉下，作颈部正中切口，分离出双侧颈总动脉。胸部局部麻醉后，沿胸骨中线自胸节平线到剑突上切开皮肤，暴露胸骨和肋软骨，分离胸肌，沿胸骨左缘在肋软骨部位切断第2-4肋骨，用小拉钩轻轻撑开胸腔切口，即可见心包及搏动的心脏，提起并剪快乐包，充足暴露心脏和外主动脉。用湿纱布包裹手指，将心脏略向右旋，暴露左心耳和左室大部，在左心耳下缘认真找出冠状动脉左室支的行走位置，用细园针（0号线）在左心耳下缘处绕左室缝穿一线，暂不结扎。从耳缘静脉注入%肝素液（kg），经左侧颈动脉插管，描记动脉血压，于剑突部位皮下穿一大头针，连接二导仪描记呼吸。经右边颈动脉插入充满%肝素液的左心室导管，经传感器和二道仪统计左室内压，插管时边插边观看压力曲线，等显现左室内压力曲线时表达已插入左室、插入导管约左右，固定导管。观看指标：心率、动脉血压、呼吸和强度、左心室内压。实验进程：手术完毕后，统计麻醉安静下指标数值。结扎冠状动脉左室支前，观看各项指标转变，每隔2分钟统计一次，结扎左室30分钟后，假设仍无心律紊乱发生，可在颈部位结扎或再于室间沟处结扎前降枝。动物死后来，观看心脏各部位体积高低，剪下心、肺，在离主动脉走始部位处，剪断主动脉，插入塑料管，将动脉壁和塑料管壁结扎，并从左房根部结扎左房，由塑料管向外主动脉注入碳素墨水，边观看心室壁墨染范畴，估测未墨染面积约占左室游离壁面积比例。（郑红、汪思应）病例讨论一患者男性，52岁。十年前因上腹部不适，伴有腹痛及食欲不振住入某医院。住院检查肝大肋下，肝功效正常，经护肝医治好转出院。四年前上述病症加重并伴有皮肤、巩膜黄染，进食时上腹部不适感加重、腹胀，有时伴恶心、呕吐、便稀，病症重复持续至今。近四个月来，病人呈进行性消瘦，四肢无力，面色憔悴，皮肤粗糙，皮肤、巩膜黄染加深，鼻和齿龈易出血，有时有血便。三天前因吃牛肉后显现恶心、呕吐，神志恍忽，烦躁不安急诊入院。患者自年轻时起，性喜饮酒，日饮酒量均在半斤以上，常年不停，既往无疟疾史，亦无吸虫疫水接触史。体检：神志恍忽，步履失衡，烦躁不安，皮肤、巩膜黄染，腹壁静脉曲张，脸部及胸部有蜘蛛痣。腹稍隆，肝可触及，质硬，边沿较钝。脾大肋下3指，质较硬，有腹水征。心肺无特殊发现。食道吞钡X线显示食道下段静脉曲张。实验室检查：黄疸指数单位，谷丙转氨酶单位，脑鳞脂胆固醇絮状实验（++），麝香草酚浊度实验单位，血氨μg%。入院后，经补液，静脉注入葡萄糖、谷氨酸钠、酸性溶液灌肠，限制蛋白饮食，补充维生素及大量抗生素等医治办法急救后，神志慢慢清晰，病情好转。五往后，患者大便时突觉头晕、虚汗、法力，继之晕厥茅厕中。被发现时患者面色惨白，脉博细速，血压下降，经输血，补液急救后，血压上升，病情似有好转。第二天，患者再度显现神志恍忽，烦躁不安，尖叫。检查发现双手有扑翼样震颤，大便呈柏油样。继后发生昏迷，血压，瞳孔中度散大，对光反射削弱，皮肤、巩膜深度黄染，黄疸指数单位，谷丙转氨酶单位，血氨μg%。经各类降氨医治后，血氨降至μg%，但上述病症无明显改善，病人仍处在昏迷状态，随即静脉滴注左旋多巴医治，病症慢慢减轻，神志缓慢恢复，于住院后第47天，临床病症大致消失出院休养。讨论题对本病的初步印象是什么；有那些诊疗根据？人要紧临床病症产生的病理基础是什么？针对病人要紧临床体现采纳的医治办法的理论根据安在？分辨诊疗要紧补充检查哪些项目？请告知病人出院后的注意事项。（郑红、汪思应）病例讨论二患者，男，33岁。