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文档简介
高中生物人教版选修一课件共两套
第一套:2页—383页
第二套:384页—849页第1页■高中生物课件(人教课标版)第2页课题1:果酒和果醋制作第3页凉州词
唐朝——王翰葡萄美酒夜光杯,欲饮琵琶立即催。醉卧沙场君莫笑,古来征战几人回。第4页
果酒果醋在酿造过程中,水果中富含维生素、矿物质、氨基酸等被较好地保存,大大提升了原醋液营养价值。试验表白,果醋中醋酸、乳酸、氨基酸甘油和醛类化合物,对人皮肤有柔和刺激作用,能使血管扩张,增加血液循环,从而起到延缓衰老作用。
以苹果、葡萄、山楂等为原料生产果酒果醋饮料迎合了当代都市人绿色、健康消费理念,也同步满足了当代都市女性保健、美容需求。
第5页学习目标1、说明果酒和果醋制作原理2、设计果酒和果醋发酵装置3、理解制作果酒和果醋过程第6页1、果酒制作原理(1)果酒制作原理是什么?写出反应式。(2)制作果酒原料是什么?假如制作葡萄酒,取材时你以为应先冲洗还是先除去枝梗?(3)制作葡萄酒酵母菌主要起源于哪里?其他杂菌会不会引发发酵液污染?你以为应当从哪些方面避免发酵液被污染?(4)果酒制作时应给予如何温度、空气条件?(5)有关酵母菌生物学特性你懂得哪些?一、基础知识分析第7页1、果酒制作原理(1)果酒制作原理是什么?写出反应式。
酵母是兼性厌氧微生物,有氧时进行有氧呼吸;在厌氧条件下,将双糖或单糖进行糖酵解,并进行乙醇发酵,产生乙醇。条件:酶和温度
C6H12O6
+6O2CO2+6H2OC6H12O62CH3CH2OH+2CO2第8页1、果酒制作原理(2)制作果酒原料是什么?假如制作葡萄酒,取材时你以为应先冲洗还是先除去枝梗?一、基础知识分析制作果酒原料是鲜果。制作葡萄酒时,应先冲洗葡萄,然后再除去枝梗,从而避免除去枝梗时,引发葡萄损坏,增加被杂菌感染机会。第9页1、果酒制作原理(3)制作葡萄酒酵母菌主要起源于哪里?其他杂菌会不会引发发酵液污染?你以为应当从哪些方面避免发酵液被污染?
制作葡萄酒酵母菌起源于附着在葡萄皮上野生酵母菌。杂菌不会引发发酵液污染,由于首先,葡萄在榨汁前要清洗;其次,在缺氧、酸性发酵液中,绝大多数微生物无法适应环境而被抑制。对发酵瓶、纱布、榨汁器等用具进行清洗并消毒。每次排气时只要拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。第10页1、果酒制作原理(4)果酒制作时应给予如何时间、温度、空气条件?思考时间:10-12天温度:18-25℃空气:缺氧第11页厌氧制酒
第12页1、果酒制作原理(5)有关酵母菌生物学特性你懂得哪些?同化作用类型:异养异化作用类型:兼性厌氧型主要分布:土壤构造:单细胞分类:真核生物生殖(主要方式):出芽生殖第13页2、果醋制作原理(1)果醋制作原理是什么?写出反应式。(2)制作果醋原料是什么?假如制作葡萄醋应先如何处理鲜葡萄?为何要加入果胶酶?(3)制作葡萄醋醋酸菌主要起源于哪里?(4)果醋制作时应给予如何时间、温度、空气等条件?(5)有关醋酸菌生物学特性你懂得哪些?一、基础知识分析第14页2、果醋制作原理(1)果醋制作原理是什么?写出反应式。
乙醇转变成乙酸氧化过程是由醋酸杆菌完成,这一过程是需氧过程。条件:酶和温度C2H5OH+O2CH3COOH+H2O第15页2、果醋制作原理(2)制作果醋原料是什么?假如制作葡萄醋应先如何处理鲜葡萄?为何要加入果胶酶?将葡萄洗净、蒸煮、榨汁,并加入某些果胶酶使细胞壁溶解,获取更多果汁。第16页2、果醋制作原理(3)制作葡萄醋醋酸菌主要起源于哪里?
