银杏内酯b纳米混悬剂的制备及体外溶出研究

银杏内酯b纳米混悬剂的制备及体外溶出研究

纳米颗粒（nin）是指由少量表面活性剂形成的“纯药物”颗粒组成的亚甲基胶体分散体系。仪器、试剂和试药LC-20AD型高效液相色谱仪(日本岛津公司);Winner801纳米激光粒度仪(济南微纳颗粒仪器股份有限公司);DF101S集热式恒温加热磁力搅拌器(北京恒丰长伟科技有限公司);ZRS-8G智能溶出试验仪(天津市天大天发科技有限公司);BT125D电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司);JSM-6510扫描电镜(日本电子公司);Lab-1A-50冻干机(北京博医康实验仪器有限公司);TGL-16G型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);D8ADVANCEX-射线衍射仪(德国Bruker公司)。银杏内酯B原料药(批号HGD13092198,宝鸡市辰光生物科技有限公司,纯度≥98%);银杏内酯B对照品(批号110863-201611,中国食品药品检定研究院,以95.6%计);聚维酮K30(PVPK30,批号160502,安徽山河药用辅料公司);大豆磷脂(批号c10456650,上海麦克林生化科技有限公司);乙腈(色谱纯);其余试剂均为分析纯。方法和结果gb-ns的制备采用微型化介质研磨法制备GB-NS。量取适量氧化锆珠子(粒径0.6～0.8mm)于10mL西林瓶中,加入4.0mL蒸馏水和磁力搅拌子,适当搅拌后,精密称取GB原料药、大豆磷脂和PVPK30适量于瓶中,将西林瓶置于磁力搅拌器上研磨一定时间,即得GB-NS。粒径及分布特性吸取少量混悬液,加入适量蒸馏水稀释,使用激光粒度仪测定GB-NS的粒径及分布情况,平行测定3次取平均值,以平均粒径(PS)和多分散度指数(PDI)为评价指标。优化配置氧化锆元素研磨法固定处方及工艺条件:GB10mg,PVPK305mg,水4mL,氧化锆珠子4mL,研磨时间2h,研磨转速1300r·min大豆磷脂研磨法固定处方及工艺条件:GB10mg,大豆磷脂10mg,水4mL,氧化锆珠子4mL,研磨时间2h,研磨转速1300r·min氧化锆元素研磨法固定处方及工艺条件:大豆磷脂10mg,PVPK305mg,水4mL,氧化锆珠子4mL,研磨时间2h,研磨转速1300r·minblock-behnki效应的表面方法为gb-nit优化了gb-s查阅相关文献模型调整使用Design-Expert8.0.6软件对试验结果进行处理,以方差分析及显著性分析2个拟合方程的相关系数说明上述模型拟合程度良好,可用此模型对GB-NS的工艺进行预测和分析。回归方程系数的显著性检验见表6。结果显示,模型不同因素的三维曲面图使用Design-Expert8.0.6软件根据上述回归方程,绘制对各指标有显著影响的不同因素的三维曲面图,结果见图1。由图1A和1B可知,GB-NS的PS在转速增大的过程中先增大后减小,且转速为1600r·min工艺验证采用Design-Expert8.0.6软件,以扫描电镜sem观察吸取GB-NS适量,加蒸馏水稀释,滴于锡箔纸上、晾干,得到GB-NS样品,在扫描电镜下观察形态,结果见图2。图2A显示GB原料药呈不规则的块状;图2B显示GB-NS呈棒状或不规则的颗粒状,粒径在200nm左右,且部分出现团聚现象。冻干粉及固体添加剂的xrd分析取适量GB原料药、物理混合物(GB原料药、大豆磷脂和PVPK30比例为2∶2∶1)和GB-NS分别置于-80℃冰箱冻存6h后放入冻干机12h(真空度<10Pa),取出,即得GB原料药冻干粉、物理混合物冻干粉和GB-NS冻干粉。分别将上述冻干粉和GB原料药进行XRD分析,结果见图3。与GB原料药相比,GB原料药冻干粉、物理混合物冻干粉和GB-NS冻干粉的特征衍射峰均有一定程度的减弱,且GB-NS冻干粉显著减弱,仅剩2个较明显的特征衍射峰,表明制备为GB-NS后,GB原料药的结晶度有一定程度的降低。外展性测定及gb-s的性能gb-ns的制备精密称取GB对照品16.67mg于5mL量瓶中,加乙腈超声溶解并定容,得3.334mg·mL精密吸取0.5mL的GB-NS(含GB原料药1.25mg)于10mL量瓶中,加入PBS缓冲液(精密称取1.58g氢氧化钠、6.80g磷酸二氢钾溶于1000mL蒸馏水)超声溶解并定容,得0.125mg·mL对照品质量浓度精密吸取对照品储备液适量,用乙腈按不同比例稀释,得质量浓度为33.34,66.68,133.36,266.72,333.4μg·mL精密吸取对照品储备液适量,稀释得质量浓度分别为33.34,66.68,266.72μg·mL吸取制备3批GB-NS,每一批按按参照2015年版《中国药典》四部“通则0931”第二法,桨法。分别称取GB原料药30mg、GB原料药冻干粉30mg、物理混合物冻干粉75mg(含GB30mg)和GB-NS冻干粉75mg(含GB30mg),以200mL的PBS缓冲液为溶出介质,转速为100r·min研磨时间和研磨粒径对药物粒径大小的影响大豆磷脂是一种天然的非离子型表面活性剂,常应用于各种纳米药物传递体系的制备,如脂质体、纳米乳、纳米胶束和纳米凝胶等,具有改善药物的溶解速度、增加储存稳定性和提高药物生物利用度的重要作用在进行效应面优化GB-NS工艺过程中发现研磨转速的增大和研磨介质用量的增加会使药物粒径先增大后减小,而随着研磨时间的延长,药物粒径则先减小后增大,可见各因素对药物粒径大小的影响并不是简单的线性关系,分析其原因可能是:持续的研磨使药物颗粒变为纳米微粒,而粒径越小,表面能越大,粒子可能发生二次团聚,导致粒径增大;二次团聚的颗粒随着持续的研磨被再分散,粒径再次变小。相对于均匀设计XRD分析结果显示药物结晶度顺序为GB原料药>GB原料药冻干粉>物理混合物冻干粉>GB-NS冻干粉,这与体外溶出试验中药物的溶出速率一致,由此可知药物结晶度越低,溶出速率越快。而GB原料药和GB原料药冻干粉两者的累积溶出度基本一致,可知冻干工艺虽可降低GB的结晶度,但不影响GB的溶出度。与GB原料药冻干粉相比,物理混合物冻干粉的累积溶出度有一定的提高,分析其原因可能是稳定剂具有一定的增溶作用。NS能有效改善难溶性药物的溶解性,提高生物利用度。然而,随着储存时间的延长,药物粒子易发生沉淀、聚集和晶体生长等现象色谱柱为Diamonsil-C2.7.2测定分别取阴性对照溶液(PBS缓冲液),GB对照品(精密吸取0.5mL对照品储备液于10mL量瓶中,乙腈定容)和GB-NS供试品,按2.7.1项下的