卵巢过度刺激综合征患者血清和气泡液中vegf和il-6的表达

卵巢过度刺激综合征患者血清和气泡液中vegf和il-6的表达

卵巢刺激综合征（hhs）是在辅助生殖技术的控制下发生的严重并发症。发病率为20%23%，重度发病率为0.3%5%。OHSS的发病机制目前尚未明确,其主要病理生理学变化是毛细血管的通透性增加和水钠潴留,VEGF和IL-6有作用于血管的特性,与血管通透性的改变有关。本研究从临床角度出发,探讨这两种因子与OHSS发生发展的关系,以期为明确OHSS的发病机制及临床预测和防治OHSS提供依据。1对象和方法1.1研究主题1.2超声检查出的ohss诊断根据临床症状、体征、超声检查的结果和实验室检查结果,分级依据1989年Golan等提出的OHSS的分级方案。轻度OHSS:特征是腹胀不适,恶心呕吐和(或)腹泻,卵巢增大至5~12cm;中度OHSS:有以上特征并加上超声检查发现腹水;重度OHSS:出现临床证据的腹水和(或)胸水,或呼吸困难,甚至出现血容量变化、血黏滞度增加、凝血异常及肾灌注和肾功能下降。1.3vegf和il-6检测方法收集3组患者肌肉注射hCG日、OPU日及ET日的外周静脉血标本各4ml,置无菌干燥离心管中,立即以3000r/min的速度离心10min,分离出血清,分装后置-20℃冰箱保存。收集患者取卵时的卵泡液3ml,置无菌干燥离心管中,立即以3000r/min的速度离心,5min后吸出上清液,分装后置于-20℃冰箱保存。采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测VEGF和IL-6,试剂盒由晶美生物工程有限公司提供,IL-6试剂盒最低敏感度0.1pg/ml,批内变异系数<9.5%;VEGF试剂盒最低敏感度15pg/ml,批内变异系数<9.5%。1.4统计分析方法所有数据均采用SPSS11.0统计软件包进行统计分析,分析方法包括:两组间均数的比较采用两独立样本t检验,三组均数的比较采用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1三组患者的vegf水平比较2.1.1不同时期血清vegf水平比较各组内患者在IVF周期中血清VEGF呈现周期性变化,在hCG给药日、OPU日和ET日呈升高趋势,但不同时期血清VEGF水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。如表1所示。2.1.2中重度ohss对血清vegf水平的影响中重度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清VEGF水平均高于对照组,但差异无统计学意义,t值分别为:0.887,1.151,1.034,P均>0.05。轻度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清VEGF水平和对照组相比,差异也无统计学意义,t值分别为:0.041,0.318,0.349,P均>0.05。中重度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清VEGF水平均高于轻度OHSS组,但差别均无统计学意义,t值分别为:0.869,0.661,1.612,P均>0.05。3组hCG给药日、OPU日和ET日血清VEGF的水平如表1所示。2.1.3两组vegf水平比较中、重度OHSS组OPU日卵泡液的VEGF水平最高为1965.81pg/ml,最低为751.65pg/ml,平均为(1485.08±442.28)pg/ml;轻度OHSS组最高为1568.29pg/ml,最低为751.65pg/ml,平均为(1027.28±306.82)pg/ml;对照组最高为1693.02pg/ml,最低为342.94pg/ml,平均(1000.13±383.89)pg/ml。t检验结果显示:中、重度OHSS组卵泡液VEGF水平明显高于对照组和轻度OHSS组,差异有统计学意义(t值分别为:3.315,2.221,P均<0.05);轻度OHSS组卵泡液VEGF水平稍高于对照组,但两者相比差异无统计学意义(t=0.162,P>0.05)。2.2三组之间的il-6等级的比较2.2.1不同时期血清il-6水平比较各组内患者的血清IL-6水平在IVF周期中有所波动,由低到高依次为hCG给药日、OPU日和ET日,但不同时期血清IL-6水平的差异无统计学意义(P均>0.05)。如表2所示。