制作葡萄醋醋酸菌能够直接购买,或用选择培养基培养第17页2、果醋制作原理(4)果醋制作时应给予如何时间、温度、空气等条件?时间:7-8天温度:30-35℃空气:充足氧第18页有氧制醋
第19页2、果醋制作原理(5)有关醋酸菌生物学特性你懂得哪些?同化作用类型:异养异化作用类型:需氧主要分布:酸性环境构造:单细胞分类:原核生物生殖:分裂生殖第20页二、果酒和果醋发酵装置(1)试验室制作果酒、果醋基本装置是什么?排气口、冲气口、出料口各有什么作用?(2)为何排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接?(3)假如进行大规模生产果酒、果醋时,需要处理哪些问题?探究第21页(1)试验室制作果酒、果醋基本装置是什么?排气口、冲气口、出料口各有什么作用?第22页(2)为何排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接?排气口要通过一种长而弯曲胶管与瓶身连接,其目标是避免空气中微生物污染。第23页思考(3)假如进行大规模生产果酒、果醋时,需要处理哪些问题?大规模生产果酒、果醋时,需要处理全面考虑,如:a:原料起源和选择b:菌种培养c:发酵设备、发酵条件自动化控制d:严格控制杂菌污染等e:实际生产中还要考虑沉淀、消毒包装、保存,风味色泽等第24页左:葡萄酒窖;中:啤酒酒窖;右:白酒酒窖
大规模生产果酒发酵和保存第25页三、理解制作果酒和果醋过程(1)简述果酒、果醋制作基本过程。(2)如何检查果酒、果醋制作是否成功?第26页(1)简述果酒、果醋制作基本过程。1.对发酵瓶、纱布、榨汁器等用具进行清洗并消毒。2.取葡萄500g,清除枝梗和腐烂叶子。3.用清水冲洗葡萄1-2次除去污物。(注意冲洗次数不宜太多)4.榨汁后装入发酵瓶。第27页5.将发酵瓶置于合适温度(18-25℃)下发酵。6.简易装置2-4天排气一次。(拧松瓶盖)7.10天后,取样检查。8.加入醋酸菌或醋曲,然后移至30-35℃条件下发酵,适时充气。第28页(2)如何检查果酒、果醋制作是否成功?果酒制作是否成功判定办法是:嗅味和品尝、显微镜观测、用重铬酸钾检查酒精存在果醋制作是否成功判定办法是:观测菌膜形成、嗅味和品尝、比较发酵前后PH值显微镜观测第29页巩固练习1.下列有关果醋制作,错误是()A.果醋制作需用醋酸菌,醋酸菌是一种好氧菌,因此在制作过程中需通氧气B.醋酸菌是一种嗜温菌,温度要求较高,一般在50℃左右C.醋酸菌能将果酒变成果醋D.当氧气、糖源充足时,醋酸菌可将葡萄中糖分解成醋酸2.在制作果酒时假如始终往发酵罐中通入充足氧气,会发生何种现象?()A酵母菌死亡,不产生酒精B酵母菌大量繁殖,长生较多酒精C酵母菌大量繁殖,不产生酒精D酵母菌数目较少,不长生酒精3.下列微生物属于严格厌氧是:()酵母菌B.醋酸杆菌C.乳酸菌D.曲霉4.酵母菌在氧气充足条件下,主要生殖方式为()A出芽生殖B分裂生殖C孢子生殖D卵式生殖第30页5.在酿酒过程中,温度对酒精发酵过程起到主要作用,应把发酵温度控制在()A0-10℃B25-35℃C18-25℃D40℃以上6.在酿酒和酿醋过程中都要包括多种微生物,在上述两个过程中所包括微生物在构造上有什么本质区分?A前者有细胞构造,后者没有细胞构造B前者没有细胞构造,后者有细胞构造C前者有成形细胞核,后者没有成形细胞核D前者没有成形细胞核,后者有成形细胞核7.