入院前4个月经胸片诊疗为结核性胸膜炎。予异烟肼、利福平、已胺丁醇三联抗结核医治。入院前一月双下肢水肿，尿量约1000ml/d,尿中泡沫增多，尿常规蛋白+++，大量RBC，μmol/L，诊疗为急性肾小球肾炎，经医治1个月无效于1990年9月8日转我院。入院查体血压150/100mmHg，眼睑轻微水肿，左下肺叩诊浊音及呼吸音低，心率100次/分，律齐。腹平软，肝脾未及，双下肢可凹陷性水肿。辅助检查HB90g/L，×109，×109。尿常规蛋白++++，尿沉渣RBC3-5/HPF，24小时尿蛋白定量。尿渗入浓度L。血生化：K+mmol/L，SCr963.6μmol/L，mmol/L，g/L，g/L，mmol/L，mmol/L。B超：左肾×cm×cm，右肾B超：cm×cm×cm，肾盂、肾盏无扩张。免疫检查ANA（-），抗-dsDNA抗体（-），补体C3dl,ml,L,IgAL,L。抗肾抗体（-），ANCA（-）。肾穿刺活检病理光镜：5个肾小球内可见3个细胞纤维新月体，肾小球内细胞数增多，系膜区增宽，系膜细胞基质增多，毛细血管襻受压，多数管腔闭塞，近端肾小管浊肿，部份肾小管上皮细胞脱落及管腔完全闭塞，肾间质普遍纤维化，符合新月体肾炎。免疫荧光：IgG+++沿GBM弥漫颗粒样沉积。IgA++、IgM++沿GBM和系膜区弥漫颗粒样沉积，C3++、C1q、FI+沿GBM弥漫颗粒样沉积。入院后，在予以利尿、降压等支持医治的同时，予甲基强的松龙d冲击医治5天，冲后予强的松qd维持，尿量渐增至1500-2500ml/d,停用利福平，继续运用异胭肼，乙胺丁醇抗结核医治。2月后SCr降至μmol/L，带药出院回本地继续医治。讨论：结合病明白得剖和病理生理所学知识，该疾病的诊疗是什么？该疾病的发病机制是什么？病人为什么显现水肿？（郑红、汪思应）病例讨论三患者，女，22岁，因“腹痛9日，少尿4日”急诊。患者于2周前曾行人工流产术。9日前感腹痛、胸闷、恶心，呕吐胃内容物。腹部持续性隐痛，阵发性加重，在外院对症医治（具体不详）病情无好转。4日前尿量减少，每日约。既往躯体健康。来诊时查体：体温℃，脉搏60次/分，呼吸19次/分，血压14.7/（1KPa=）。意识清晰，皮肤、粘膜、巩膜、结膜、浅表淋巴结、扁桃体、双肺呼吸无异样。心界向左扩大，律齐，未闻及杂音。腹平软，全腹轻压痛，双侧上腹部为著，无反跳痛及肌紧张，肝脏于肋缘下及边，脾未及，肝区叩击痛、双肾区叩击痛均为阳性，移动性浊音阴性，双踝部轻度凹陷性水肿。实验室检查：血常规：红细胞×1012/L,血红蛋白L，血小板×109/L，白细胞×109/L，中性粒细胞，淋巴细胞。尿常规：红细胞满视野/高倍视野，白细胞3-5个/高倍视野，上皮细胞9-11个/高倍视野。粪常规：黄色稀便，潜血实验（+）。动脉血气：PH，PO2，，HCO3—L，碱剩余—L，肝功效：丙氨酸转氨酶13·s·L，天冬氨酸转氨酶10·s·L，总胆红素33μmol/L，直接胆红素28μmol/L，血清肌酐806μmol/L，尿素氮L。血Ca2+L,K+mmol/L,Na+131mmol/L,Cl－90mmol/L,。凝血功效检查：凝血酶原时刻（PT），，纤维蛋白原（FIB）6g/L，活化部份凝血激酶时刻（APTT）40s。心电图示窦性心动过缓，I度房室传导阻滞，普遍T波低平或倒置。心脏超声：左房增大，二尖瓣、三尖瓣、主动脉瓣轻度反流，少量心包积液。