方晓玲新型外用剂型-脂质体凝胶与微乳

新型外用剂型——

脂质体凝胶与微乳复旦大学药学院方晓玲，董平，白志华，沈蕴琪，徐白1微乳的性质微乳(Micro-emulsion)由油相、水相、乳化剂及助乳化剂组成的一种外观澄明、热力学稳定的系统。微乳体系有助于提高系统的稳定性，能延长产品的有效期微乳在室温下易于制备，对水溶性和脂溶性药物都有溶解能力且具有较高的物理稳定性，包裹其内的药物具有快速吸收，缓慢释放的优点2皮肤用微乳的特点：1.高渗透性、高水合保湿性能

——微乳的亲脂区能以许多方式同角质层相互作用，溶解在微乳脂性区的药物能直接分配进角质层的脂质中，或脂质载体本身能插入角质层的脂质区，这些相互作用能导致增加药物的渗透。

——微乳的亲水区能使角质层很大程度的发生水合作用，微乳的水合保湿性能远远超过一般常用的制剂如溶液剂和乳剂，并且能显著提高渗透速度促进了药物的吸收。

3皮肤用微乳的特点2.微乳具有良好的角质层和真皮贮药功能3.微乳所使用的辅料如：油相，表面活性剂都是无毒安全的，便于大规模生产；产品外观澄明，晶莹透亮，尤其适合作皮肤局部使用4.微乳系统中所用的低级醇类能提高皮肤的通透性，促进载药系统的整体经皮转运，微乳贮藏于皮内，发挥贮库作用，使药物缓慢释放，发挥长效作用4外用脂质体和脂质体凝胶脂质体(liposome)：将药物包封于类脂质双分子层形成的薄膜中所制成的超微型球状药物载体制剂，属胶体给药系统。脂质体有许多皮肤局部用药的优点：能较好的包裹亲水性或亲油性药物，降低药物对皮肤的刺激性；对难溶性药物有增溶性，能增加药物在皮肤的滞留时间和滞留量；具有药物全身吸收的限速膜屏障作用，减少药物的全身吸收，从而降低药物的不良反应。脂质体经皮给药制剂在化妆品、炎症治疗麻醉学、癌症治疗和基因治疗等方面有很大潜力

5凝胶剂(Gel)：含有溶解、混悬或乳液状态药物的澄明或略有混浊的半固体制剂。对于局部用制剂来说，具有一定的黏度和触变性是非常必要的。但脂质体缺乏这些性质，需要加入一些凝胶剂或增稠剂。国外已有含药脂质体的外用凝胶剂上市，一些化妆品也采用了脂质体和凝胶技术以增强一些营养素的皮肤吸收6第一部分吡罗昔康微乳研究（数据和图表有待加入）以LauroglycolFCC--水--Labrasol、CremophorEL--TranscutolHP、乙醇作为微乳的组成部分,对微乳伪三元相图进行了研究,初步制备了吡罗昔康水包油微乳。7采用改良Franz扩散池，大鼠背部皮肤作为透皮模型,HPLC测定药物透皮浓度,计算微乳的经皮累积渗透量，进一步优化处方。吡罗昔康系难溶性药物，其外用凝胶剂需要加入Azone-丙二醇作为经皮渗透促进剂吡罗昔康微乳有很强的透皮能力，其经皮渗透速度远远大于凝胶剂，有望成为吡罗昔康的新型透皮给药制剂。8第二部分三七皂苷复方微乳的研究选用卵磷脂（化学名称磷脂酰胆碱Phosphatidylcholine）作为表面活性剂，肉豆蔻酸异丙酯（IsopropanolMyristateIPM）与ISOFOL16为油相，乙醇作助表面活性剂，制备了三七总皂苷、β-蜕皮激素－卵磷脂W/O型微乳。选用微乳作为载药系统，以天然植物活性成分中水溶性化合物三七皂苷和β-蜕皮激素为模型药物，为这类皮肤透过性不良的药物探索一种新型的经皮给药系统9以药物微乳体外透皮速度、透过量及皮肤蓄留量为考察指标，综合理化性质（电导率、折光率、粘度）考察了油相用量，表面活性剂/助表面活性剂比例和水相含量对微乳性质的影响。10微乳的处方研究微乳相图研究相图绘制是研制微乳必要的处方前工作，可为确定微乳处方提供必要的指导。相图有多种，其中最常用的是伪三元相图，此相图往往将表面活性剂与助表面活性剂按一定比例混合为一个组分，与另外两组分油相和水相以滴定法绘制相图11微乳相图研究W/O型微乳除了要符合透明、粘度小的要求外，还有一个重要的指标：载水量，在相图中即体现为W/O型微乳区的大小PNS最佳含量为2%，PNS最大溶解浓度约为400mg/ml