在制造葡萄醋时为何要适时通过充气口充气A醋酸菌新陈代谢类型为自养需氧型B醋酸菌新陈代谢类型为异养需氧型C醋酸菌新陈代谢类型为自养厌氧型D醋酸菌新陈代谢类型为异养厌氧型8.在果酒制作试验结束时我们要检测试验是否成功,一般用重铬酸钾来检测酒精有没有,原理是在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应是()A蓝色B砖红色C灰绿色D深紫并带金属光泽第31页
在酒制作中,依种类分大体上可有白酒、果酒、啤酒和黄酒四类。制作办法各不相同,但相同部分是它们都是由酵母完成。酵母在自然界中广泛分布,已知有几百种之多,也是应用最广一类微生物。如面包制作、酒精制造、药用酵母片、酿酒等。酒种类第32页“干”是葡萄酒中糖分要在一定水平之下(低于4g/升),几乎所有被降解发酵,甜葡萄酒(每升总糖50g以上)。
干红与干白第33页都能够是由红色葡萄制作,但白葡萄酒在葡萄榨汁时,不使皮和子中色素出来,因此得白葡萄酒,而红葡萄酒是将皮和子部分捣碎,有了红色素而得红葡萄酒,红葡萄酒和白葡萄酒第34页思考制作葡萄酒和葡萄醋过程中,发酵液分别有哪些变化?其中最显著变化发生在发酵后多少天?你能分析引发变化原因吗?第35页葡萄酒制作图片学习知识动手实践收获美酒体会乐趣美味美好享有生活谢谢大家第36页■高中生物课件(人教课标版)第37页
腐乳作为一种发酵大豆食品,它制作工艺在我国有着悠远历史。腐乳根据颜色,可分为青方、红方和白方三类。导入新课红方腐乳白方腐乳青方腐乳第38页课题2:腐乳制作第39页
以制作腐乳为例理解传统发酵技术应用,说明腐乳制作过程科学原理,设计并完成腐乳制作,分析影响腐乳品质条件。教学目标第40页
课题重点:说明腐乳制作过程科学原理,设计并完成腐乳制作。
课题难点:在实践中摸索影响腐乳品质条件。重点与难点第41页一、基础知识
据史料记载,早在公元5世纪魏代古籍中,就有腐乳生产工艺记载,到了明代我国就大量加工腐乳,而今腐乳已成长为具当代化工艺发酵食品。小资料第42页1.你能利用所学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事吗?想一想2.王致和为何要撒许多盐,将长毛豆腐腌起来?答:豆腐上生长白毛是毛霉白色菌丝。严格地说是直立菌丝,在豆腐中尚有匍匐菌丝。答:盐能避免杂菌污染,避免豆腐腐败。第43页腐乳制作原理1、参与腐乳制作主要微生物主要作用青霉曲霉酵母毛霉第44页1、有关毛霉:(1)毛霉是一种丝状真菌。繁殖方式为孢子生殖,新陈代谢类型为异养需氧型。(2)毛霉在腐乳制作中作用:在豆腐发酵过程中,毛霉等微生物产生蛋白酶能将豆腐蛋白质分解成小分子肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸.在多种微生物协同作用下,一般豆腐转变成我们爱吃腐乳.发酵温度为15~18℃。第45页毛霉菌落形态第46页总状毛霉菌落形态第47页思考题1.我们日常吃豆腐,哪种适适用来做腐乳?答:含水量为70%左右豆腐适于作腐乳。用含水量过高豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密“皮”。这层“皮”是如何形成呢?它对人体有害吗?它作用是什么?答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长菌丝(匍匐菌丝),它能形成腐乳“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。第48页2、微生物作用机理
