标准解读

《GB/T 43163-2023 苜蓿黄萎病菌溯源检测方法》是一项国家标准，主要针对苜蓿黄萎病菌（Verticillium albo-atrum 和 Verticillium dahliae）的检测与追溯。该标准适用于农业领域中对苜蓿及其制品进行黄萎病菌污染情况的监测与控制，通过科学的方法和技术手段来识别、追踪这些病原体的存在。

在内容上，本标准详细规定了从样品采集到实验室分析的一系列操作流程。首先，在样品准备阶段，明确了不同类型样本（如植物组织、土壤等）的具体采集要求；其次，对于样品处理部分，则介绍了如何正确地保存和运输采集到的材料以确保其完整性不受破坏。此外，还特别强调了实验室安全措施的重要性，包括个人防护装备的选择使用以及废弃物处置办法等。

关于检测方法，《GB/T 43163-2023》推荐了几种常用的分子生物学技术，比如PCR扩增结合凝胶电泳法、实时荧光定量PCR(qPCR)等，用于特异性地识别目标DNA序列。同时，也提供了相应的引物设计原则及反应条件设置指南，帮助研究人员根据实际情况调整实验参数以获得最佳结果。另外，还涉及到了数据分析环节，指导用户如何准确解读实验数据，并据此判断样品是否受到苜蓿黄萎病菌感染。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2023-09-07 颁布
  • 2024-04-01 实施
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GB/T 43163-2023苜蓿黄萎病菌溯源检测方法_第1页
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文档简介

ICS6502020

CCSB.16.

中华人民共和国国家标准

GB/T43163—2023

苜蓿黄萎病菌溯源检测方法

TraceabilitydetectionofVerticilliumalbo-atrumReinkeetBerthold

2023-09-07发布2024-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T43163—2023

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本文件起草单位中华人民共和国深圳海关深圳市检验检疫科学研究院

:、。

本文件主要起草人高瑞芳章桂明王颖黄河清向才玉

:、、、、。

Ⅰ

GB/T43163—2023

苜蓿黄萎病菌溯源检测方法

1范围

本文件描述了应用基因片段和生物信息学分析方法对苜蓿黄萎病菌进行溯源检测的方法

。

本文件适用于苜蓿黄萎病菌相关寄主植物材料中携带的苜蓿黄萎病菌的溯源检测

。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件

。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

邻接法neighbor-joining

基于最小演化准则的迭代聚类方法

。

4方法原理

苜蓿黄萎病菌拉丁名Verticilliumalboatrum基本信息见附录溯源是利

,-ReinkeetBerthold,A。

用对物种有进化和溯源价值的基因片段将核酸序列信息与来源地寄主等来源信息进行相关性归类

、。

检测过程是应用生物信息学的分析手段筛选有效区分种内差异并且有效归类的基因片段或分子标

记获得这些基因片段或分子标记的核酸序列应用统计学手段完成核酸序列与来源地寄主信息的主

,,、

成分分析完成不同来源地寄主个体的群体分子系统进化关系和群体结构分析基于基因序列的相似

,、,

度和重复率等构建网络进化图

,。

5仪器和试剂

51仪器与试验用具

.

仪器恒温恒湿培养箱超净工作台低温冰箱扩增仪冷冻离心机核酸蛋白分析仪

:、、-20℃、PCR、、、

电泳仪凝胶成像系统高压灭菌锅

、、。

试验用具解剖刀离心管镊子移液器冻存管培养皿酒精灯接种针

:、、、、、、、。

52试剂

.

试剂酒精十六烷基三甲基溴化铵Taq酶Taq缓冲液标

:70%、(CTAB)、PCR、PCR、dNTP、DNA

记无菌超纯水

、。

马铃薯葡萄糖琼脂培养基去皮土豆切成小方块加入无菌水煮沸

(PDA):200g,1000mL,

四层纱布过滤得到滤液滤液中加入葡萄糖琼脂粉加热溶解后将溶液定容至

15min,,18g

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