X线胸片示：两肺纹理增粗，心影明显增大，双侧胸腔积液。腹部B超检查：肝肿大，呈淤血变化，脾大，双肾实质弥漫性损害，少量腹水。诊疗：多脏器功效障碍综合症（MODS）。予以维持水、电解质、酸碱平稳，抗感染，利尿，营养支持，制酸，爱惜肝脏，对症医治等。2周后患者病症明显减缓，各项辅助检查指标较前明显改善或恢复正常出院。讨论：该病人显现几个器官功效障碍，根据是什么？该患者MODS的发病机制可能是什么？该患者呼吸系统有无受损，什么缘故？（郑红、汪思应）

病理生理学教学大纲（实验部份）安徽医科大学基础医学院病理生理教研室

病理生理实验教学大纲病理生理学是一门理论学科，同时又是一门实验学科。通过临床研究特别是动物实验，使病理生理理论获得了极大的充实和进展。同时病理生理的实验教学不仅初步指导学生初步理解人类疾病动物模型复制的大致方式，锻炼了操作技术、验证和温习理论知识；还通过实验与课堂讨论的具体环节，使学生初步含有进行医学研究与临床思维所必备的“严肃的科学态度、周密的科学方式和严谨的科学作风”等。因此实验课是病理生理教学的重要构成部份。随着人类社会知识更新速度的加速、分子生物学的进展及研究手腕的进步，病理生理学在近来几年也有飞速的进展。为配合原则教材第五版的运用，咱们根据本校的教学特点，对病理生理实验进行了部份调节。为此特修订《病理生理实验教学大纲》。使其更适合咱们教学需要。概论目的与规定：把握病理生理实验课的规定，实验报告的书写格式；熟悉病理生理实验目的；理解人类疾病动物模型复制的方式。要紧内容：病理生理理论与实验课的特点，人类疾病动物模型复制的大致方式；病理生理实验课的目的和规定；病理生理实验报告的书写原则。实验一大致实验操作技术训练目的与规定：把握小鼠的缉捕、腹腔注射技术；把握家兔的固定，耳缘静脉注射，颈部、腹股沟手术操作规程及气管、动脉、静脉插管技术；熟悉实验室常规器件、仪器的运用，大鼠的缉捕及腹腔注射技术；理解实验动物的特点。要紧内容：介绍了病理生理动物实验的要紧对象——家兔、大鼠、小鼠的大致生理特点；重点进行家兔的称重、固定，术前皮肤预备，麻醉，颈部及腹股沟手术；颈部手术要紧分离气管、颈外静脉、颈动脉并做对应的插管，进行呼吸描记，静脉输液及血压测量；腹股沟手术要紧分离股动脉并插管以进行股动脉放血；大、小鼠的缉捕及腹腔注射等技术。实验二实验性肺水肿目的与规定：把握用大剂量快速输液法复制实验性肺水肿的家兔模型；温习水肿理论知识，阐明家兔肺水肿时病症、体征的发生机制；讨论本水肿发生的可能机制及肾上腺素的应用意义。要紧内容：家兔称重、固定及颈部手术进行气管、颈外静脉插管后，由静脉大剂量（100-120ml/kg体重）快速输液（180-200滴/分钟）复制肺水肿模型；在液体输入后，由耳缘静脉注射肾上腺素（kg体重）;观看输液前、输液后、注射肾上腺素后，家兔的呼吸、心率、呼吸音有何转变及有无气管分泌物显现；结合理论，讨论水肿家兔呼吸、心率、呼吸音转变及气管分泌物显现的机制；肾上腺素的作用；讨论除大剂量快速输液使肺毛细血管静水压增加致使本水肿发生外，有无其它机制参加，什么缘故？书写实验报告。实验三缺氧目的与规定：把握小鼠乏氧性缺氧、血液性缺氧的模型复制；依如实验，熟悉亚硝酸盐、CO中毒的临床急救原理；结合理论，讨论麻醉、年纪对缺氧耐受性的妨碍机制；设计简朴实验，验证环境温度对小鼠缺氧耐受性的妨碍。