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细胞培养准备4

影响细胞生长的因素2023/10/2712023/10/272影响细胞生长的因素温度渗透压气体环境和pH无毒和无菌辐射线和超声波细胞接种浓度(密度)容器转动速度和悬浮搅动速度2023/10/2722023/10/273一、温度不同种类动物细胞对温度的要求不一致一般人和哺乳类细胞体外培养的适宜温度是35-37℃禽类细胞体外培养的适宜温度是38.5℃昆虫细胞25±1℃不适易温度危害高温：蛋白变性，酶失活室温：代谢下降，可短期保存（4℃-20℃）低温：在降到冰点以下时，细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡。若培养液中加入甘油或二甲亚砜等保护剂，防止胞内冰晶的形成而刺破胞膜，可长期冻存。培养细胞的低温的耐受能力强2023/10/2732023/10/274二、渗透压高渗：皱缩低渗：肿胀、破裂。一般动物细胞适宜的渗透压范围：260-320mmol/L不同的细胞要不同的渗透压，可选用不同渗透压的培养基，如下表2023/10/2742023/10/2752023/10/2752023/10/276三、气体环境和pH氧：细胞呼吸，利于生物氧化，促进生长;

>60%氧抑制细胞生长、增殖及DNA合成。CO2:5%，细胞生长所需，维持培养液的pH（7.2~7.4）也是细胞代谢产物(细胞耐酸>耐碱，增加CO2将使pH下降）四、无毒和无菌五、辐射线和超声波(一)可见光：可见光的各种有色光引起细胞退变延长核分裂的间期显著降低细胞的附壁能力。2023/10/2762023/10/277(二)紫外线：核分裂、有丝分裂受破坏。脱水收缩、起泡和肿胀。(三)放射线：X、β、γ射线使核分裂数减少并出现不正常的核分裂。(四)超声波和振动：细胞紊乱，胶体结构变化，染色体畸变。2023/10/2772023/10/278六、细胞接种浓度(密度)密度太低/太高都不利于细胞的生长增殖2023/10/2782023/10/279七、容器转动速度和悬浮搅动速度搅拌速度不能太快，不能太慢。太慢：细胞易结团、下沉和贴壁。太快容易起泡

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