2.2.2两组hcg给药日、opu日和et日血清il-6水平比较中重度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清IL-6水平均高于对照组,但差异无统计学意义,t值分别为:0.891,1.099,1.983,P均>0.05。轻度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清IL-6水平和对照组相比,差异也无统计学意义,t值分别为:0.563,0.660,0.922,P均>0.05。中重度OHSS组hCG给药日、OPU日和ET日血清IL-6水平均高于轻度OHSS组,但差异均无统计学意义,t值分别为0.892,0.579,0.600,P均>0.05。三组hCG给药日、OPU日和ET日血清IL-6的水平如表2所示。2.2.3各组opu日卵液il-6表达水平比较中重度OHSS组OPU日卵泡液的IL-6水平最高为97.99pg/ml,最低为11.99pg/ml,平均(48.66±28.69)pg/ml;轻度OHSS组最高为18.41pg/ml,最低为4.83pg/ml,平均为(12.03±6.47)pg/ml;对照组最高为27.31pg/ml,最低为2.24pg/ml,平均(9.13±6.52)pg/ml。t检验结果显示:中重度OHSS组OPU日卵泡液IL-6水平明显高于对照组和轻度OHSS组,差异均有统计学意义(t值分别为4.319,3.880,P均<0.01);轻度OHSS组的OPU日卵泡液IL-6水平稍高于对照组,但两者相比差异无统计学意义(t=0.993,P>0.05)。3不同血清中vegf和il-6水平的预测VEGF和IL-6都是多功能细胞因子,在血管生成、血管通透性改变的生理病理过程中起中心调控作用,还参与调节卵巢内的血管生成,和生殖关系密切。研究表明,OHSS的主要病理生理变化是毛细血管通透性增加,而OHSS的毛细血管通透性增加的重要部位是卵巢,有研究证实卵巢的卵泡膜细胞和颗粒细胞均表达VEGF,VEGF可增加血管的通透性,故有学者认为,VEGF和OHSS的发病机制有关。也有研究表明OHSS活动期卵泡液中的IL-6浓度升高,说明IL-6和OHSS的病理生理有密切联系。本研究发现,中重度OHSS组OPU日卵泡液VEGF和IL-6水平明显高于对照组和轻度OHSS组,差异有统计学意义(P均<0.05),提示卵泡液中高水平的VEGF和IL-6与OHSS的发病有关,并且和OHSS的严重程度有关,为前人的理论提供了依据。前人的研究发现OHSS患者取卵日卵泡液中IL-6水平显著升高,认为取卵日卵泡液中的IL-6水平可作为高危者OHSS早期发展的预测因子,本研究也得出了相似的结论。我们认为,OPU日卵泡液的VEGF和IL-6水平可作为预测OHSS发生的指标,而且,卵泡液中的VEGF和IL-6水平较高,易于检测,所以,检测OPU日卵泡液中VEGF和IL-6水平可以在临床工作中推广。此外,本研究中轻度OHSS组的OPU日卵泡液VEGF和IL-6水平稍高于对照组,但两者相比差异无统计学意义(P>0.05),原因可能和样本量较小有关,还有待扩大研究的病例数,以进一步研究轻度OHSS卵泡液中VEGF和IL-6的水平。本研究在分别对3组间hCG给药日、OPU日及ET日血清VEGF和IL-6的比较中发现,中重度OHSS组在这3天的血清VEGF和IL-6水平均高于轻度OHSS组和对照组,但差异无统计学意义(P均>0.05),故我们认为测定血清VEGF和IL-6水平不足以预测OHSS发展的严重程度,这与Enskog等的研究结果一致,但不支持Ludwig等的研究,这可能与检测方法、患者种族差异有关,并且机体的其他诸多因素也可能影响血清中的VEGF和IL-6水平。现在临床常用的预测OHSS的指标是hCG肌肉注射日血清E2值和获卵数,但有些OHSS患者的hCG给药日血清E2水平并不高,相反,一些在hCG给药日血清E2水平很高的妇女却不发生OHSS,也有一些妇女取卵很多却不发生OHSS,这说明hCG肌肉注射日血清E2值和获卵数不能精确地预测OHSS的发生。故我们认为,把OPU日卵泡液VEGF水平及IL-6水平与hCG肌肉注射日血清E2值和获卵数结合起来,则预测OHSS的发生及严重程度将会更准确。研究对象为2002年3月至2003年2月在本生殖中心因不孕症接受ART治疗的患者45例,根据有无并发OHSS以及发生OHSS的轻重程度,将这些患者分为3组。中、重度OHSS组:共10例,平均年龄(31.90±4.33)岁,不孕年限平均(6.85±4.41)年,体质量指数平均(22.35±1.07)kg/m2。轻度OHSS组:共6例,平均年龄(30.67±3.27)岁