第二讲生物药物的质量管理与控制

第二讲生物药物的质量管理与控制第1页，课件共80页，创作于2023年2月药物是用于预防疾病、治疗人的疾病，有目的地调节人的生理功能，并规定有适应证和用法、用量的物质。因此药物必须要达到一定的质量标准要求，确保病人用药的安全有效。生物药物与一般的化学药物有较大的区别，如：生物药物大多数为大分子药物、相对分子质量不是定值、稳定性差等，故其质量控制和对它有效成分的检测有它自己的特征。第2页，课件共80页，创作于2023年2月如：需做热源质检查、过敏实验、异常毒性等实验。对有效成分的检测除了一般的化学方法外，还要对制品的特异性生理效应或专一生化反应拟定其生物活性的检测。定量的方法也与化学药物有所不同。第3页，课件共80页，创作于2023年2月

第一节生物药物质量的评价一、生物药物质量检验的程序与方法

基本程序：取样→鉴别→检查→含量测定→写出检验报告1、取样：2、药物的鉴别试验：3、药物的杂质检查：4、药物的安全性检查：5、药物含量（效价）测定：6、检验报告的书写：第4页，课件共80页，创作于2023年2月取样量设样品总件数为X当x≤3时，每件取样；当x≤300时，按随机取样；当x﹥300时，按随机取样

取样：科学性、真实性与代表性

第5页，课件共80页，创作于2023年2月

性状（Description）1.外观：状态，颜色，形状等；2、臭、味：气味，味道；3、稳定性：4、溶解度等物理常数。第6页，课件共80页，创作于2023年2月

例：苯甲酸

[性状]本品为白色有丝光的鳞片或针状结晶或结晶性粉

末；质轻；无臭或微臭；在热空气中微有挥发性；水溶液

显酸性反应。本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水

中微溶。熔点本品的熔点（附录ⅣC）为121～124.5℃。

第7页，课件共80页，创作于2023年2月

鉴别（Identification）药物的鉴别是利用其分子结构所表现的特殊化学行为或光谱、色谱特征，来判断药品的真伪。专属性再现性灵敏度方法第8页，课件共80页，创作于2023年2月

例：苯甲酸[鉴别]（1）取本品约0.2g，加4%氢氧化钠溶液15ml，振摇，

滤过，滤液中加三氯化铁试液2滴，即生成赭色沉淀。（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集

图)一致第9页，课件共80页，创作于2023年2月杂质检查纯度要求即药物的杂质检查，亦称限度检查、纯度检查（DetectionofImpurities）一般杂质：水、酸碱物等；特殊杂质：副产物第10页，课件共80页，创作于2023年2月毒性无菌热原降压物等

安全性检查第11页，课件共80页，创作于2023年2月热原的去除：热原主要是肠科杆菌科所产生的细胞内毒素，在细菌生长或细胞溶解时会释放出来，主要是细胞壁成份－脂多糖，其性质相当稳定，即使经高压灭菌也不失活。注射用药必须无热原。从蛋白质溶液中除去内毒素比较困难，最好的办法是防止产生热原，整个生产过程要在无菌条件下进行，所有层析介质在使用前都要先除去热原，在2~8℃下进行操作。洗脱液需先经过无菌处理，流出的蛋白质溶液也应无菌处理，即经过0.2μm滤膜过滤。脂多糖带负电，可以用阴离子交换层析法去除；是疏水的，也可以用疏水层析法。第12页，课件共80页，创作于2023年2月类别截留颗粒大小截留的主要物质过滤介质粗滤>2μm酵母、霉菌、动物细胞、植物细胞、固形物等滤纸、滤布、纤维多孔陶瓷、烧结金属等微滤0.2～2μm细菌、灰尘等微滤膜、微孔陶瓷超滤20Å～0.2μm病毒、生物大分子等超滤膜反渗透<20Å生物小分子、盐、离子反渗透膜第13页，课件共80页，创作于2023年2月含量测定（Assay）药物在通过鉴别无误、检查合格的基础上，进行有效成分含量测定。判断药物的质量是否符合要求，必须全面考虑鉴别、检查与含量测定三者的检验结果应符合规定，否则该药品为不合格品。