要紧内容：用250ml磨口广口瓶复制低张性缺氧的小鼠模型，并介绍设立对照在医学研究中的意义；使腹腔注射适量乌拉坦的小鼠处低张性缺氧状态、新生红皮鼠与成年鼠对照以观看麻醉、年纪对缺氧耐受性的妨碍；用腹腔注射亚硝酸盐法复制等张性缺氧的小鼠模型，并观看中毒小鼠的体现及美兰对亚硝酸盐中毒的作用；使小鼠处在高浓度CO环境复制煤气中毒模型，观看中毒小鼠的体现及理解CO中毒的急救原那么和原理；观看不同类型缺氧小鼠皮肤、内脏显现的特殊颜色；书写实验报告，涉及设计实验验证环境温度对缺氧耐受性的妨碍。实验四失血性休克目的与规定：把握股动脉放血法复制失血性休克的动物模型；熟悉休克的急救办法及原理；结合理论，讨论休克家兔病症、体征的发生机制。理解休克不同时刻TNF、MDF等转变及意义。要紧内容：常规手术分离家兔气管、颈动脉、颈外静脉并插管，分离股动脉并插管。由股动脉导管操纵性放血使家兔血压维持在40mmHg左右30分钟，观看及检测放血前后、放血不同时刻家兔活动、血压、心率、四肢温度及TNF、MDF、儿茶酚胺等转变；分组采用输血、给去甲肾上腺素、654-2等不同办法对休克家兔进行急救；结合理论分析休克家兔显现各类“转变”的机制；TNF、MDF、儿茶酚胺检测试剂盒的运用。实验五喜树碱诱导K562细胞凋亡目的与规定：把握用电泳法检测细胞凋亡；熟悉喜树碱诱导细胞凋亡的大致方式及凋亡细胞的显微镜下变化；理解细胞凋亡的其它检测手腕；结合理论讨论细胞凋亡的发生机制；要紧内容：用含喜树碱的哺育液哺育K562细胞以诱导其凋亡。镜检观看凋亡细胞和正常K562的区别；用NP40裂解细胞，结合蛋白酶K、RNASE消化细胞蛋白和RNA以提取细胞DNA；用%琼脂糖凝胶电泳检测凋亡、正常K562细胞的DNA，诱导凋亡细胞的DNA应显现DNALadder.结合实验，讨论细胞发生凋亡的可能机制。实验六实验性右心衰目的与规定：把握家兔实验性右心衰模型的复制；熟悉心衰的常见病症、体征及诊疗原则；结合理论，温习心衰的发生机制及机体的代偿办法。要紧内容：经颈部手术分离家兔气管、颈动脉、颈外静脉并插管后，由耳缘静脉注射液体石蜡部份阻塞肺血管以增加后负荷、经颈外静脉大剂量快速输液提高前负荷造成家兔右心急性衰竭；观看并比较注射石蜡油前后、大剂量输液后家兔呼吸、心率、心音、中心静脉压（CVP）的转变；分析以上“转变”显现的机制；观看家兔急性右心衰是不是引发其发生心源性休克；解剖家兔尸身，观看右心及有无胸、腹水显现；书写实验报告。实验七病例讨论一目的与规定：把握病例讨论时病历报告的思路和方式；熟悉肝功效不全及肝性脑病患者的临床体现；理解临床疾病诊疗及医治的原那么。要紧内容：一男性患者，52岁，年轻时日饮酒半斤，十年前开始，不停显现消化道不适病症，近期加重且有血便。无血吸虫及肝炎病史。三天前因吃牛肉后显现神经系统病症入院求治；体检发现病人神智恍忽，有黄胆、肝硬化腹水及侧枝循环成立的典型体征，且实验室检察示肝功效受损，血氨升高；入院经踊跃医治病情好转，但病人显现上消化道大出血，致使休克。急救休克使之好转后，又显现典型的肝性脑病；经降血氨等医治，病症大致消失后出院；规定给病人诊疗病情、讨论其病症和体征显现的机制、临床医治原理。并提示病人出院注意事项。实验八病例讨论二目的与规定：把握急性肾功效不全少尿期的性能代谢变化；熟悉急性肾炎的诊疗原则及发病机制；理解急性肾炎的临床医治。