病原生物学-病毒感染的检查方法与防治原则

病毒感染的检查方法

与防治原则

第24章

教学目的与要求掌握内容病毒学诊断：标本采集和送检；病毒的分离培养；病毒血清学诊断：常用的血清学诊断方法。第一节病毒感染的检查方法

第二节病毒感染的特异性预防第三节病毒感染的治疗★病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体

病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶

电镜直接观察光镜检查包涵体分离培养★★一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：1.急性期样本2.标本用“双抗”或两性霉素B处理

3.

低温保存，尽快送检4.

血清学诊断采双份血清★二、病毒的分离与鉴定一般程序：标本无菌处理动物接种鸡胚培养细胞培养指标阳性指标阴性病毒鉴定盲传2～3代指标阴性病毒阴性★（一）病毒的分离培养

动物接种（animalinoculation）

鸡胚接种（egginoculation）

细胞培养（cell

culture）

二、病毒的分离与鉴定★细胞培养

单层细胞培养（monolayercellculture）

分类

悬浮细胞培养（suspendedcellculture）

原代细胞（primarycell）细胞种类二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落(1)细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)(2)红细胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋红细胞表面HA受体

(3)干扰现象（interference）

(4)细胞代谢改变

（二）病毒鉴定1.病毒形态学鉴定2.病毒血清学鉴定3.病毒分子生物学鉴定二、病毒的分离与鉴定（三）病毒数量与感染性测定1.血凝试验：病毒总量（活病毒＋死病毒）2.蚀斑形成试验

（plaqueformationtest）

3.50％组织细胞感染量

（50％tissueculture

infectiousdose,TCID50）感染性病毒量二、病毒的分离与鉴定（一）形态学检查：

电镜：病毒颗粒；光镜：包涵体三、病毒感染的诊断（二）病毒成分检测：蛋白抗原、核酸（三）血清学诊断★应用：①采取标本分离病毒为时已晚②目前尚无分离此病毒的方法或难以分离的病毒③为证实所分离的病毒的临床意义④进行血清流行病学调查等1.中和试验（neutralizingtest）病毒＋中和抗体

病毒失去感染性

特点：特异性高，抗体维持时间长应用：人群免疫情况的调查临床诊断少用★2.血凝抑制试验（hemagglutination

inhibitiontest）—正粘病毒型与亚型鉴定

病毒＋鸡红细胞＝凝集（血凝试验）

病毒＋特异性抗体＋鸡红细胞＝不凝集

（血凝抑制试验）

★特点：特异性高，简单

应用：鉴定病毒种、型、亚型3.

IgM

特点：特异性低，抗体出现早，消失快

应用：近期感染指标。★三、病毒感染的血清学诊断第一节病毒感染的检查

第二节病毒感染的特异性预防第三节病毒感染的治疗灭活疫苗（inactivatedvaccine）减毒活疫苗（attenuatedvaccine）亚单位疫苗（subunitvaccine）基因工程疫苗（geneticallyengineeringvaccine)重组载体疫苗（recombinantcarriervaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）一、人工主动免疫常用生物制品二、人工被动免疫常用生物制品

免疫球蛋白

血清丙种球蛋白

细胞免疫制剂

IFN-α、β、γ细胞因子IL-2、IL-6、IL-12

TNF、CSF

淋巴因子激活的杀伤细胞

——LAK细胞

第一节病毒感染的检查

第二节病毒感染的特异性预防第三节病毒感染的治疗病毒穿入脱壳核酸复制、转录及蛋白质合成装配吸附释放药物药物药物药物

核苷类药物

非核苷类反转录酶抑制剂蛋白酶抑制剂其他抗病毒