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20140626解。从哪里说起呢,刚开始,我准备做一个qPCR验室准备做一个qPCR了。他们都说师兄只会瞎侃,但我觉得神师兄是仅次于莫愁师姐的,特别有智慧且靠谱的一个。聊着聊着,师兄就问我:小林子啊,你为啥要做SYBRgreen染料法的文章介绍过,SYBRgreen来做qPCR的话,是会有很严重问题的。因为SYBRgreen会抑制PCR反应,得出来的结果没有探针来的效果好,其实价于是一周后,我迷迷瞪瞪地就设计Taqman的时候,师兄正好又顺路来了一趟实验室。聊着聊着他就说:小林子啊,你为啥要检测mRNA呢?检测蛋白表达才是王道嘛!mRNA表蛋白表达会降低呢!因为如果蛋白的泛素化停滞,蛋白就会累积;又或者蛋白的磷酸化不断激活,也会导致蛋白作用的变化。所以用Taqman如用WesternBlot来得直接,直接检测蛋白表达、磷酸化、泛素化的变于是一周后,我忽忽悠悠地就查了各种抗体的供应商,但刚要下单的时候,师兄又来了。他看到我定抗体,要做Western。于是又开始跟我聊了起来:我说小林子啊,你要研究基因表达变化,干嘛不就做一张芯片呢?一下子就出来全部基因组里的表达变化,多好!想要啥就有啥,里面2w随你挑!跟这个基因表达相关的上下游通路,啥都一清二楚,绝对是居家旅片、miRNA芯片、LNCRNA芯片,刚询完价,你猜的没错,神师兄又出现1、SYBRGreen是会抑制PCR反应,但是是在高浓度
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