要紧内容：患者因结核性胸膜炎服用异烟肼等抗结核药，服用两月后显现水肿、尿少等病症，曾在其它医院诊疗为“急性肾炎”，医治无效后转入我院；入院体检发现明显水肿及左下肺实变，实验室检查提示符合急性肾炎、肾功效不全的诊疗；规定讨论该疾病的发病机制和水肿显现的机制。实验九病例讨论三目的与规定：明白得MODS的临床病因是多个多样的；把握SIRS/CARS特别是白细胞与MODS发病的关系；熟悉MODS的临床体现。要紧内容：患者因人工流产术后显现剧烈腹痛且近五日显现无尿而入院；入院体检及各项实验室检查提示患者白细胞明显升高，肾功效不全处少尿期，同时伴有肝、心功效不全，肺脏也有受损；规定讨论该病人MODS的发生机制、各器官受损后有什么体现及考虑肺脏有无受累。（汪思应）

病理生理学教学大纲（理论部份）安徽医科大学基础医学院病理生理教研室

附二病理生理学教学大纲前言病理生理学是医学基础理论学科之一。它的任务是研究疾病的机制并结合机体性能代谢的转变。阐明疾病发生、进展的大致规律，揭发疾病的本质，为疾病的防治提供理论根据。病理生理学的大致内容分总论和各论两部份。总论要紧讲述疾病中带有共性的规律及大致病理进程，各论要紧讲述机体各系统疾病发生规律以至每一种疾病的特殊规律。可是根据现在我国医学教育情形，咱们只能选择假设干重要章节作为教学内容。在教学进程中，以辩证唯物主义为指导，对的明白得机体与环境，内因和外因、局部与整体、性能与形态、损伤与抗损伤等辩证关系，通过教学，哺育学生运用辩证唯物主义的世界观和方式论观看问题、分析问题和解决问题的能力，把握病理生理学的基础理论和大致技术，为后来临床实践和科学研究打下牢固基础。在教学中必需坚持理论联系实际（临床），应用启发式教学方式，充足调动学生学习的主动性和踊跃性，哺育学生独立自学，科学思维，在学好理论课的同时学会和应用实验方式，分析实验成果，得出实验结论。根据教学打算，病理生理学教学共安排87学时，其中理论课为58学时，实验课为29学时，要紧以临床医学、全科医学、康复医学、妇幼保健、口腔医学等本科学生为教学对象。第一章绪论目的：把握病理生理学要紧研究方式2．熟悉病理生理学的任务、性质和在医学教育中的地位3．理解病理生理学进展要紧内容：病理生理学要紧探讨疾病发生进展的规律与机制，应用正常人体的形态、功效、代谢方面的各类知识加以综合、分析、再通过科学思维运到患病的机体，从而对的熟悉疾病中显现的各类转变。其性质为一门与基础医学中多学科紧密有关的综合性边沿学科。也是一门沟通基础医学与临床的桥梁学科。病理生理学既是理论性较强的学科，又是一门实验性学科，动物实验或复制实验动物模型、临床观看、疾病流行病学调查为其大致研究方式，从群体和整体水平、器官水平，细胞水平和分子水平上获得研究成果，为探讨疾病的病因，机制及防治提供根据病理生理学作为一独立新兴学科，随着整个医学实践的需要慢慢进展的，现在已由中国科协同意成立国家一级学会——中国病理生理协会。病生工作者在教学、科研中做出了重要奉献第二章疾病概论目的：把握疾病发生的同样规律和大致机制熟悉疾病发生的缘故和条件熟悉疾病和健康的概念理解疾病通过、转归和机体的衰老要紧内容：健康涉及强健的体魄和健全的精神状态，疾病是在内外内素作用下，机体“自稳态”破坏，发生一系列功效代谢和形态构造的异样转变，显现必然的病症，体征和社会行为导常病因的种类，病因和条件的相对性把握机体损伤抗损伤、疾病中因果交替、局部与整体的关系等规律，增进疾病往好的方向进展、从神经体液机制细胞机制和分子机制理解疾病的发生疾病分期，康复与死亡，脑死亡的概念第三章水、电解质代谢障碍目的：把握水和电介质代谢紊乱时的机体转变规律熟悉水和电介质代谢紊乱时的概念及病因理解水和电解质代谢紊乱时的处置原那么要紧内容：脱水（高渗性脱水、低渗性脱水、等渗性脱水），水中毒的概念高渗性脱水，低渗性脱水和水中毒的性能代谢转变，临床特点和防治原那么高钾血症，低钾血症的大致概念；缘故和机制；机体性能代谢转变和防治原那么。