酿造腐乳主要工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。
前期发酵过程中,毛霉在豆腐(毛坯)上生长。毛霉生长大约5天后使白坯变成毛坯。豆腐表面被一层菌膜包住,形成腐乳“体”。同步毛霉分解以蛋白质为主蛋白酶,将豆腐所具有蛋白质分解为多种氨基酸。第49页
在后期发酵过程中,酶与微生物协同作用,通过研制并配入多种辅料(红曲、面曲、酒酿),是蛋白酶作用迟缓,促进其他生化作用,生成腐乳香气。第50页二、试验设计让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制温度保持在15-18℃;豆腐水分控制在70%左右。逐层加盐,随层数加高而增加盐量,腌制大约8天左右。卤汤由酒及多种香辛料配制而成。封瓶时瓶口通过酒精灯火焰避免瓶口污染。第51页腐乳制作详细操作步骤:将豆腐切成3cm×3cm×1cm若干块;将豆腐块平放在铺有干粽叶盘内,粽叶能够提供菌种,并能起到保温作用,每块豆腐等距离排放,周围留有一定距离,豆腐上面再铺上洁净粽叶;将平盘放入温度保持在15-18℃地方;第52页4.当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,清除包裹平盘保鲜膜以及扑在上面粽叶,使豆腐块热量和水分能够迅速散失,同步散去霉味;5.当豆腐凉透后,将豆腐块间连接在一起菌丝拉断,并整洁排列在容器内,准备腌制;6.长满毛霉毛坯与盐质量分数比为5:1,分层加盐,在瓶口表面盐要铺厚些,大约腌制8天;第53页7.将黄酒、米酒和糖,按口味不一样而配以多种香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等)混合制成卤汤;8.将广口玻璃瓶洗净,用高压锅在100℃蒸气灭菌,将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料,密封放置,常温六个月能够成熟。第54页三、操作提醒1、控制好材料用量
腌制时注意控制盐用量
盐浓度过低不足以抑制微生物生长,也许造成豆腐腐败变质;浓度过高会影响腐乳口味。卤汤中酒含量应控制在12%左右
酒精含量过高将会延长腐乳成熟时间;含量过低不足以抑制微生物生长,也许造成豆腐腐败。第55页2、避免杂菌污染用来腌制腐乳玻璃瓶,洗刷洁净后要用沸水消毒。装瓶时,操作要迅速小心。封瓶时,最佳将瓶口通过酒精灯火焰,避免瓶口被污染。第56页四、成果分析与评价A是否完成腐乳制作
能够合理选择试验材料与用具;
前期发酵后豆腐表面长有菌丝,后期发酵制作基本没有杂菌污染。第57页B腐乳质量评价成功腐乳应具有下列特点:
色泽基本一致、味道鲜美、咸淡适口、无异味、块形整洁、厚薄均匀、质地细腻、无杂质。第58页C能否总结不一样条件对腐乳风味和质量影响
从盐、酒用量、发酵温度、发酵时间长短、以及香辛料等原因中某一原因说明其对腐乳风味或质量影响。第59页
腐乳制作根据发酵类型不一样能够分为四种:腌制腐乳毛霉腐乳根霉腐乳细菌腐乳五、有关链接第60页
根霉型腐乳:
