超高效液相色谱法同时测定洗发类化妆品中3种去屑剂的含量

超高效液相色谱法同时测定洗发类化妆品中3种去屑剂的含量

香波工业起步较晚。随着国家经济的快速发展，香波工业发展极为迅速。香波具有去屑和缓解作用。去屑剂的种类和含量不仅决定去屑效果优劣,而且对消费者的健康也有一定的影响。水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑是市场上去屑香波及其他去屑产品的主要去屑剂。《化妆品卫生规范》规定去屑化妆品中水杨酸的最大允许量为3%,氯咪巴唑为0.5%,而酮康唑为禁用成分。因此建立洗发用产品中去屑剂的检测方法,对维护消费者的健康和权益具有重要意义。已有报道用高效液相色谱法测定去屑香波中水杨酸、酮康唑,而尚无采用超高效液相色谱法(UPLC)同时测定3种去屑剂的相关报道。本工作采用了超高效液相色谱法同时测定洗发类化妆品中水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑3种去屑剂的含量。1试验部分1.1标准储备溶液和缓冲混合溶液配制WatersACQUITYUPLC超高效液相色谱仪。混合标准溶液:分别称取水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑标准物质0.05,0.05,0.1g,各加入乙腈-甲醇(95+5)溶液85mL,超声,待溶解完全后转移至100mL容量瓶中,用乙腈-甲醇(95+5)溶液定容,配成标准储备溶液,再用乙腈-甲醇(95+5)溶液配成混合标准系列溶液。缓冲混合溶液:10mmol·L-1磷酸二氢钾和0.5mmol·L-1乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)溶液混合,用磷酸调至pH4.0。乙腈、甲醇为色谱纯,磷酸为优级纯,其余试剂为分析纯。1.2流动相、流动相的选择ACQUITYUPLC-BEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),流动相为乙腈、甲醇、pH4.0的缓冲混合溶液以体积比57.5比8.5比34混合,流速0.3mL·min-1,二极管阵列检测器,检测波长为230nm,单运行时间2min,柱温25℃,进样量1.0μL。1.3超声提取-过滤称取香波样品0.5g于50mL具塞比色管中,加入乙腈-甲醇(95+5)溶液至刻度,振摇,超声提取30~40min。经0.45μm滤膜过滤,滤液作为待测样液。按仪器工作条件对香波样品中水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑进行测定。2结果与讨论2.1色度条件的选择2.1.1不同的色谱条件对分离效果的影响目前UPLC色谱柱的键合相主要有C18及C8(直链烷烃)、ShieldRP18(内嵌有氨基甲酸酯极性基团,表现出对氢键供体的特殊选择性)、Phenyl(苯基连接在C6直链的硅甲基官能团上)和HILIC(硅胶)。试验分别考察了这5种具有不同选择性的UPLC色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),对3种去屑剂化合物的分离效果。结果表明:3种去屑剂在ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱上均获得了最为理想的分离效果。2.1.2动相条件下3种去屑剂的分离不同的流动相经常呈现出显著的分离选择性和洗脱强度的差异,分别以甲醇-水、乙腈-水、乙腈-甲醇-水等溶液作流动相进行了试验。选择乙腈-水溶液为流动相时,其体积比不同,3种去屑剂的分离情况有很大差异。乙腈-水溶液的体积比为70∶30时,在2min内水杨酸、氯咪巴唑出峰,酮康唑未出峰;当体积比为60∶40时,2min内3种物质均出峰,但分离不完全。这主要是因为乙腈极性较大,几种组分共同出峰。因此,在流动相中加入一定比例的甲醇,减小流动相的极性,可实现3种去屑剂完全分离。试验表明:流动相为乙腈、甲醇、缓冲混合溶液以体积比57.5比8.5比34时,3种去屑剂可完全分离。2.1.3色谱峰间分离度的选择试验发现:色谱柱的柱温对于水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑3种去屑剂色谱峰之间的分离度有显著的影响。试验在20~50℃等柱温条件下进行试验,考察不同柱温下水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑之间的分离效果,结果表明:在25℃柱温下分离效果最佳。2.2唑的保留时间3种去屑剂标准色谱图见图1,水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑的保留时间分别为1.009,1.162,1.537min。该方法各标样的保留时间有较好的重现性,可结合保留时间(±5%)和紫外光谱对检出峰进行识别。2.3线性及关系数在色谱条件下,测定不同浓度的混合标准溶液,以3种去屑剂的质量浓度(x)对其峰面积(y)绘制工作曲线,3种去屑剂组分的线性回归方程和相关系数结果见表1。以3倍的信噪比进行计算,水杨酸、酮康唑、氯咪唑的检出限分别为0.016,0.027,0.037mg·L-1。2.4加标回收率试验在0.5g去屑类洗发样品中,加水杨酸、酮康唑、氯咪巴唑混合标准溶液,按试验方法进行样品处理,按仪器工作条件进行测定,加标回收率和相对标准偏差结果见表2。2.5基质对不同去屑剂的干扰按仪器工作条件对超市和药店销售的28种去屑香波和药品进行测定,有20种样品含有3种去屑剂中的一种或几种组分,检出率为71%,实际阳性样品分离色谱图如图2所示。由图2可见:样品经前处理后,基质对3种去屑剂的干扰较少。其中4种样品含水杨酸,占14%;8种样品含氯咪巴唑,占28%;6种样品含酮康唑(去屑药品),占10