总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂比色法)

简介：

胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，分子式C27H46O，分子量为3860.65。胆固醇广泛存在于动物体内，其中脑、神经组织最丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。用酶学方法测定总胆固醇(TotalCholesterol，TC)葡萄糖是生化检测中的常用方法，其特点是：1、灵敏度、准确度、周密度均高；2、使用温顺的反响条件；3、操作简便；4、适用于自动。Leagene总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂比色法)又称胆固醇氧化酶法或胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法等，血液中的胆固醇约1/3为游离胆固醇，2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯，后者被CEH水解为游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾(POD4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反响，生成红色醌亚胺色素(Trinder反响)。分光光度计在进展比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。组成：

编号 TC1213名称 100T

Storage试剂(A):COD-PAP工作液

Good”sbuffer胆固醇氧化酶胆固醇激酶过氧化物酶4-氨基安替比林稳定剂

2×50ml -20℃避光试剂(B):TC(5mmol/L)使用说明书自备材料：1ml-20℃避光11、生理盐水或PBS2、离心管、小试管或96孔板3、水浴锅或恒温箱4、分光光度计或酶标仪5、全自动或半自动生化操作步骤(仅供参考)：1、样本处理：.①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。②细胞样本：a、取适量的细胞(一般推举>106以上)，离心，弃上清，留取沉淀。bPBSc、参与PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声裂开细胞，功率300W，间隔30s，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不行离心，待用。亦可用TritonX-100冰浴，制备好的裂解液不行离心，待用。③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)，参与生理盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。2、分光光度计(1mlTCddH2ddH2O(μl)TC标准(5mmol/L)(μl)待测样本(μl)COD-PAP(ml)空白管10标准管待测管1010②充分混匀,37℃水浴中孵育。③分光光度计测定吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。3、一般分光光度计(2ml)TCddH2ddH2O(μl)TC标准(5mmol/L)(μl)待测样本(μl)COD-PAP(ml)空白管20标准管待测管2020②充分混匀,37℃水浴中孵育。③分光光度计测定吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。4、酶标仪TC空白孔3空白孔3标准孔待测孔ddH2O(μl)TC(5mmol/L)(μl)3.待测样本(μl)COD-PAP待测样本(μl)COD-PAP(μl)3300300300②充分混匀,水浴中孵育。③酶标仪测定吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。5TC①按下表依次参与试剂：空白管标准管待测管ddH2O(μl)TC(5mmol/L)(μl)33待测样本(μl)3COD-PAP(μl)300300300②充分混匀,水浴中孵育。③全自动生化测定吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。主波长/次波长反响类型反响方向主波长/次波长反响类型反响方向500/600nm终点法升反响(+)计算公式：血清、血浆等液体样本(空白调零)：TC(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L血清、血浆等液体样本(全自动生化)：TC(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L细胞、组织等样本(空白调零)：TC(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)细胞、组织等样本(全自动生化)：TC(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)参考区间：安康成年人抱负范围：<5.2mmol/L(<200mg/dl).边缘上升：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)上升：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)备注：mg/dl性能指标：外观线性范围灵敏度变异系数空白吸光值干扰因素稳定性

无色至淡黄色澄清液体0.1~13mmol/L(3.6~500mg/dl)，R2mmol/L(3.6mg/dl)批内<3%，批间<5%<0.1(1cm胆红素<410μmol/L；血红蛋白<7g/L；甘油三脂<28.5mmol/L时，对结果无明细影响。密闭，12本卷须知：1、上述低温试剂防止反复冻融，以免失效或效率下降。2、本法可直接用于检测脑脊液中的TC含量，但不能直接检测尿液中的TC含量，由于未经处理的尿液中含有复原性物质，影响过氧化物酶反响。3、待测样本如不能准时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。4、本法线性范围可达13mmol/L，假设样本TC浓度过高，结果可能呈假性降低。应用生理盐水稀释后