茶叶中咖啡因的提取分离和鉴定

《天然药物化学》实验教学大纲（供四年制药学本科药物制剂、药品检验专业使用）前言《天然药物化学实验》是天然药物化学课程的重要组成部分。其主要目的是：通过实验，检验在课堂上所学的理论知识。使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。通过实验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面：要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶法等。掌握纸色谱、薄层色谱的原理和基本操作。（二）鉴定方面（化学方法）：①掌握一般定性反应在鉴定中的用，②掌握重要衍生物（乙酰化物等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。本大纲适用于四年制本科药物制剂、药品检验专业使用。现将大纲使用中有关问题说明如下：为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解,教学内容与教学要求对应，并统一标示（核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示）便于学生重点学习。教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。总教学参考学时为36学时。使用教材：《天然药物化学实验指导》，人民卫生出版社，裴月湖主编，第一版，2006年。II正文实验一芦丁的提取、分离与鉴定一教学目的学习碱提酸沉法提取黄酮类化合物的原理及方法；掌握化学鉴别、苷的水解；了解其衍生物制备和薄层层析、纸色谱等方法手段在苷类结构鉴定上的作用；了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。二教学要求：（一） 掌握碱提酸沉法提取黄酮类化合物的方法原理。（二） 掌握化学方法鉴别苷元、苷及糖…苷的水解。（三） 了解衍生物制备和薄层层析等方法手段在苷类结构鉴定上的作用。一.（四） 了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。三教学内容（一） 称取槐花米粗粉20g，置于500ml烧杯中，加入沸水250ml及硼砂1g，在搅拌下加石灰孚L调至pH8〜9保持微沸30分钟，不断补充蒸发掉的水分，以保持pH8〜9，趁热用尼龙布拧挤过滤，滤渣再加100ml沸水，再提取一次。合并滤液，在60°C〜70°C用浓盐酸调pH4〜5，放置过夜，抽滤，沉淀用水洗至中性，置空气中晾干得粗品芦丁。（二） 槐花米中芦丁成分的预试：取芦丁3〜4mg，加乙醇5〜6ml使其溶解，分成三份作下述试验：盐酸-镁粉反应。ZroCy柠檬酸反应。Molish反应。（三）芦丁的水解、乙酰化及糖与苷元的鉴定。实验二粉防己生物碱的提取分离与鉴定一教学目的通过对汉防己中几种生物碱的提取、分离、纯化和鉴定，要求掌握一定的提取分离和鉴定的知识和技能，巩固已有知识。二教学要求（一） 掌握生物碱的一般提取方法和鉴定方法。（二） 掌握生物碱的分离、纯化的一般方法。（三） 熟悉连续回流操作，注意低沸点乙醚的使用安全。三教学内容（一） 预试汉防己中的生物碱成分。（二） 亲酯性叔胺生物碱的提取（渗滤法），将渗滤液用新鲜的石灰乳调至pH9〜10，充分静置，小心倾掉部分上清液后，抽滤得泥黄色固体。将此固体与净沙拌和均匀，烘干置连续提取器中，以乙酸乙酯为溶剂进行提取。（三） 精制：初提物用95%的乙醇加热回流溶解、制成饱和溶液，将其倾入水溶液中，使其沉淀。抽滤得亲酯性叔胺总碱。（四） （冷甲苯法）：将亲酯性叔胺总碱称量后，置25ml锥形瓶中，加五倍量的甲苯，搅拌促溶至不溶物量不再减少，过滤，用少量甲苯洗涤不溶物后，合并甲苯溶液，并蒸馏浓缩至干，残留物用丙酮重结晶，得细棒状晶体I，甲苯不溶物用丙酮重结晶后，得颗粒状晶体II。（五） 鉴定：①测定熔点②薄层色谱实验三茶叶中咖啡因的提取一教学目的结合理论教材，复习、巩固生物碱的理化性质，熟悉从植物中提取生物碱的一般原理和方法。初步学会利用文献资料设计科研项目的具体实施方案。通过对茶叶中咖啡因的提取掌握升华法的基本操作。二教学要求（一） 掌握生物碱的一般提取、分离以及鉴定的方法。（二） 掌握升华法的基本操作。（三） 初步学会利用文献资料设计科研项目的具体实施方案。三教学内容（一） 批阅学生设计的实验方案。归纳总结出简便合理、易行的方案。（二） 预试茶叶的生物碱成分。（三） 提取（方法一）：在250ml烧杯中放10g茶叶和150ml热水，煮沸20min，，滤出茶渣，茶汁于蒸发皿中浓缩至5ml,拌入石灰粉，干燥。盖上一张刺有小孔的滤纸，罩上玻璃漏斗，在电热套上小心加热使咖啡因升华，当滤纸上出现白色毛状结晶时，停止加热，收集滤纸上及漏斗内壁的咖啡因。（四） 鉴定：①测定熔点②薄层色谱Ill教学组织与方法一实施机构：由药学系药物化学教研室执行。二组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。三教学方法：1.实验教学：实验分组（16〜20人/实验室）