水果中维生素C含量的测定文档资料

水果中维生素C含量的测定实验要求：(必修)一、实验目的通过实验，使学生掌握滴定操作的基本技术、不同浓度溶液的配制方法、2，6-二氯酚靛酚测定维生素C的原理和方法。要求学生能独立操作完成全部实验。二、实验内容(1)掌握滴定操作的基本技术(2)掌握不同浓度溶液的配制方法(3)掌握2，6-二氯酚靛酚测定维生素C的原理和方法。三、实验原理、方法和手段还原型抗坏血酸能还原染料2.6-二氯酚靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2.6-二氯酚靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2.6-二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。四、实验步骤(一)试剂：(1)2%草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml。(2)1%草酸溶液：取上述2%草酸溶液500ml，用水稀释至1000m1。(3)抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1%草酸溶液中，移入I2/300m量瓶中，并用1%草酸溶液稀释至100毫升，混匀，置冰箱中保存。使用时吸取上述抗坏血酸5ml，置于50毫升容量瓶中，用1%草酸溶液定容之。此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C(浓度：0.02mg/ml)。(4)2.6：二氯靛酚溶液：称取2.6-二氯靛酚50mg，溶解，转移到250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此液应贮于棕色瓶中并冷藏，每星期至少标定1次。标定方法：取20m10.02mg/ml的抗坏血酸标准溶液于锥形瓶中，用2.6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色，15秒不褪色为止，记为滴定终点，计算染料溶液对抗血酸的滴定度T。滴定度(T)=(CxV)/V2式中：C；抗坏血酸V)的浓度(mg/m1)V：吸取抗坏血酸的体积(m1)V2：消耗染料溶液体积(m1)(二)、操作方法：(1)水洗干净整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。每一样品称取20-30g，放入研体中，加入等量2%草酸一起研磨成匀浆，提取液通过2层纱布过滤到100mL容量瓶中，然后用1%草酸冲洗研体及纱布3一4次，最后用1%草酸稀释定容至刻度线。(2)如果提取液含有色素，则倒入锥形瓶内加入1匙活性碳，充分振荡5分钟，滤纸过滤，活性碳吸附生物样品中的色素，有利于终点的观察。(3)取三角锥形瓶3个，各加脱色的提取液20m1，用2，6一二氯酚靛酚溶液滴定，直至出现微红色30秒不退色为终点。记录三次滴定的毫升数，取平均值。滴定必须迅速不要超过2分钟，因为在实验条件下，一些非Vc的还原物质其还原作用较迟缓，快速滴定可以避免或减少它们的影响。平行3次。(三)计算：每百克样品中抗坏血酸含量毫克数=(VxT)/W×100V：滴定时所耗去染料溶液的量(ml)；T：Iml染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量(mg)W：滴定时所取的滤液中含样品量(g).

维生素C含量的测定实验实验方法原理利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素C氧化成脱氢维生素C，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚淀粉立即被还原成无色。当溶液从无色转变成为红色时，即为滴定终点。实验步骤一、试剂

1.实验材料：水果或蔬菜。

2.仪器：（1）微量滴定管；500毫升×1；（2）量瓶：50毫升×2；（3）三角瓶；500毫升×2；（4）研钵；（5）量筒；（6）刻度吸管；10毫升×2；

3.试剂：

（1）1%草酸：秤取5.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。

（2）2%草酸：秤取10.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。

（3）0.001N2，6-二氯酚靛酚钠溶液：称取干燥的2，6-二氯酚靛酚钠60毫克，放入200毫升量瓶中，加热蒸馏水中100-150毫升，滴加0.01NNaOH4-5滴，强烈摇动10分钟冷却后加水至刻度。摇匀后用紧密滤纸滤于棕色瓶中，贮于冰箱中备用，有效期一周。使用前需标定（见附注）。

实验过程

1.样品的处理和提取：

称取4.0克新鲜样品，至研钵中，加5毫升2%草酸，研成匀浆。通过漏斗将样品提取液转移到50毫升量瓶中。残渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及残渣一并转入量瓶。2%草酸总量为35毫升，最后以水定容。溶液定容时若泡沫较多，可加几滴乙醇消除泡沫后再定容。摇匀，过滤，滤液备用。

2.样品的测定：

吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的红色，并在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。

3.空白测定：

在另一50毫升三角瓶内，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，摇匀，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠滴定至终点，记录染料用量。

X：100克样品所含维生素C毫克数（毫克/100克）

W：称取样品重（克）

V1：滴定样品所用染料毫升数

V2：滴定空白所用染料毫升数

V：样品提取液稀释之总体积（即50毫升）

K：1毫升染料液所能氧化维生素C之毫克数，可由标定算出注意事项mso-bidi-language:AR-SA">二氯酚靛酚钠溶液的标定：准确称取维生素C20毫克，用1%草酸溶解定容至200毫升。吸取此液10毫升，以1%草酸再次稀释定容至200毫升。吸取此液10毫升，放入50毫升三角瓶中（同时吸取10毫升1%草酸于另一个50毫升三角瓶中，做空白对照立即用所要标定的2，6-二氯酚靛酚钠滴定至粉红色出现15秒不消失，记录所用毫升数，按下式计算K值（即1毫升染料所能氧化抗坏血酸的毫克数）。

(式中：G为称取维生素C的毫克数。V为滴定10毫升标准维生素C时所用去染料的毫升数，与滴定