第08章++胺类药物的分析

第八章胺类药物的分析

AnalysisofAromaticAmineDrugs第一节芳胺类药物的分析AromaticAmineDrugs常见的芳胺类药物

对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构酰胺类药物的基本结构非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）对乙酰氨基酚（扑热息痛）醋氨苯砜盐酸利多卡因盐酸布比卡因芳伯氨基酯键,易水解脂烃胺Cl－反应盐酸普鲁卡因对乙酰氨基酚酰胺键，易水解杂质对氨基酚潜在芳伯氨基酚羟基一、结构与性质（一）具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。

（二）酯键或酰胺键易水解（三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。（四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（六）UV（七）IR（五）某些特征取代基（如酚羟基）的反应二、鉴别试验

（一）重氮化—偶合反应

芳香第一胺类鉴别反应

盐酸普鲁卡因ChP（2010）[鉴别]（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

对乙酰氨基酚ChP（2010）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。

（二）三氯化铁反应对乙酰氨基酚（三）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应

2．羟肟酸铁盐反应

3．与汞离子的反应

（四）水解产物的反应

1.盐酸普鲁卡因ChP（2010）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。

二乙氨基乙醇↑红石蕊试纸变蓝HCl+△使湿润的红色石蕊试纸变蓝HCl2.苯佐卡因ChP（2010）[鉴别]（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。

（五）制备衍生物测熔点1．三硝基苯酚衍生物

盐酸利多卡因ChP（2010）[鉴别]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～232℃，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2010）2.硫氰酸盐衍生物

盐酸丁卡因ChP（2010）[鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。3500~3100cm-1

N-H2645cm-1

N-H+1600cm-11511cm-1

C=C1640cm-1

C=O1280cm-1三、杂质检查（一）对乙酰氨基酚

1.有关物质

杂质来源中间体、副产物及分解产物

对氯乙酰苯胺杂质对照品法

检查方法TLC

其他杂质参比杂质对照品法

副反应副副反应2.对氨基酚

杂质来源中间体、水解产物反应原理

检查方法对照法取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50

g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005％）。

（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查

杂质来源水解产生-CO2[O]有色溶血检查方法TLC杂质对照品法

精密量取本品，加乙醇稀释使成为每1ml中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1ml中含30

g的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液各10

l，分别点于含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）为展开剂，展开后，取出晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液喷雾显色。供试品溶液如显与对照品溶液相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深。（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物四、含量测定

具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。

2.主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度（2）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3盐酸1:2.5～6；加入盐酸：①重氮化反应速度加快；②重氮盐在酸性溶液中稳定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果（3）室温条件下滴定10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定(5)反应速度与药物化学结构的关系苯环上有吸电基团或供电基团时a.当苯环上特别是氨基邻位或对位上有吸电基时,如吸电基通过诱导效应使氨基上电子云密度降低，从而碱性降低，游离芳伯胺浓度增大，所以反应速度就快。等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速度加快。b.

当在苯环上有供电基时，则使反应速度降低。如等。供电基能使氨基碱性增强，这样氨基成盐的机会就增大，游离芳伯胺的浓度就减小，所以反应速度就慢。3.指示终点的方法（1）永停滴定法ChP（2005）、BP（2005）阳极：阴极：导致在两电极间有电子流动，从而回路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。（2）电位法USP（24）（3）外指示剂法KI—淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

（4）内指示剂法中性红不可逆指示剂外指示剂法的缺点：

由于滴定的溶液是强酸性，KI遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。

由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。

方法难掌握。4.测定方法

盐酸普鲁卡因ChP（2010）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl（三）紫外分光光度法

对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。

（二）非水溶液滴定法

脂烃胺侧链，具弱碱性对乙酰氨基酚ChP（2010）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。（四）比色法

中性条件下的重氮化反应（五）荧光法——荧光探针技术

使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。λex400nm（激发波长）、λem485nm（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。（六）HPLC法

盐酸普鲁卡因注射液ChP（2010）可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量例1．盐酸普鲁卡因胺常用的鉴别反应有A.重氮化—偶合反应B.羟肟酸铁盐反应C.氧化反应D.磺化反应E.碘化反应

例2．采用亚硝酸钠法测定含量的药物有A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C．苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素

例3．下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因

例4.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是A.添加Br

B.生成NO+·Br

C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行

例5．中国药典（2010年版）所收载的亚硝酸钠滴定法中指示终点的方法为A.电位法B.永停法C.外指示剂法D.内指示剂法E.自身指示剂法

例6．亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法

例7.ChP（2010）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法

例8.以下那种药物中应检查对氨基苯甲酸A.盐酸普鲁卡因B.盐酸普鲁卡因胺C.注射用盐酸普鲁卡因D.盐酸普鲁卡因胺片E.盐酸普鲁卡因注射液

例9.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点

例10.检查对乙酰氨基酚中的对氨基酚杂质，使用的试剂是A.三氯化铁

B.硫酸铜

C.硫酸铁铵

D.亚硝基铁氰化钠

E.三硝基苯酚例[11-14]A．对氨基苯甲酸

B．对氨基酚C．对苯二酚D．肾上腺酮E．游离水杨酸

下列药物中应检查的杂质是

11．药典规定阿司匹林

12．药典规定盐酸普鲁卡因注射液13．药典规定对乙酰氨基酚

14．药典规定肾上腺素

EABD练习题：1．简述亚硝酸钠滴定法的原理及KBr的作用。2．试从对乙酰氨基酚和盐酸普鲁卡因的结构出发，分析其可能具有哪些鉴别反应和含量测定方法？3.精密称取对乙酰氨基酚0.0420g，置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度为0.594，按C8H9NO2的吸收系数为715计算本品百分含量。第二节苯乙胺类药物的分析

苯乙胺类药物的基本结构*具有烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。如在苯环3、4位上有羟基取代，则为儿茶酚胺类药物。常见的苯乙胺类药物盐酸克仑特罗硫酸沙丁胺醇一、结构与性质

1.脂烃胺基侧链，显弱碱性2.酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应3.具手性碳原子，具旋光性

4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。（三）氧化反应区别肾上腺素和去甲肾上腺素。（五）与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应）脂肪族伯胺的专属反应三、杂质检查

杂质来源原料残存

检查方法比较法（含量测定法）

（一）酮体的检查

检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物

检查方法：TLC中高低浓度对比法HPLC中不加校正因子的主成分自身对照法（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查