第14页，课件共80页，创作于2023年2月

原始记录供试品名称、批号、数量、来源（送检或抽检单位）、取样方法、包装情况、外观性状、检验目的、检验依据、收到日期、报告日期等逐一写清楚。在检验过程中应将观察到的现象、操作步骤、检验数据、结果、结论、处理意见等完整书写，不得涂改。第15页，课件共80页，创作于2023年2月涂改方式：划一条细线，在右上角写正确数字，并盖章签名。例

9.6543-8.12701.5272例0.1031例消耗22.31ml张杰22.05ml张杰1.52730.1032张杰第16页，课件共80页，创作于2023年2月[含量测定]碘液0.1026mol/L9.84259.63470.20780.00→22.95ml符合规定第17页，课件共80页，创作于2023年2月例检验报告书(省略上半页)检验项目检验标准检验结果检验结论[性状]

应白色粉末白色粉末符合规定[鉴别]

应生成黑色↓生成黑色↓符合规定[检查]溶液颜色

≤0.07=0.02符合规定炽灼残渣

≤0.1%0.03%符合规定[含量]

≥99.0％99.8%符合规定结论

本品经检验符合（中国药典2000年版）规定负责人李力复核人罗红检验人

张杰第18页，课件共80页，创作于2023年2月二、药物的ADMEA表示吸收（absorption）；

D表示分布（distribution）；

M表示代谢（metabolism）；

E表示排泄（excretion）。第19页，课件共80页，创作于2023年2月吸收消化道内吸收：口腔；胃肠道消化道外吸收：肌肉、静脉、皮下；皮肤；鼻粘膜第20页，课件共80页，创作于2023年2月图3-4，典型时量曲线图

MTC最小中毒浓度MEC最小有效浓度第21页，课件共80页，创作于2023年2月第二节药物质量的标准

为了控制药品质量，对药品生产、储存、供应及使用各个环节应有一个统一的质量标准要求，以便执法部门定期进行监控，使药品质量的监管工作有法可依。药品的质量标准是药品生产和管理的依据，并具有法定的约束力。第22页，课件共80页，创作于2023年2月药品质量标准体系一、定义：

对药品质量、规格及检验方法所作的技术规定。第23页，课件共80页，创作于2023年2月二、类别：1、法定药品质量标准：中国药典中华人民共和国药品监督管理局标准2、临床研究用药品质量标准3、暂行或试行药品标准4、企业标准第24页，课件共80页，创作于2023年2月三、主要内容主要内容名称含量贮藏

检查鉴别性状第25页，课件共80页，创作于2023年2月药典的内容药典(pharmacopoeia)：是一个国家记载药品规格、标准的法典。由国家组织的药典委员会编写，并由政府颁布实施，具有法律的约束力。药典中收载药效确切、副作用小、质量较稳定的常用药物及其制剂，规定其质量标准、制备要求、鉴别、杂质检查与含量测定等，作为药品生产、检验、供应与使用的依据。第26页，课件共80页，创作于2023年2月药典药典是国家关于药品标准的法典，是国家管理药品生产与质量的依据，具有法律约束力。第27页，课件共80页，创作于2023年2月沿革

建国以来，先后出版了九版药典，1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005和2010年版药典，现行使用的是中国药典2010年版。其英文名称是ChinesePharmacopiea，缩写为Ch.P（2010）。第28页，课件共80页，创作于2023年2月

