《生物化学与分子生物学实验技术》2014版教学大纲

《生物化学与分子生物学实验技术》教学大纲(2014版)一、课程基本信息课程代码：课程名称：《生物化学与分子生物学实验技术》英文名称：ExperimentTechnologyofBiochemistryandMolecularBiology课程类别：专业必修课学时：93学时，18学时理论讲授，75学时实验课，开课学期为第三、五学期。学分：2适用对象：生物技术专业考核方式：理论考试及实验考试先修课程：生物化学、微生物学、分子生物学、遗传学、细胞工程、细胞生物学二、课程简介 《生物化学与分子生物学实验技术》是一门理论性和实践性极强的学科，在生命科学中发挥着日益重要的作用。生物化学实验是以生物为研究对象，利用生物化学的原理和方法，阐明生物体内化学分子的结构与化学反应的机理，从分子水平探讨生命现象的本质的一门实验科学。分子生物学试验是以核酸、蛋白质等生物大分子为研究对象，利用分子生物学的原理与方法，研究基因的结构特征、基因的转化、基因的扩增、重组体的筛选与检测以及基因表达的一门试验科学。以生物化学与分子生物学理论为基础的相关实验，目前已渗透到基础医学和临床医学的各个学科，《生物化学与分子生物学试验技术》课程属于生物技术专业的专业基础课。因此，学习和掌握生物化学与分子生物学的基本实验技术是生物技术专业学生的必备能力三、课程性质与教学目的通过学习与实际操作，让生物技术专业学生掌握常用的生物化学与分子生物实验理论，如物质分离技术(离心、层析、电泳)，分析方法(分光光度法、酶法、核酸蛋白分析法)，核酸分离鉴定，基因工程技术与体外扩增等；熟悉并能熟练操作常用实验仪器设备：如刻度吸管，微量移液器，分光光度计，离心机，电泳装置，层析装置和PCR仪的使用等。了解相关实验技术在科研中的实际应用。通过该实验课的基本训练，使学生掌握常见生物化学及分子生物学技术的原理和方法，提高学生独立思考、观察、分析问题和解决问题的能力，同时培养学生的创新意识、科学素养和科研能力。通过实验，巩固和加深生物化学课程的基础理论知识，为今后的科学研究打下坚实的生物化学基础。三、教学方法理论课采用多媒体课件方式，以教师讲授和介绍为主，结合课堂讨论、分组讨论的形式进行。实验课采用分组合作、学生独立操作等方式进行。四、成绩考核方式本课程为考查课，理论考试的形式为闭卷。本课程成绩由平时成绩（60%）和期末考试成绩（闭卷，40%）两部分组成。平时成绩结合学生实验课考勤、实验操作能力、设计性实验综合情况以及实验报告作业综合情况评定。五、教学时数分配表第三学期序号教学内容性质学时数1生化基本操作；双缩脲法测定蛋白质含量（标曲法）；实验52血红蛋白及其衍生物的吸收光谱分析；血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定（赖氏法）实验53底物浓度对酶活性的影响——碱性磷酸酶米底常数的测定实验54移液枪的使用；葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度；血清尿素氮测定——二乙酰一肟法实验55血清总甘油三酯测定——酶联法；血清总胆固醇测定——酶联法实验56蛋白质的分离提纯与鉴定——G25凝胶过滤去盐；血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳实验5合计30第六学期序号教学内容或实验项目性质课时数1电泳技术理论32光谱技术理论33蛋白质分析技术理论34离心技术理论35色谱（层析）技术理论36酶学分析理论37凯氏定氮法测定蛋白质含量实验58血清乳酸脱氢酶同工酶的测定实验59SDS电泳；β-地中海贫血基因检测（反向点杂交法——PCR部分）实验511β-地中海贫血基因检测（反向点杂交法——杂交部分）实验512β-地中海贫血基因检测（荧光PCR熔解曲线法）实验513设计性实验：植物SOD酶的提取、纯化、鉴定及酶活性测定实验20合计63六、教材与主要参考书

