第二章 第二节 微生物学质量控制 实验动物学

第二章

第二节实验动物微生物学质量的

标准化一、实验动物的微生物学分类（一）实验动物按微生物学控制的分类（二）实验动物微生物控制的国家标准实验动物按微生物学控制的分类按对微生物学质量的控制，可将实验动物分为四类：无菌动物(germfreeanimal,GFA)悉生动物(gnotobioticanimal,GNA)无特定病原体动物(specificpatho-genfreeanimal,SPFA)清洁动物(cleananimal,CLA)普通动物(conventionalanimal,CVA)实验动物在我国分为四类普通动物（CVA），一级动物清洁动物（CLA），二级动物无特殊病原体动物（SPFA），三级动物无菌动物（GFA）和悉生动物（GNA），四级动物二、无菌动物与悉生动物(一)无菌动物（germfreeanimal，简称GFA）1.定义：指用现有的实验手段检测，动物的体表体内不携带其它生命体（包括一切微生物和寄生虫）的实验动物。饲养条件：无菌隔离器内来源：第一代通过无菌剖腹产术，人工哺乳获得。维持：通过无菌剖腹产术，人工哺乳或无菌动物代乳饲育扩群。2.无菌动物的发展过程⑴1895～1910年解决了无菌生命能否生存的问题。无菌豌豆动物没有肠道菌参与下不能生存

无菌豚鼠无菌鸡⑵1910～1940年解决了无菌生命必须供给B族维生素才能正常生长⑶1940年至今系统饲养无菌动物推广应用种类培育者及育成时间小鼠Pleasants,1959大鼠Reyniers1946；Gustafsson,1948豚鼠Miyakawa1958;Tanami,1959;兔Wostmann1959;Luckey,1963狗Glimsedt,1946猫Bleby,1969山羊、绵羊Smith,1961,1966猪Whitenair,1960马Drummond等,1973猴Reyniers,1942鸡Reyniers,1943鹌鹑Woodard等,1965;Miles,1966无菌动物饲养装置的改进不锈钢隔离器

塑料隔离器

3.无菌动物特点：微生物特点：在动物体内外任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫。

“无菌”是个相对的概念，只是根据现有的科学知识和检验方法在一定时期内不能检出病原体而已。随着科学技术的发展，现在认为是无菌的动物或许将来可以检出病原体而不是无菌动物。形态学特点：消化系统

(1)盲肠肥大，

(2)肠道肌层薄，肠绒毛变细变短

(3)肝脏变小循环系统(1)心脏变小(2)白细胞数变少，且数量波动范围小免疫系统(1)胸腺，淋巴组织，网状内皮系统发育不良(2)脾脏小，无二级滤泡生理学特点：免疫功能

(1)血清中IgG、IgM水平低，几乎不存在丙种球蛋白和特异性抗体

(2)免疫应答速度慢，过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱生长率

(1)不同种属不同

(2)无菌鸟类生长率高于同种普通鸟

(3)无菌大、小鼠与普通鼠差不多

(4)无菌豚鼠和无菌兔比普通的慢生殖(1)无菌大、小鼠略高于普通大小鼠(2)豚鼠和兔繁殖能力比普通级低代谢和营养无菌动物血中含氮量少，肠管对水的吸收率低，代谢周期比普通动物长体内不能合成维生素B和K，易产生这两种维生素的缺乏症抗辐射能力无菌动物抗辐射能力强，抗实验性烫伤和抗休克死亡能力也强于普通动物寿命无菌动物的寿命普遍长于普通动物4.无菌动物的应用微生物学研究免疫学研究放射医学研究营养、代谢研究老年病学研究心血管疾病研究毒理学研究肿瘤学研究宇航医学研究寄生虫学研究口腔医学研究某种疾病的病原研究无菌猫猫瘟病毒不易受感染普通猫猫瘟病毒易感接种说明感染受肠道微生物影响微生物间的拮抗作用研究菌群之间的拮抗作用是生物屏障的一种，生物屏障有时比物理屏障更有效。1）霍乱弧菌口服无菌幼豚鼠霍乱弧菌死亡口服无菌幼豚鼠霍乱弧菌+产气荚膜杆菌

存活说明产生拮抗作用，产气荚膜杆菌去除了霍乱杆菌，使动物不死亡。2）福氏痢疾杆菌口服无菌幼豚鼠福氏痢疾杆菌死亡口服无菌幼豚鼠大肠杆菌福氏痢疾杆菌存活，只检出大肠杆菌口服产生无菌雏鸡白色念珠菌菌丝体侵入肠道粘膜

口服产生普通雏鸡白色念珠菌酵母型菌体很少发病口服口服无菌雏鸡大肠杆菌白色念珠菌得到保护在免疫学研究中的应用无菌动物血中无特异性抗体，很适合于各种免疫现象的研究。丙种球蛋白和特异性抗体研究无菌动物体内既无抗原也无特异性抗体，处于一种“原始状态”，很适合用于各种免疫功能的研究。如果用无抗原性的饲料喂无菌动物，体内可完全无抗体。无菌动物暴露于微生物，先产生α球蛋白，再产生β球蛋白，最后产生γ球蛋白。制备高效价，无交叉反应的特异性抗体在宇航医学研究中的应用利用悉生动物研究肠道菌群的作用及相互关系，从而研制出一种只有极低残渣的食品，宇航员食后，不会产生腹泻或胃肠涨气。(二)悉生动物1.悉生动物的定义（gnotobioticanimal，简称GNA）定义：又称已知菌动物，指动物体内带有明确的微生物种类的动物。饲养条件：