采取耐高温根霉菌,经纯菌培养,人工接种,在夏季高温季节也能生产腐乳,但根霉菌丝稀疏,浅灰色,蛋白酶和肽酶活性低,生产腐乳,其形状、色泽、风味及理化质量都不如毛霉腐乳。第61页
腌制腐乳:
豆腐坯加水煮沸后,加盐腌制,装坛加入辅料,发酵成腐乳。特点:豆腐坯不经前期发酵,直接装坛,进行后发酵,依靠辅料中带入微生物而成熟。缺陷:蛋白酶不足,后期发酵时间长,氨基酸含量低,色香味欠佳。第62页制作原理试验设计主要微生物根霉酵母成果分析与评价毛霉蛋白酶蛋白质小分子肽和氨基酸腐乳制作曲霉机理脂肪酶脂肪甘油和脂肪酸让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制操作提醒控制盐酒用量避免杂菌污染课堂小结第63页1.使腐乳味道鲜美,易于消化、吸取营养成份主要是()A.多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸
B.NaCl、水、蛋白质C.蛋白质、脂肪、NaCl、水
D.无机盐、维生素
答案:A课堂练习第64页2.食盐在豆腐坯腌制中起到作用是()①渗入盐分,析出水分②给腐乳以必要咸味③避免毛霉继续生长和污染杂菌繁殖④浸提毛霉菌丝上蛋白酶A.①②③
B.③④C.①②③④
D.①③
答案:C第65页3.卤汤中香辛料作用是()①调味②促进发酵③杀菌防腐A.①②
B.①②③C.②③
D.①③答案:B第66页1.答:越接近瓶口,杂菌污染也许性越大,因此要伴随豆腐层加高增加盐用量,在接近瓶口表面,盐要铺厚某些,以有效避免杂菌污染。习题答案第67页■高中生物课件(人教课标版)第68页课题3:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量第69页
泡菜是一种以发酵加工制成浸制品,为泡酸菜类一种。泡菜制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间都有自制泡菜习惯。目前较受欢迎是川味和韩味泡菜,在许多风味餐馆里,都有其踪影,它鲜嫩清脆,能够促进食欲,帮助消化与吸取。假如自己在家也做某些这样泡菜,做为每天饭前小菜,或以它配菜,烹成多种菜肴,不失为一件美事。不过泡菜含亚硝酸盐具致癌作用危害身体健康,因此不易多吃第70页一、课题目标尝试制作泡菜,并尝试用比色法测定泡菜中亚硝酸盐含量变化。讨论与此有关食品安全问题。二、课题重点与难点课题重点:制作泡菜并测定泡菜中亚硝酸盐含量。课题难点:泡菜中亚硝酸盐含量测定。第71页乳酸链球菌1、泡菜制作基础知识(1)乳酸菌
种类:常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌,乳酸杆菌常用于制作酸奶。乳酸杆菌第72页一、泡菜制作分布:空气、土壤、植物体表、人或动物肠道代谢类型及产物(发酵原理):乳酸菌是异养厌氧型细菌,在无氧条件下,将葡萄糖分解成乳酸。C6H12O62C3H6O3酶+能量制作泡菜制作酸奶第73页具有抗生素牛奶能不能发酵成酸奶?为何?不能。由于酸奶制作依靠是乳酸菌发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌生长,因此具有抗生素牛奶不能发酵成酸奶。第74页(2)亚硝酸盐蔬菜
性质:在食品生产中作用:分布在蔬菜、咸菜和豆粉中含量如何?