EDS最佳含量为0.2%，EDS最大溶解浓度约为30mg/ml

则微乳载水量至少应该为7%12微乳处方研究以卵磷脂/乙醇作为混合表面活性剂采用伪三元相图，以增溶水量为指标油相的选择Km的选择正交设计法L8（23）皮肤渗透参数优化制剂处方微乳的理化性质13油相选择（IPM、ISOFOL16与Miglycol812N）结果：IPM与ISOFOL16作为油相，较MIGLYOL812N形成的微乳区大14油相选择（IPM、ISOFOL16与Miglycol812N）结果：IPM与ISOFOL16作为混合油相，形成的微乳区较大15Km的选择（Km=1：2、1：1、2：1）Km=1：2Km=2：1Km=1：1结果：当Km为1：1时，形成的微乳区较大16在IPM、ISOFOL16/PC/ethanol/water微乳相图制备的基础上得到基本处方后，制备PNS/EDS-PC油包水微乳，以药物在皮肤中的蓄积量为指标，结合微乳的理化性质考察对处方设计作进一步探讨，选出较优处方。17PNS/EDS－PC微乳的制备方法按照IPM、ISOFOL16/PC/ethanol/water微乳相图制备的基础上得到基本处方，将适量的卵磷脂溶解于无水乙醇中，与一定量的IPM、ISOFOL16搅拌混溶，搅拌下向此混合溶液中滴加一定浓度的药物溶液，即得PNS/EDS－PC油包水型微乳。18正交设计法正交设计法L8（23）

levelwater（%）IPM/ISOFOL16(％)Km（lecithin/ethanol）1271040551：11.5：119微乳处方正交设计结果-PNSNoWOKm

Jμg/cm2

hQμg

cm-2C残μg/gConductanceμs

cm-1Refractiveiscositymm2

s-1

123456781111222211221122121212120.01550.00350.00790.00220.04940.04970.01170.00730.24150.13420.15170.09620.48050.48830.21000.14030.44080.35202.03270.99242.90002.56713.89702.67480.203×1020.135×1020.065×1020.060×1020.288×1020.205×1020.090×1020.045×102

1.42471.43131.42751.43101.42271.42941.42591.430914.91522.71214.75426.49717.59424.52516.42127.350结果：处方七微乳中Rg1在皮肤中的蓄积量最大20微乳处方正交设计结果-EDSNoWOKm

Jμg/cm2

hQμg

cm-2

C残μg/gConductanceμs

cm-1Refractiveiscositymm2

s-1

123456781111222211221122121212120.0290.0230.0390.0110.0540.0410.0700.0420.3750.2950.3730.2110.3560.2980.4810.3330.3250.5350.9610.5941.3381.1801.8991.7620.203×1020.135×1020.065×1020.060×1020.288×1020.205×1020.090×1020.045×102

1.42471.43131.42751.43101.42271.42941.42591.430914.91522.71214.75426.49717.59424.52516.42127.350结果：处方七微乳中EDS在皮肤中蓄积量最大21PNS/EDS-PC微乳与PNS/EDS溶液的透皮考察

（n=5）（mean±SD）

Time（h）Rg1EDSmicroemulsionsolutionmicroemulsionsolution0.5124680.119±0.0060.133±0.0180.137±0.0180.147±0.0150.176±0.0180.217±0.0380.077±0.0030.081±0.0340.084±0.0050.087±0.0050.093±0.0090.106±0.0140.130±0.030.136±0.030.148±0.030.209±0.040.334±0.070.473±0.090.087±0.010.122±0.020.140±0.030.151±0.030.171±0.020.209±0.01J（μg/cm2/h）C残（μg/g）0.046±0.0083.8970.018±0.0021.1320.066±0.011.8990.014±0.010.852结果：达到了载药微乳在皮肤中蓄积，缓慢释放药物的目的22讨论水溶性药物三七皂苷和β-蜕皮激素制成W/O型微乳后，经皮渗透速度提高，皮肤滞留量增加，有利于药物透过皮肤，发挥局部或全身作用微乳作为一种新型外用制剂，不仅能够改善难溶性药物的经皮吸收性质，而且能够增加水溶性药物的透皮吸收23第三部分