强调高钾对心脏的作用高镁和低镁血症的缘故机制及对机体的妨碍第四章酸碱平稳紊乱目的：把握酸碱中毒及混合性酸碱平稳紊乱的病因发病学，机体转变规律及中毒对机体妨碍熟悉机体对酸碱平稳的调剂机制熟悉机体对酸碱平稳的调剂机制理解反映酸碱平稳经常使用的指标和意义要紧内容：机体通过体液缓冲系统的缓冲、肺的调剂、肾的调剂和细胞内外离子交换来维持酸碱的相对稳固代谢性酸中毒；（AG增高型和AG正常型）概念、缘故和机制、机体转变（代偿和失代偿）及其对机体妨碍、防治原那么呼吸性酸中毒：概念、缘故和机制、机体转变（代偿和失代偿）和防治原那么代谢性碱中毒和呼吸性碱中毒的概念、缘故和机制，机体的代偿性转变和失代偿、防治原那么混合性解酸碱平稳紊乱：呼吸性酸中毒归并代谢性酸中毒呼吸性酸中毒归并代谢性碱中毒呼吸性碱中毒归并代谢性碱中毒呼吸性酸中毒归并代谢性酸中毒代谢性酸中毒归并代谢性碱中毒第五章水肿目的：1．把握水肿发生的大致机制2．熟悉各类水肿的发病机制和特点3．理解水肿液对肌体的妨碍要紧内容：概念大致机制：血管内外液体交换失衡：毛细管流体静压升高、毛细血管壁通透性增血浆胶体渗入压减少、淋巴回流受阻体内外液体交换失衡：钠、水潴留心性水肿、肾性水肿、肝性水肿、肺水肿、脑水肿的发生机制和临床特点水肿液散布特点和对机体妨碍第六章缺氧目的：把握各类类型缺氧的特点熟悉缺氧机会体性能化谢转变及其机制3．理解缺氧的病因及处置原那么要紧内容：1．大致概念2．经常使用血氧指标3．低张性缺氧、等张性缺氧、循环性缺氧、组织中毒性缺氧的血氧转变4．缺氧机会体功效代谢转变（1）代偿性反映（呼吸系统、循环系统、血液系统、组织细胞的适应）（2）功效代谢障碍（细胞损伤、中枢神经系统功效障碍、外呼吸功效障碍、循环系统功效障碍）5．妨碍机体对缺氧耐受性的因素6．氧疗及氧中毒第七章发热目的：把握发热的机制及肌体的性能代谢转变熟悉热代谢特点理解发热的缘故和处置原那么要紧内容：发热、致热原、内源性致热原、发热激活物大致概念发热激活物的种类与性质：细菌及其毒素、病毒和其它微生物、抗原抗体复合物、类固醇、致炎物内生致热原种类及作用部位发热时相：体温上升期、顶峰期或稽留期、体温下降期5．发热时肌体性能代谢转变和处置原那么第八章应激目的：把握应激机会体性能代谢转变熟悉应激与疾病的关系理解应激机会体激素水平转变要紧内容：应激、应激原、全身适应综合症大致概念应激时神经内分泌反映：交感—肾上腺髓质系统下丘脑—垂体—肾上腺皮质激素系统其它激素：胰高血糖素和胰岛素、β—内啡肽、生长素、催乳素等急性期反映蛋白和热休克蛋白的构成、来源及生物学功效应激时各系统功效转变：代谢转变、心血管系统、消化系统、免疫系统等应激与疾病：应激性溃疡、原发性高血压、心律失常、结肠激惹综合症等第九章弥散性血管内凝血（DIC）目的：把握DIC发病原理及临床体现发生进展规律熟悉DIC发生进展规律理解DIC大致病因、诱因及防治原那么要紧内容：大致概念病因和机制：血管内皮损伤启动内源性凝血、组织因子入血启动外源性凝血、红细胞、白细胞大量破坏、血小板激活、酶激活凝血系统、蛋白C缺少、纤溶活性的转变DIC发生进展因素：单核吞噬细胞系统功效受损、血液高凝状态、促凝物质入血、肝功效严峻受损，微循环障碍，不恰本地应用纤溶克制剂DIC分为高凝期、消耗性低凝期、继发性纤溶亢进期。