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文档简介

实验三

大豆制品中脲酶活性的测定2010.10.30一、实验目的1、掌握大豆制品中脲酶活性的测定原理2、熟悉掌握用PH增值法测定大豆制品中脲酶活性二、

测定原理

将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30分钟，尿素酶催化尿素水解产生氨，由于尿素水解释放的氨是碱性的，可使溶液PH值升高，试样溶液与空白溶液的PH值之差，即可间接表示出氨量的多少。

NH2CONH2+

尿素酶

2NH3↑+CO2三、仪器及试剂1、仪器分析天平、样品粉碎机、样品分析筛、恒温水浴、酸度计、称量瓶、移液管、角匙等0.05mol/L磷酸盐缓冲液、尿素缓冲溶液等2、试剂四、试样的选取和制备

选取具有代表性的试样，粉碎至40目，用“四分法”缩减至200～300g，密闭保存，以防试样组分变化或变质。五、测定步骤1、样品试验：准确称取0.200±0.001g样品于称量瓶中，加入10ml尿素缓冲溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴中，在混合操作时称量瓶切勿倒置。2、空白试验：准确称取0.200±0.001g样品于称量瓶中，加入10ml0.05mol/L磷酸盐缓冲溶液，加塞混合，置于30℃水浴中。3、样品试验与空白试验的制备应相隔5分钟，并且每隔5分钟搅拌内容物一次。4、30分钟后，相隔5分钟将样品与空白试验的称量瓶从水浴中取出，将上层液体移入5ml烧杯中，在从水浴中取出刚达5分钟时，分别测定此种上层液体的PH值。

1、计算公式：六、结果的计算

样品试验的PH值与空白试验的PH值两者之间的差异，则为脲酶活性的指数，即：脲酶活性=试样的PH测定值-空白的PH测定值

每个样品应取两个平行样测定，以其算术平均值为结果。

2、重复性：七、注意事项1、关于酸度计的使用BACK2、称量瓶应塞紧3、关于固定质量称量法4、通常：

0.02<△PH≤0.3加工适度

△

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