1、指定教材蔡望伟、黄东爱、周代锋主编，生物化学与分子生物学实验，华中科技大学出版社。2、教学参考书[1]夏其昌主编，蛋白质化学研究技术与进展，北京：科学出版社，ISBN7-03-005806-2，科技新书目：423-284。1997年10月第一版。[2]孙志贤主编，现代生物化学理论与研究技术，北京：军事医学科学出版社，1995年4月第一版。[3]袁勤生主编，现代酶学，华东理工大学出版社。附：《生物化学与分子生物学实验技术》课程教学大纲知识要点一览表《生物化学与分子生物学实验技术》课程教学大纲知识要点一览表教学单元细目知识要点生物技术专业生物化学实验基本仪器和基本操作教学内容刻度吸管的选择与使用方法掌握微量移液器的选择与使用方法掌握分光光度计的工作原理掌握分光光度计的使用方法掌握离心机，电泳装置，层析装置使用方法掌握光谱技术教学内容光谱分析的基础知识掌握光谱分析技术掌握实验项目血红蛋白吸收光谱的测定的原理掌握血红蛋白吸收光谱的测定的方法熟悉葡萄糖氧化酶（GOD）法测定血糖含量的原理掌握葡萄糖氧化酶（GOD）法测定血糖含量的方法熟悉福林—吴宪氏法（磷钼酸法）测定血糖含量的方法熟悉福林—吴宪氏法（磷钼酸法）测定血糖含量的原理掌握血清总甘油三脂测定－－酶联测定法测定血清总甘油三脂含量的原理掌握血清总甘油三脂测定－－酶联测定法测定血清总甘油三脂含量的方法熟悉血清总胆固醇测定－－酶联测定法测定血清总胆固醇含量的原理掌握血清总胆固醇测定－－酶联测定法测定血清总胆固醇含量的方法熟悉血清尿素氮测定——二乙酰-肟法测定血清尿素氮含量的原理掌握血清尿素氮测定——二乙酰-肟法测定血清尿素氮含量的方法熟悉电泳技术教学内容电泳技术的基本知识掌握电泳技术的基本原理掌握电泳的分类掌握影响电泳的因素熟悉实验项目血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的原理掌握血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的方法熟悉清载脂蛋白B的免疫定量电泳的原理掌握清载脂蛋白B的免疫定量电泳的方法熟悉色谱（层析）技术教学内容层析的原理掌握层析的分类熟悉常用的层析方法的原理掌握常用的层析方法熟悉实验项目葡聚糖G25凝胶过滤去盐的原理掌握葡聚糖G26凝胶过滤去盐的方法掌握DEAE纤维素离子交换柱层析分离血清蛋白质的原理掌握DEAE纤维素离子交换柱层析分离血清蛋白质的方法掌握DE-52分离血清γ-球蛋白的原理掌握DE-53分离血清γ-球蛋白的方法熟悉血红蛋白A2（HbA2）微量柱层析测定的原理掌握血红蛋白A2（HbA3）微量柱层析测定的方法熟悉亲和层析法分离人血浆纤溶酶原的原理掌握亲和层析法分离人血浆纤溶酶原的方法熟悉离心技术教学内容离心的基本原理掌握常用离心分离的方法掌握常用离心分离的注意事项了解蛋白质分析技术教学内容蛋白质的分离纯化的原理掌握蛋白质的分离纯化的常用方法掌握蛋白质的含量测定的原理掌握蛋白质的含量测定的常用方法掌握实验项目蛋白质含量测定掌握双缩脲法测定蛋白质含量掌握Folin试剂法(Lowry法)测定蛋白质含量熟悉考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量熟悉紫外吸收法测定蛋白质含量掌握凯氏定氮法测定蛋白质含量熟悉硫酸铵分离血清白蛋白和球蛋白掌握等电聚焦电泳测定蛋白质等电点了解SDS测定蛋白质分子量了解酶学分析教学内容酶的分离纯化的原理掌握酶活力测定方法熟悉影响酶促反应的因素熟悉同工