按发生速度分急性、亚急性、慢性三型DIC临床体现：出血、休克、器官功效障碍和和微血管内溶血性贫血DIC防治原那么：防治原发病；改善微循环重建凝血和纤溶间动态平稳第十章休克目的：把握休克的发病机制熟悉休克时重要器官功效转变理解各类休克特点和医治原那么要紧内容：休克的大致进展及其微循环学说大致概念休克分类：（1）按休克病因分（2）按休克时血液动力学分（3）按休克时始动环节分休克的分期和机制缺血性缺氧期：组织灌流转变、微循环障碍机制、早期休克时机体代偿、临床体现（2）休克期：微循环血流转变、微循环淤滞机制、休克失代偿时临床体现（3）休克晚期：DIC形成、重要器官功效衰竭体液因素在休克时的作用：儿茶酚胺、RAS、组胺、激肽、花生四烯酸产物（前列腺素和白三烯）、血小板活化因子、内啡肽、肿瘤坏死因子、内皮素、一氧化氮、氧自由基、心肌克制因子、补体成分休克时细胞和器官功效障碍：急性肾功效衰竭、急性呼吸衰竭、心功效障碍、脑功效障碍等感染性休克、心源性休克、低血容量性休克特点休克防治原那么：纠正酸中毒、补充血容量、血管活行性药品应用、抗细胞损伤、体液因子拮抗剂、避免器官功效衰竭等第十一章缺血—再灌流损伤目的：把握缺血—再灌流损伤的发病机制熟悉缺血—再灌流损伤时肌体的功效代谢转变理解缺血—再灌流损伤防治原那么要紧内容：大致概念和近代进展缘故和妨碍因素缺血—再灌流损伤的发生机制：（1）自由基的作用（自由基的概念和分类、氧自由基的种类、氧自由基生成增多的机制、自由基在缺血—再灌流损伤中的作用）（2）钙过荷（钙过荷发生机制、钙过荷引发再灌流损伤的机制）（3）中性粒细胞的作用（再灌流时中性粒细胞增多的缘故、中性粒细胞介导缺血再灌流损伤的机制）（4）高能磷酸化合物缺少心、脑、肠、肾缺血—再灌流损伤的转变防治原那么：排除缺血缘故，及早恢复血流改善缺血组织代谢去除自由基（低分子去除剂、酶性去除剂）钙拮抗剂—减轻钙过荷细胞爱惜剂应用第十二章细胞信号转导障碍目的：1．把握细胞信号障碍的概念，对机体的妨碍2．熟悉细胞信号转导障碍与疾病的关系3．理解细胞信号转导大致线路，发生障碍的缘故和可能机制要紧内容：1．细胞信号转导障碍的概念，细胞信号转导的大致途径，层次及参予的物质。2．细胞内外酶的磷酸化与去磷酸化和信号的传导、调控的关系，细胞信号转导障碍的发生缘故，可能的机制。3．细胞信号转导障碍与各系统疾病的关系。第十三章细胞凋亡目的：1.把握细胞凋亡进程中生化变化及基因调控2.熟悉细胞凋亡的特点、大致进展和妨碍因素3.理解细胞凋亡的生物学意义及其与疾病的关系要紧内容：1.细胞凋亡的概念、大致特点、研究现状2.妨碍细胞的凋亡因素（1）细胞因子的作用（2）有关抗原和受体的作用（3）病毒与细胞凋亡（4）其它：化学药品、射线、氧自由基等3.凋亡细胞早期生物化学转变（1）胞浆内Ca++升高（2）PH减少（3）DNA断裂（4）新的RNA和蛋白质合成4.基因调控（1）与诱导细胞凋亡有关的（2）与克制细胞凋亡有关的5.细胞凋亡与肿瘤发生6.细胞凋亡与肿瘤医治7.细胞凋亡的问题与前景