猪瘟抗体效价与猪瘟母源抗体相关性研究

猪瘟抗体效价与猪瘟母源抗体相关性研究

猪疫情是一种高度接触性的传染病，对养猪业危害严重。它主要以广泛的流行趋势、发病率和死亡率为主要特征。在2011年的《陆生动物卫生法典》中,OIE规定猪瘟是必须呈报的猪传染病,我国将其列为一类动物传染病。目前,我国对猪瘟的防控以疫苗免疫为主,取得了一定效果,但仍然不能阻断猪瘟在我国的发生。近些年,猪瘟的发病特征和临床表现越来越复杂,出现了潜伏期长,临床症状不典型的非典型猪瘟,以及发病年龄提前、长期持续感染等复杂现象,造成严重经济损失。这些现象与免疫密切相关,特别是猪瘟的首免时间和免疫程序。为此,本研究对浙江某规模猪场不同类别猪的猪瘟抗体水平进行调查,通过整理、分析得到一些结论和启示,为规模化养猪场制定科学合理的免疫程序提供数据支持。1材料和方法1.1猪疫情疫苗与实验动物猪瘟兔化弱毒冻干细胞苗购自齐鲁动物保健品有限公司;不同胎龄的母猪及所产仔猪来源于浙江某规模猪场。1.2医用血凝板、猪模型血凝产品及血清猪瘟正向间接血凝反应(IHA)诊断试剂盒、96孔110°V型医用血凝板、猪瘟血凝抗原、阳性对照血清、阴性对照血清及稀释液等均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。1.3不同日龄的猪猪抗炎抗体的检测1.4猪检验和血清制备生产母猪断奶时用4头份猪瘟弱毒疫苗免疫。其仔猪随机分为两组,A组在21d~23d首免、60d~65d二免,B组在35d~40d首免、65d~70d二免,用3头份猪瘟疫苗免疫后,10d~15d采取全血并分离血清备检。1.5猪相同部位的不同猪抗炎作用的测定随机抽取63窝未经猪瘟疫苗免疫的同窝仔猪全血,分离血清备检。1.6不同胎龄的母猪和猪疫情免疫抗体检测1.7抗抗体检测方法按照试剂盒说明书进行IHA检测。IHA血凝效价4log2(1∶16)为保护临界线,抗体效价≥25判为合格。2结果2.1猪档案母源抗体检测结果仔猪猪瘟的母源抗体合格率、抗体效价平均值随仔猪日龄增长而逐渐降低。在母猪一年两次猪瘟免疫注射情况下,仔猪36d~40d时猪瘟母源抗体的合格率为78.79%、其抗体平均效价达到5.97;41d~45d时,猪瘟母源抗体合格率降到50%,抗体平均效价降到4.79(表1)。2.2抗体成功率A组仔猪21d~23d进行猪瘟疫苗首免、60d~65d二免,B组35d~40d首免、65d~70d二免。在免疫剂量相同情况下,A组一免抗体合格率为26.67%(4/15),抗体平均效价为2.87。B组的一免抗体合格率为44.32%(117/264),抗体平均效价为4.61;B组明显高于A组。二免后A组抗体合格率为42.37%(25/59),抗体平均效价为3.76;B组抗体合格率为46.15%(66/143),抗体平均效价为4.81,B组抗体合格率略高于A组,并且B组抗体平均效价明显高于A组(图1、图2)。结果表明35d~40d首免比21d~23d首免更为合理。2.3差双滴度和各比方差分析对63窝仔猪的猪瘟母源抗体进行检测,母源抗体水平一致的占36.51%(23/63),相差一个滴度的占36.51%(23/63),差两个滴度占15.87%(10/63),差3个~4个滴度均占3.17%(2/63),个别猪差距达6个~8个滴度,分别占1.59%(1/63)和3.17%(2/63),差距在3个~8个滴度之间的占11%。结果表明同一窝仔猪的猪瘟母源抗体效价并不完全相同或接近,甚至可能有很大差异。2.4其他各胎龄经产猪抗体分析不同胎龄母猪猪瘟抗体的合格率,初产母猪稍低(83.33%),其它各胎龄经产母猪基本接近,其中也有个别母猪抗体低于临界值;猪瘟抗体效价的平均值随母猪胎龄增加而升高,并且抗体的离散度则随胎龄增加而缩小(表2)。3疫程序免疫下见血牛专四体仔猪猪瘟母源抗体水平的高低,直接关系到猪瘟首免时间的确定。许多养殖场普遍使用的仔猪猪瘟免疫程序为20d~23d首免、60d~65d二免,但免疫效果不佳,免疫后的猪群发生了猪瘟,造成仔猪和育肥猪大量死亡。其原因可能是此时仔猪猪瘟母源抗体还处于较高水平,过早免疫既中和了母源抗体,又中和了一部分免疫抗体而导致免疫失败。调查结果也表明35d~40d是仔猪母源抗体进入明显下降的临界区间,在此时间点之前母源抗体水平较高,此后抗体水平明显下降。对采取不同免疫程序免疫的仔猪抗体进行检测也表明35d~40d首免抗体合格率和平均抗体效价均高于21d~23d首免,结果提示仔猪的猪瘟首免时间应该在40d左右为宜。仔猪的母源抗体依赖于母猪的初乳,本次调查表明同窝仔猪母源抗体存在很大差异,主要原因可能是仔猪出生后初乳的摄入量不同所致;个别也可能因寄养不当,导致新生仔猪初乳摄入不足,甚至没有吃到初乳。因此,在母猪猪瘟免疫到位的情况下,仔猪出生后应及时吃好初乳,特别是对弱小个体,必须人工帮助其吃足初乳,寄养仔猪也应保证其吃足初乳后再寄出,否则在一个猪瘟阳性场,这部分低抗体仔猪极有可能发生感染。规模猪场生产母猪猪瘟免疫一般采用随胎免疫的方式,即一年免疫两次以上,初产母猪一般在配种前也经过二次猪瘟疫苗免疫。本调查表明随母猪胎龄增加,免疫注射的多次实施,猪瘟抗体渐趋平衡,离散度缩小,抗体平均效价不会因免疫注射的反复进行而不断上升,只保持在一个相对稳定的状态,本结果与徐新红、覃绍敏、杨铭芬等报导一致。针对我国目前猪瘟的流行现状与养猪业规模化的特点,做好免疫监测是降低我国现阶段猪瘟流行的重要手段。应用免疫检测手段,可以随时掌握猪群的免疫状态,制定适合于该猪场合理的免疫程序,并随时淘汰免疫耐受猪(对疫苗注射不产生或产生低抗体水平的猪)。此外,结合CSFV抗原检测,坚决淘汰CSFV