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文档简介
医学微生物学实验三微生物的代谢产物及致病作用分解代谢产物—生化反应糖发酵试验H2S产生试验接种生化管、结果示教靛基质试验合成代谢产物内毒素的致病作用:2只家兔/班细菌溶血、产色素现象---示教细菌的分解代谢细菌的生化反应:原理:不同细菌具有不同的酶,对营养物质的分解能力亦不同,因而代谢产物有别。通过检测细菌的代谢作用和代谢产物,借以鉴别细菌种类的生化方法。常见的生化反应:
1、对糖的分解代谢:
糖发酵试验、甲基红试验、VP试验
2、对蛋白质的分解代谢:
靛基质试验、H2S试验
3、其他:尿素酶试验、枸橼酸盐利用试验糖发酵试验
乳糖乳糖渗透酶葡萄糖酸类物质半乳糖苷酶
肠道致病菌多数不分解乳糖,如伤寒沙门菌、痢疾志贺菌。肠道非致病菌可分解多种糖类,如大肠埃希菌有助于鉴别肠道杆菌培养基:葡萄糖、乳糖培养基指示剂为溴甲酚紫结果:产酸:分解糖(苷/醇)产酸,培养基变黄色“+”
产酸产气:培养基变黄且出现气泡或裂隙“+”
不分解:“-”-+-+
靛基质(吲哚,Indol)试验
原理:细菌分解培养基中的色氨酸→靛基质(吲哚)→加入对二甲基氨基苯甲醛→玫瑰吲哚(红色)培养基:蛋白胨培养基结果:上层玫瑰红色“+”
硫化氢试验原理:细菌分解含硫氨基酸
(胱aa、半胱aa)生成H2S,遇Pb2+或Fe2+形成黑色PbS或FeS沉淀培养基:硫化氢培养基结果:培养基变黑“+”+
-
IMViC试验
大肠埃希菌++--
产气肠杆菌--++
细菌的合成代谢产物热原质、毒素与侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素1、溶血素
有的细菌能产生溶血素,使血平板中的红细胞溶解,在菌落周围出现溶血环。观察:金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌在血平板上的溶血环水溶性:色素可扩散至培养基中
如:铜绿假单胞菌的色素脂溶性:色素只局限在菌落,大多数细菌。
如:金黄色葡萄球菌的色素2、细菌菌落的色素铜绿各种不同色素一、操作1.糖发酵试验:葡萄糖、乳糖(各1支/人)接种菌种:大肠或沙门菌2.靛基质试验:蛋白胨(1支/人)接种菌种:大肠或沙门菌3.硫化氢试验:硫化氢(1支/人)接种菌种:大肠或沙门菌4.细菌的鞭毛变异现象观察
接种变形杆菌至SS平板和普通琼脂平板(点种)5.平板划线:血平板(接种金葡或铜绿)1个/人,普平(接种金葡或铜绿)1个/人二、示教1.菌落色素、溶血现象观察:金葡、铜绿在血平板
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