病理学在医学科研中的应用

病理学在医学科研中的应用广西医科大学病理学教研室马韵WhatdoesPathologymeans?GUANGXIMEDICALUNIVERSITY第一部分病理学的研究方法

HOW?第二部分病理学的应用范围

WHERE?GUANGXIMEDICALUNIVERSITY尸体剖检autopsy,goldstandard

活体组织检查biopsy,frozensections.细胞学检查cytology（一）人体病理学的诊断和研究方法（二）实验病理学的研究方法动物实验animalexperiment组织和细胞培养tissue&cellculture第一部分病理学的研究方法

GUANGXIMEDICALUNIVERSITY病理学的形态观察方法和新技术大体观察组织学和细胞学观察组织化学和细胞化学免疫组织化学超微结构分子生物学技术流式细胞术计算机图象分析技术qualitativequantitativeGUANGXIMEDICALUNIVERSITY大体观察,grossly病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY

病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY组织和细胞学观察,microscopically病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY组织化学和细胞化学HistochemistryATPasehistochemistry,pH4.3病理学的形态观察方法和新技术H&EGUANGXIMEDICALUNIVERSITY特异性放大性可视性是根据抗体和抗原能特异性结合的原理，通过化学反应使标记于结合后的特异性抗体上的显色剂，如酶、金属离子、同位素、荧光素等，显示一定的颜色，并借助显微镜

观察其颜色变化，从而在组织水平确定目标的化学成分或性质的组化技术。病理学的形态观察方法和新技术免疫组织化学,ImmunohistochemistryGUANGXIMEDICALUNIVERSITY免疫荧光技术（Coons,1941年）异硫氰酸荧光黄（FITC，1958），罗达明B200（RB200，），SITS，兰色应用肾炎的分型：区分颗粒状荧光和线性荧光——免疫复合物肾炎和抗基底膜肾炎。免疫性疾病的病理辅助诊断：SLE病理学的形态观察方法和新技术免疫组织化学GUANGXIMEDICALUNIVERSITY免疫酶技术：Nakane,Avrameas,1960s.以酶做标记物，与抗原或抗体结合，借助于显微镜观察酶催化底物产生的不溶性颜色产物。不需特殊设备，较易推广定位准确，对比度好，结果可以长期保存可以复染，组织结构清楚病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITYImmunohistochemistry(IHC)–AntibodieswithlabelsPlasmacellsimmunoperoxidaseimmunofluorescenceGoodmorphologyonParaffinsections病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITYAntigenRetrievalPCNA抗原修复GUANGXIMEDICALUNIVERSITY分子生物学技术—原位杂交病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITYChromosome‘painting’Usingthesemethodswecanmakeanewclassificationoflymphomas分子生物学技术—荧光原位杂交病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY①双色分离探针

正常为2个分开的黄色融合信号。GUANGXIMEDICALUNIVERSITYGUANGXIMEDICALUNIVERSITY

异常信号双色分离探针GUANGXIMEDICALUNIVERSITY②双色融合易位探针

正常为2个分开的红色信号及2个分开的绿色信号。GUANGXIMEDICALUNIVERSITY

异常信号的类型是2个黄色融合信号＋1个红色信号＋1个绿色信号。

双色融合易位探针GUANGXIMEDICALUNIVERSITY分子生物学技术—原位杂交和原位PCR病理学的形态观察方法和新技术HPVDNA&CKGUANGXIMEDICALUNIVERSITY组织芯片病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY超微结构—电子显微镜病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY图象分析技术AnalyticalMorphologyisacontemporarysciencedealingwiththeanalysisofshape,sizeandcolorarrangementofcellandtissuecomponentsbymeansofavarietyofanalyticalmaneuvers.Usingthesenewmethods,particularcellularcomponentsthatwouldotherwiseremaininvisible,suchaspeptides,ornucleotidesequences,arehighlightedbyvisiblemarkersthroughchemical,physical,immunologicalormolecularbiologicalThesemethodsincludeimmunohistochemistry,insituhybridization,insituPCR,antigenretrieval,imageanalysis,confocalmicroscopy,andthelike.病理学的形态观察方法和新技术GUANGXIMEDICALUNIVERSITY流式细胞术病理学的形态观察方法和新技术FlowCytometryGUANGXIMEDICALUNIVERSITY第二部分病理学的应用范围

病因学研究发病学的研究基本病理变化—揭示疾病的本质、进行病变诊断、分类、分期以及预后判断药物选择与疗效观察新药开发GUANGXIMEDICALUNIVERSITY病因学分析病原体的确定提示性病变特殊染色免疫组化染色原位杂交或原位PCR病理学的应用范围GUANGXIMEDICALUNIVERSITYTheNobelPrizeinPhysiologyorMedicine2005GUANGXIMEDICALUNIVERSITY发病学分析病理学的应用范围慢性阻塞性肺气肿GUANGXIMEDICALUNIVERSITY发病学分析病理学的应用范围SARSGUANGXIMEDICALUNIVERSITY发病学分析病理学的应用范围GUANGXIMEDICALUNIVERSITY发病学分析病理学的应用范围滤泡性淋巴瘤GUANGXIMEDICALUNIVERSITYBcl-2-InhibitsapoptosisReactiveFollicles–negativeNeoplasticFollicles–positiveT(14;18)滤泡性淋巴瘤GUANGXIMEDICALUNIVERSITY滤泡性淋巴瘤GUANGXIMEDICALUNIVERSITYB细胞淋巴瘤---Burkitt淋巴瘤GUANGXIMEDICALUNIVERSITYB细胞淋巴瘤---Burkitt淋巴瘤细胞遗传学：特征性染色体易位t(8;14)GUANGXIMEDICALUNIVERSITY

异常信号的类型是2个黄色融合信号＋1个红色信号＋1个绿色信号。

双色融合易位探针GUANGXIMEDICALUNIVERSITY基本病理变化—疾病的本质、病变分期、预后判断恶性肿瘤的TNM分期组织类型间质反应病理学的应用范围GUANGXIMEDICALUNIVERSITYFromtheautopsyHODGKIN’SDiseaseHodgkin’sDiseasedefinedbyautopsyDiagnosisin1832GUANGXIMEDICALUNIVERSITYCell70yearslaterbythemicroscopeGUANGXIMEDICALUNIVERSITYHallmarkofHodgkinLymphoma–Binucleated(mirrorednucleus)R-SCellsCD30CD15EBV-EBEREBV-LMPGUANGXIMEDICALUNIVERSITYBCellOriginofR-SCells–ConfirmedbyMicrodissectionandPCRforIgGeneRearrangement

GUANGXIMEDICALUNIVERSITYDuke’stype 5-yearsurvival% StageofneoplasmA 100 LimitedtomucosaB1 67 ExtendingintomuscularispropriabutnotpenetratingthroughitwithuninvolvednodesB2 54 ThroughentireMPwithuninvolvednodesC1 43 LimitedtothewallwithinvolvednodesC2 22 ThroughalllayersofthewallwithinvolvedND verylowRemoteorgansmetastasis Duke’sStagingofcoloncancer病理学的应用范围GUANGXIMEDICALUNIVERSITYCD20H&E弥漫性大B细胞淋巴瘤GUANGXIMEDICALUNIVERSITYRosenwaldetalNEJM2002TheUseofMolecularProfilingtoPredictSurvivalAfterChemotherapyforDiffuseLargeBcellLymphomaGUANGXIMEDICALUNIVERSITYRosenwaldetalNEJM2002TheUseofMolecularProfilingtoPredictSurvivalAfterChemotherapyforDiffuseLargeBcellLymphomaGUANGXIMEDICALUNIV