组成1953和1963年版：一册；1977-2000年版：二册：一部中药材、中成药；二部生化药品、化学药品、生物制品。

2005年版为三册：一部：中药；二部：化学药；三部：生物制品第29页，课件共80页，创作于2023年2月

内容1凡例、2正文、3附录4索引第30页，课件共80页，创作于2023年2月

⑴.凡例（GeneralNotice）是解释和使用《中国药典》

正确进行质量检定的基本原则，并把与正文附录及

质量检定有关的共性的问题加以规定，避免在全书

中重复说明。凡例中有关规定同样具有法定约束力。

第31页，课件共80页，创作于2023年2月温度以摄氏度（℃）表示水浴温度除另有规定外，均指98～100℃；热水系指70～80℃微温或温水系指40～50℃室温系指10～30℃冷水系指2～10℃冰浴系指约0℃放冷系指放冷至室温第32页，课件共80页，创作于2023年2月

⑵.正文（Monographys）是药典的主要内容，为所收载药品或制剂的质量标准。内容：名称、性状、物化常数、鉴别、检查和含量测定等。

第33页，课件共80页，创作于2023年2月第34页，课件共80页，创作于2023年2月第35页，课件共80页，创作于2023年2月

⑶.附录（Appendix）包括制剂通则、通用检测方法和指导原则。记载了制剂

通则、生物制品通则、一般杂质检查方法、一般鉴别试

验、有关物理常数测定法、试剂配制法及光谱法、色谱

法等内容。

第36页，课件共80页，创作于2023年2月⑷.索引（Index）中文索引（汉语拼音索引）和英文名称索引。第37页，课件共80页，创作于2023年2月

中国药典配套使用的相关书籍：①《临床用药须知》②《药品红外光谱集》③《中药彩色图集》④《中药薄层彩色图集》⑤《中国药品通用名》第38页，课件共80页，创作于2023年2月一个国家的药典在一定程度上反映了这个国家药品生产、医疗和科学技术的水平。我国最早的药典是唐显庆4年(公元659年)颁布的《新修本草》（人又称《唐本草》），是世界上最早的一部全国性药典。《太平惠民和剂局方》是我国第一部官方颁布的成方规范。

第39页，课件共80页，创作于2023年2月药典在一定程度上反映一个国家的医药水平时间收载品种2010年4615种2005年3210种2000年2691种1995年2375种1990年1751种1985年1489种1977年1925种1963年1310种1953年531种第40页，课件共80页，创作于2023年2月药典与药品标准中国1、国家药典：国家药典的内容一般分为凡例、正文、附录三大部分。2、部颁药品标准：部颁药品标准的性质与药典相同，也具有法律的约束力。新批准的药物符合其质量标准，经过两年试行期后，方可直接转为部颁标准。第41页，课件共80页，创作于2023年2月3、地方药品标准：药典与部颁药品标准所收载的品种，往往不能完全满足各地区对药品生产、销售、使用和管理的需要。因此，对药典以外的某地区的常用药品、制剂的标准和规格，常制订地区性的标准。第42页，课件共80页，创作于2023年2月

国内生产药品的质量检验一般遵守以上三级质量标准，进口药品、仿制国外药品等需要按照国外药典标准进行检验。第43页，课件共80页，创作于2023年2月其它国家药典世界上大约有38个国家有自己的药典，此外还有国际和区域性药典。这些药典无疑对世界医药科学技术交流和国际贸易有极大促进作用。现对主要药典加以介绍：

第44页，课件共80页，创作于2023年2月美国药典简称U.S.P，现行版为XXⅥ版(2003年)。英国药典简称B.P，现行版为2002年版。日本药局方简称J.P，现行版为第ⅩⅣ改正版(2001年)。欧洲药典简称E.P，现行版为第Ⅳ版(2001年)。

第45页，课件共80页，创作于2023年2月国际药典简称Ph．Int，世界卫生组织（WHO）为了统一世界各国药品的质量标准和质量控制的方法而编纂的。修订中的国际药典为第三版，共分5卷出版，第1卷1979年出版，第2卷1981年出版，第3卷1988年出版。《国际药典》对各国无法律约束力，仅供各国编纂药典时作为参考标准。第46页，课件共80页，创作于2023年2月

