免疫学检查在传染病中的应用课件

临床免疫学检验免疫学检验的常用技术临床免疫学检验1免疫学检验的常用技术免疫比浊技术生物素与链酶亲和素的应用技术免疫电泳技术抗体提取纯化技术放射免疫分析技术免疫荧光测定技术化学发光免疫分析技术免疫印迹技术流式细胞术免疫学检验的常用技术2金标记酶免分析技术金标记免疫分析技术也称免疫胶体金技术,利用硝酸纤维素(NC)膜等为固相载体,使金标记的抗原或抗体与特异配体的反应在膜上进行,建立了快速的金标记免疫渗滤技术和金标记免疫层析技术,并在传染病、心血管病、湿病、自身免疫病的免疫学检测中广泛应用金标记酶免分析技术3金标记酶免分析技术原理:将滤金酸(HAuC4)用还原法制成定直径的金溶胶颗粒(胶体金),标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或抗体,用于免疫印迹、免疫渗滤、免疫层析试验。金标记免疫层析是利用NC膜条状纤维的毛细管作用,是样品在泳动中与金标记物及包被在NC膜上的抗原或抗体结合,出现呈色的性信金标记酶免分析技术4酶免疫技术酶和酶作用的底物:1.辣根过氧化物酶(HRP),常用底物为邻苯二胺(OPD),四甲基联苯胺(TMB)和ABIS2碱性磷酸酶(AP),多采用对硝基苯磷酸指为底物。3其他的酶:有葡萄糖氧化酶、β-一半乳糖昔酶和脲酶等。酶免疫技术5酶联免疫吸附试验六原理:酶联免疫吸附技术是免疫酶技术中固相酶免疫测定的一种技术。基本原理是将待测抗原或抗体先固定于固相载体表面,再用酶标记的抗原或抗体与已被固定的相应抗体或抗原发生特异性反应,加入酶底物及色原后呈色,呈色程度用吸光度(A)值表示,所测A值与传测机体或抗原的水平呈相关关系酶联免疫吸附试验6酶联免疫吸附试坠1.接法:用于检测样本中特异性抗体将已知特异性抗原包被于聚苯乙烯板微孔成固相抗原;洗弃未结合的抗原;加待检样本若其中含有特异性抗体则与固相抗原结合形成抗原-抗体复合物;洗弃未反应的部分,加标记抗抗体(一般为标记抗人IgG或葡萄球A蛋白),使在固相载体上形成抗原-待检抗徠标记抗体复合物;洗弃未反应的部分,加酶底物及色原呈色,在一定波长下测吸光度A值判定待测抗体的有无和水平酶联免疫吸附试坠7酶联免疫吸附试验2.争法:用于检测待检样本中未知抗原或抗体测定抗原(抗体)时用已知抗体(抗原)包被固相载体,然后同步加入含有待测抗原(抗体)的样本和酶标记抗原(抗体),使待测抗原(抗体与酶标记抗原(抗体)竞争结合在固相载体上的体(抗原);洗板;加酶底物及色原呈色测溶液抗原(抗体)量越多,则被结合的酶标抗原飞抗体)量越少,呈色越浅星色深浅与测抗原抗体)的量成反比酶联免疫吸附试验8酶联免疫吸附试验或双抗原夹心法双抗体夹心法:用于检测相对分子质量较大的蛋白质抗原先将已知特异性抗体包被于固相载体上,加待测样本,若其中有相应的抗原则与固相抗体特异性结合;洗板后加入酶标记特异性抗体,使在固相载体上形成包被抗体-待测抗原标记抗体复合物;洗板;加酶底物及色原呈色。抗原或抗体平与所测吸光度(A)值呈正相关。双抗原夹心法:用包被抗原和酶标记抗原检测样本中的酶联免疫吸附试验9酶联免疫吸附试验4.捕获法5.生物素与亲和素ELISA(ABC-ELSA酶联免疫吸附试验10免疫学检查在传染病中的应用课件11免疫学检查在传染病中的应用课件12免疫学检查在传染病中的应用课件13免疫学检查在传染病中的应用课件14免疫学检查在传染病中的应用课件15免疫学检查在传染病中的应用课件16免疫学检查在传染病中的应用课件17免疫学检查在传染病中的应用课件18免疫学检查在传染病中的应用课件19免疫学检查在传染病中的应用课件20免疫学检查在传染病中的应用课件21免疫学检查在传染病中的应用课件22免疫学检查在传染病中的应用课件23免疫学检查在传染病中的应用课件24免疫学检查在传染病中的应用课件25免疫学检查在传染病中的应用课件26免疫学检查在传染病中的应用课件27免疫学检查在传染病中的应用课件28免疫学检查在传染病中的应用课件29免疫学检查在传染病中的应用课件30免疫学检查在传染病中的应用课件31免疫学检查在传染病中的应用课件32免疫学检查在传染病中的应用课件33免疫学检查在传染病中的应用课件34免疫学检查在传染病中的应用课件35免疫学检查在传染病中的应用课件36免疫学检查在传染病中的应用课件37免疫学检查在传染病中的应用