三七皂苷复方脂质体凝胶的研究24制备脂质体凝胶的目的脂质体虽然能够大大提高药物经皮渗透性能，但对于局部用制剂来说，具有一定的黏度和触变性是非常必要的。但脂质体缺乏这些性质，需要加入一些凝胶剂或增稠剂，而这些附加剂往往影响脂质体的理化性质和释药性，从而影响疗效；本文选择脂质体凝胶作为三七总皂苷和β-蜕皮激素的载药系统，希望凭借脂质体的促渗作用和凝胶本身较好的生物粘附性，能够增加药物在皮肤的滞留量和滞留时间，更好地发挥药物的局部作用。25三七总皂苷复方脂质体的处方筛选

▲薄膜分散法制备脂质体卵磷脂胆固醇

乙醚玻璃珠250mL茄形瓶

25℃水浴旋蒸真空干燥过夜

含药水溶液25℃水化PNS/EDS脂质体▲

单因素考察

pH

超声强度和时间水化温度25℃

不进行超声处理

选用pH适中的去离子水为水相介质

26卵磷脂与胆固醇用量比

n=3

两者比例对包封率影响较大，随着大豆卵磷脂用量的增大，溶液透明度减小，当比例为9：1时，包封率最高大豆卵磷脂与胆固醇的用量比

包封率(%)Rg1EDS1:135.83±0.7738.49±1.322:147.28±0.4952.45±0.624:149.76±1.0956.52±0.388:147.07±0.6753.45±0.829:156.78±0.8161.82±0.1127药物浓度

n=3

药物浓度（mg/ml）包封率(%)Rg1EDS2037.83±1.0425.39±0.514040.46±1.8748.27±0.998043.95±0.1953.65±1.4416030.94±0.8646.98±1.35

药物浓度过高过低，都会使包封率下降，当浓度为80mg/ml时，包封率最大28

脂质与药物用量比

n=3

随着脂质用量的增加，产品的粘稠度增大，包封率增加，当脂药比为5:1时，包封率最大脂药比包封率(%)Rg1EDS0.5:140.01±1.9644.80±0.981.25:141.62±0.6748.90±1.162.5:143.51±0.2349.16±1.375.0:179.79±0.9664.84±0.1729▲正交实验

根据单因素试验结果，影响药物包封率的主要因素有大豆卵磷脂与胆固醇的用量比、脂质与药物的用量比以及药物浓度。

处方筛选结果：卵磷脂与胆固醇用量比为9:1，Rg1浓度为40mg/mL，EDS浓度为3mg/mL，脂药比为5:1

处方重复结果：Rg1的包封率为(79.79±0.96)%，EDS的包封率为(66.95±1.65)%（n=3）

30▲脂质体的粒径

取PNS脂质体适量，去离子水稀释，置NICOMP测定管、粒度测定仪中测定脂质体的粒径大小。脂质体的粒径大小介于2180～2781nm之间

SizedistributionofPNS/EDSliposome31三七总皂苷复方脂质体凝胶的处方筛选

▲脂质体凝胶剂的处方制备

脂质体凝胶，PNS的含量为2%，β-蜕皮激素的含量为0.15%

卡波姆-934卡波姆-940重量比分别为0.5%、1%、2%烧杯少量蒸馏水溶胀、过夜2mol/L氢氧化钠溶液调节pH在6-7空白凝胶基质脂质体优选处方研和均匀32采用ZTY智能透皮试验仪（立式）取样时间点：1、2、4、6、8h扩散介质：pH7.4PBS皮肤:大鼠背部皮肤水浴温度:32±0.5℃▲离体大鼠皮肤透皮实验

33▲脂质体凝胶剂的处方筛选

Carbomer–9348hCumulativeamount（μg）0.5%1%2%Rg119.74±0.4539.84±1.8824.90±1.61EDS1.89±0.0393.64±0.202.27±0.069Cumulationofdrugfromdifferentformulationacrossratskin(8h)

以卡波姆-940为基质形成的脂质体凝胶，药物8h皮肤透过量很小，低于最低检测限。34Drugcontentsintheskinandcorium(8h)

Cumulation(8h)DrugCarbomer-934Carbomer-9400.5%1%2%0.5%1%2%skinRg1(μg/g)87.93±1.34123.14±1.5844.83±0.6764.37±0.64108.63±1.5148.79±0.74EDS(μg/g)10.29±0.1814.09±0.235.10±0.107.11±0.0611.22±0.175.64±0.09coriumRg1(μg/