根据生物药物的性质和特征，它出用于临床治疗和诊断之外，还用于健康人群的预防接种。许多基因工程药物，特别是细胞因子药物都可参与人体机能的精细调节。在极其微量的情况下就可以产生显著的效应，任何性质和数量的偏差都可能贻误病情，甚至造成严重的危害。因此，在药品的研制、生产、供应以及临床使用过程中必须的生物药物及其产品进行严格的全面质量控制和科学管理。第三节生物药物的科学管理第47页，课件共80页，创作于2023年2月一、药品生产质量管理规范（GMP）GMP是GoodManufacturingPractice的简称，即药品

生产质量管理规范。第48页，课件共80页，创作于2023年2月(一)显著特点：1、药品与人的健康、疾病和生命有直接的关系，因此在生产和使用过程中，不允许有“万一”的错误。

2、药品从本质来说，对机体是一种异物，因此在使用方法上必须给予极大的关注。第49页，课件共80页，创作于2023年2月3、药品是用于疾病的预防和治疗为目的，多数是给病人使用的，同正常人比较病人身体较弱，抵抗力不强，对药品的质量要求较高。4、药品质量在多数情况下，不能通过外观进行判断，这种属性决定了药品生产以至使用，必须加强质量上的管理。第50页，课件共80页，创作于2023年2月(二)GMP总要求：所有医药工业生产，在投产前，对生产过程必须规定明确，所有必要设备必须经过检验，所有人员必须经过适当培训，要求符合规定的厂房建筑及装备，使用合格原料，采用经过批准的生产方法，而且还必需具有符合条件的仓储及运输设施。第51页，课件共80页，创作于2023年2月1、所有操作方法均应明文规定，且知道达到预期果。

2、提供一切必要的装备，包括：经过培训在合适人员；合适的设备及维修服务；正确的材料、容器签；经过

批准的方法；合适的储存及运输。3、操作方法应书写成文，用词简洁明了。

4、操作人员经常培训，能正确操作。

第52页，课件共80页，创作于2023年2月（三）GMP的三大要素：1、人为产生的错误减小到最低；2、防止对医药品的污染和低质量医药品的产生；3、保证产品高质量的系统设计。第53页，课件共80页，创作于2023年2月

1985年7月1日，我国颁布了《药品管理法》，根据其规律，我国自1988年开始实施了《药品生产管理规范》制度。根据规定，自1998年7月1日起，我国未取得药品GMP的企业，管理部门不与受理生产新药的申请；不批准药品的仿制、新药技术的转让和进口药品的分包装；未取得药品GMP认证的新开办药品生产企业不发给其药品生产企业许可证。第54页，课件共80页，创作于2023年2月第55页，课件共80页，创作于2023年2月二、药品安全试验规范（GLP）GLP是GoodLaboratoryPractice的简称，即药品安全试验规范，亦称药物非临床研究质量管理规范。主要内容是在规定试验条件下，进行药效、毒性动物试验的准则：对急性，亚急性，慢性毒性试验，生殖试验，致癌，致畸，致突变以及其它毒性试验等临床前安全试验作出规定，是保证药品安全有效的法规。

第56页，课件共80页，创作于2023年2月三、药物临床试验管理规范（GCP）GCP是GoodClinicalPractice的简称，即药物临床试验管理规范。药品临床试验是指在任何人体（病人或健康的志愿者）进行的药品系统性研究，以证实或揭示试验用药品的作用及不良反应等。制定GCP的目的：保证临床试验过程规范，结果科学可靠，保证受试者的权益并保障其安全。第57页，课件共80页，创作于2023年2月制药工艺：从发现-药物上市发现临床前临床毒理注册生产GLPGCPGMP化学药物生物药物中药剂型开发过程开发工业制药工业制药技术开发技术开发GLP—药物非临床研究质量管理规范GCP—药物临床试验质量管理规范GMP—药品生产质量管理规范第58页，课件共80页，创作于2023年2月第四节生物药物常用的定量分析法1、酶法：通常包括两种类型：一种是酶活力测定法，另一种是酶分析法；2、电泳法：在电解质溶液中，带电粒子或离子在电场作用下，以

