苜蓿中维生素c含量测定方法的比较

苜蓿中维生素c含量测定方法的比较

三叶草常被称为“三叶草”。这是一种多年生开花植物。它不仅产量高，而且草质好，含有蛋白质、维生素和养分等重要的营养成分。以“观赏动物之王”而闻名。通常用作动物饲料，其中最著名的是三叶草。维生素C是维持人体正常代谢的一种水溶性维生素,是植物营养成分的重要指标,不同气候、采收时期、贮藏方式、处理方式对维生素C含量都会产生影响1材料和方法1.1.1试验样本苜蓿:采自吉林省农科院试验地,为紫花苜蓿,挑选新鲜、幼嫩尖部作为试材,大部分高约10cm。1.1.2,6-二氯酚植物维生素C(纯度≥99.7%):天津天泰精细化学品有限公司;2,6-二氯酚靛酚钠盐(DPIP,高纯):北京中生瑞泰科技有限公司;草酸(分析纯):沈阳市试剂一厂;碳酸氢钠(分析纯):天津金汇亚化学试剂有限公司。1.1.3测试仪器公司BT124S电子天平(d=0.0001g):中国赛多利斯科学仪器有限公司;JJ5500电子天平(d=0.01g):常熟市双杰测试仪器厂;DS-1高速组织捣碎机(300r/min~22000r/min):上海精科试验有限公司。1.2方法1.2.1组织粉碎和研磨组织捣碎法1:称取具有代表性的样品100g,放入组织捣碎机中,加入100mL浸提剂,组织机捣碎3min成匀浆。组织捣碎法2:称取具有代表性的样品100g,放入组织捣碎机中,捣碎3min成匀浆后再加入100mL浸提剂。手工研磨法1:称取具有代表性的样品100g,放入研钵中,加入100mL浸提剂,手工研磨3min成匀浆。手工研磨法2:称取具有代表性的样品100g,放入研钵中,手工研磨3min成匀浆后再加入100mL浸提剂。后续步骤按照国家标准GB6195-86《水果、蔬菜维生素C含量测定法(2,6-二氯靛酚滴定法)》进行测定1.2.2组织捣鱼匀浆采集苜蓿可食部分的嫩茎和叶片组织,加入浸提剂后用组织捣碎机打成匀浆。按照国家标准GB6195-86《水果、蔬菜维生素C含量测定法(2,6-二氯靛酚滴定法)》进行操作。1.2.3组织粉碎和匀浆的制备同一天采摘同一试验区的苜蓿产品,在开水中分别漂烫1、3、5、10、20min后,再加入浸提剂用组织捣碎机打成匀浆。按照国家标准GB6195-86《水果、蔬菜维生素C含量测定法(2,6-二氯靛酚滴定法)》进行操作,分析维生素C含量的变化。1.2.4维生素c含量同一天采摘同一试验区的苜蓿产品,用保鲜膜包裹后贮藏于4℃冰箱中,于第0、2、4、8、14、20、26d,加入浸提剂用组织捣碎机打成匀浆。按照国家标准GB6195-86《水果、蔬菜维生素C含量测定法(2,6-二氯靛酚滴定法)》进行操作,分析维生素C含量的变化。采用SPSS11.5forWindows对试验数据进行统计分析,按完全随机设计进行方差分析,并以LSD法检测各处理平均数间的差异显著性。2结果与分析2.1不同浸提剂的影响制样是2,6-二氯靛酚滴定法测定中非常重要的一个环节,最佳的制样方法不仅可以提高工作效率,还可以保证维生素C测定结果的准确性。采摘了12份苜蓿样品,分别用组织捣碎成浆和手工研磨成浆。其中组织捣碎法1和手工研磨法1均是样品直接加浸提剂然后研磨成浆;组织捣碎法2和手工研磨法2均是样品成浆后再加入浸提剂。维生素C测定结果见表1。由表1可知,手工研磨法提取结果高于组织捣碎法,但差异不显著(P>0.05)。“1法”均显著高于“2法”(P<0.05),分别高于96.10%和94.92%。推测原因为在不加浸提剂的情况下,组织捣碎机高速运转时温度升高,水分蒸发,进而导致水溶性维生素C损失;手工研磨时与空气直接接触,维生素C酶与空气接触时就会促进维生素C氧化。因此,为了提高工作效率以及提高测定结果的准确度,采用样品直接加浸提剂后用组织捣碎机制成匀浆。2.2测定结果及其原因在同一试验区采摘6份苜蓿可食叶片和嫩茎,测定结果见表2。由表2可知,苜蓿叶片中维生素C含量显著高于嫩茎组织(P<0.05),叶片高于嫩茎59.29%。2.3热烫时间对苜蓿中维生素c含量的影响在北方,苜蓿通常是用清水冲洗干净后,开水焯熟。维生素C是典型的水溶性维生素,因此,热烫时间对苜蓿中维生素C含量会有一定的影响,见表3。从表3测定结果可知,随着热烫时间的延长,苜蓿中维生素C含量显著降低(P<0.05),热烫1min,维生素C含量损失29.50%,但此时还没有焯好;热烫3min,维生素C含量损失37.70%;热烫5min,维生素C含量已损失73.70%。热烫10min和20min,维生素C含量已损失83.30%和86.10%,但两者差异不显著(P>0.05)。由此可以看出,热烫会损失大量的维生素C,时间愈长损失愈多。2.4贮藏期间维生素c含量的变化保鲜膜包裹,低温(4℃)贮藏0、2、4、8、14、20、26d的苜蓿中维生素C含量测定结果见表4。从表4可知,随着贮藏时间的延长,苜蓿维生素C含量显著下降(P<0.05);贮藏第2d,维生素C含量损失6.15%;贮藏第4d,维生素C含量已损失29.80%;贮藏第8d,维生素C含量已损失53.31%。苜蓿随着贮藏时间的延长,水分逐渐丧失,苜蓿逐渐萎蔫、枯黄,与新鲜时相比,在色泽和水分保持上有较大的变化,贮藏26d,苜蓿已经腐烂,无法食用。因此,建议采摘后立即食用,若不能及时食用,贮藏2d为宜。3样品处理及贮藏时间对苜蓿中维生素c含量的影响1)制样方法不同造成维生素C含量不同程度的损失,参考国家标准的同时,试验采用组织捣碎法和手工研磨法,并加浸提剂顺序不同制成匀浆。结果显示,手工研磨法测得的维生素C含量略高于组织捣碎法,但差异不显著(P>0.05),但直接加浸提剂制成匀浆要显著高于匀浆后加浸提剂(P<0.05),高达49%。为了提高工作效率以及提高测定结果的准确度,可采用样品直接加浸提剂后用组织捣碎机制成匀浆。2)苜蓿中维生素C含量高达95.15mg/