不同的速率向其所带电荷相反的方向迁移，基于溶质

在电场中的迁移速率不同，达到分离的目的第59页，课件共80页，创作于2023年2月酶分析法终点测定法：原理：先借助酶反应使被测物质定量地进行转变，然后在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质（第二底物）等的变化量，从而计算出被测物的实际含量或浓度的一种分析方法。条件：酶的底物特异性反应平衡反应液中酶的用量反应产物抑制第60页，课件共80页，创作于2023年2月

几种检定重组蛋白纯度方法的比较特性HPLCSDS、IEFCE分离机制极性、非极性分配，电荷、等电点电荷等分子大小、离子交换分析所需时间10～120min几小时10～30min

分辨力好好好样品体积10～50ul1～50ul1～50nl灵敏度范围ng～ugng～ugpg定量准确性+±+分析方式紫外、荧光、折射紫外（可见、荧光）同HPLC

电化学、放射性银染、放射自显影仪器价格中～高低中～高日常消耗低高低自动化中～高低中～高人力操作低高低制备级中中微量级制备收集样品可以可以较困难第61页，课件共80页，创作于2023年2月电泳法（electrophoresis）在电解质溶液中，带电粒子或离子在电场作用下以不同的速率向其所带电宿相反方向迁移的现象称为电泳，电泳分离是基于溶质在电场中的迁移速度不同而进行的分析方法。各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。在分析核酸、蛋白质等大分子物质时，电泳是个非常有效的手段。第62页，课件共80页，创作于2023年2月根据电泳的分离特点，电泳法包括自由界面电泳、区带电泳和高效毛细管电泳等。根据所用支持物的不同分为纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、PAGE、SDS－PAGE、琼脂糖凝胶电泳等。第63页，课件共80页，创作于2023年2月自由界面电泳：在一根U形管的溶液中，同种分子的构型及电荷情况基本一致，在电场的影响下，它们逐渐密集而与其它电泳迁移率不同的物质之间形成明显界面。第64页，课件共80页，创作于2023年2月区带电泳：在电泳过程中，应用各种不同的惰性支持介质，在电场作用下，使具有不同泳动速度的组分形成各自区带的电泳。如纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙稀酰胺凝胶电泳等等。第65页，课件共80页，创作于2023年2月高效毛细管电泳（HPCE）：在一根内径为50μm的毛细管中，在高压电场下进行样品分离分析的一种新型电泳技术。第66页，课件共80页，创作于2023年2月常用电泳法的类型及其应用纸电泳法：纸电泳法是用滤纸为支持载体的一种电泳方法，如核苷酸，具有共轭双键的嘌呤或嘧啶碱基，在一定的pH条件下，具有强的紫外吸收，电泳后在紫外灯下显示紫色，定位、剪下相应的部位，进行洗脱，在特定波长下测定A，按其吸收系数可计算核苷酸的含量。第67页，课件共80页，创作于2023年2月醋酸纤维素薄膜电泳法：用醋酸纤维素薄膜作为支持载体的一种电泳方法，已应用于血清蛋白、脂蛋白等的分离和定量测定。第68页，课件共80页，创作于2023年2月PAGE法：以人工合成的聚丙烯酰胺凝胶作为惰性支持载体的电泳方法。其分离效果主要取决于分子所带电荷与分子大小的比例，也取决于与分子量大小有关的分子筛效应。按电泳槽和凝胶层中的缓冲液体系pH和凝胶孔径大小是否一致分为连续体系和非连续体系。

第69页，课件共80页，创作于2023年2月SDS－PAGE：根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂SDS按重量比结合成复合物，使蛋白质分子所带地负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷，消除了不同蛋白分子的电荷