我国食品卫生标准要求亚硝酸盐含量标准:亚硝酸盐(包括亚硝酸钾和亚硝酸钠)为白色粉末,易溶于水。当人体摄入亚硝酸盐总量达成0.3~0.5g时,会引发中毒,达3g时会引发死亡。豆粉中平均含量能够达成10毫克/千克,而咸菜中平均含量也在7毫克/千克以上。蔬菜中平均含量为4毫克/千克50毫克/千克第75页泡菜长处制作容易成本低廉营养卫生利于贮存风味可口鲜嫩清脆促进食欲容易消化第76页
膳食中绝大多数亚硝酸盐在人体内以“过客”形式随尿排出,只有在特定条件下(合适PH、温度和一定微生物作用),才会转变成致癌物——亚硝胺。大量动物试验表白,亚硝胺具有致癌作用,同步对动物具有致畸和致突变作用。研究表白,人类某些癌症也许与亚硝胺有关。
第77页
泡菜中亚硝酸盐如何生成?发酵早期,泡菜中微生物生长很快,微生物将蔬菜中硝酸盐还原成亚硝酸盐,与此同步,蔬菜中酚类物质和维生素C等物质也会将亚硝酸盐氧化,但总体来说,生成亚硝酸盐大于被还原亚硝酸盐,亚硝化细菌可将发酵过程产生氨氧化成亚硝酸,其与金属离子生成亚硝酸盐,因此,伴随发酵时间进行,亚硝酸盐含量会逐渐上升。伴随微生物代谢活动连续,氧气被消耗殆尽,泡菜坛中环境不利于除乳酸菌以外其他微生物生长。与此同步,蔬菜中亚硝酸盐含量由于被氧化而减少,因此,亚硝酸盐含量会逐渐下降并趋于一种相对稳定数值。问题:亚硝酸盐是由乳酸菌产生吗?只有泡菜中有亚硝酸盐,其他酱菜中具有亚硝酸盐吗?硝酸盐亚硝酸盐还原氧化细菌等微生物维生素C、E和酚类物质亚硝胺第78页
一、基本原理
1.制作泡菜原理。利用乳酸菌在无氧环境下大量繁殖制作泡菜。
根据微生物活动情况和乳酸积累量,能够将泡菜发酵过程分为三个阶段:
发酵早期:大肠杆菌和酵母菌较为活跃,它们进行同型乳酸发酵和薄弱酒精发酵,发酵产物为乳酸、乙醇、醋酸和二氧化碳,一方面消耗掉坛中氧气,另一方面产生较多二氧化碳,产生厌氧环境。乳酸菌和乳酸量都较少,而由于硝酸盐还原菌活动,亚硝酸盐含量有所增加。此时为泡菜初熟阶段,菜质咸而不酸、有生味。
发酵中期:由于乳酸不停积累和缺氧形成,乳酸杆菌开始活跃,并进行同型乳酸发酵(产物只有两分子乳酸)这时乳酸积累量可达0.6%-0.8%,PH为3.5-3.8,其他微生物活动受到抑制,这时泡菜完全成熟,菜有酸味而清香。第79页发酵后期:乳酸含量继续增加,可达1.0%以上,当超出1.2%以上时,乳酸菌活性受到抑制,发酵速度变缓甚至停顿,此时泡菜酸度过高、风味不协调。泡菜制作过程中,许多乳酸菌产生大量乳酸,共同抑制其他菌生长,乳酸积累过多,又会抑制乳酸菌本身生长,以上体现出生物关系依次是A.种内互助、种内斗争、种间斗争
B.种内互助、种间斗争、种内斗争
C.种内斗争、种间斗争、种内互助
D.种间斗争、种内斗争、种内互助答案B第80页制作泡菜流程?需要原料?泡菜坛应具有条件?如何检测泡菜坛是否合格?使用不合格泡菜坛有什么后果?盐水应当按什么百分比配制才较好?为何要将盐水煮沸后又冷却?加盐有何作用?哪些原因会造成泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量?测定原理及其步骤?第81页(2)添加调味品,如花椒、八角等。(3)白酒。(4)食盐和糖。(1)多种蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黄瓜、柿子椒、胡萝卜、白萝卜等。原料第82页①观型体:
以火候老、釉质好、无裂纹、无砂眼、形体美观为佳。②看内壁:
将坛压在水内,看内壁,以无砂眼、无裂纹、无渗水现象为佳。④听声音:
用手击坛,听其声,钢音质量则好,空响、砂响、音破质次。第83页
腌制条件
腌制过程中,要注意控制腌制时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后,亚硝酸盐含量开始下降。第84页结球甘蓝(简称甘蓝),别名洋白菜、圆白菜、包心菜、莲花白菜等,在上海地域又叫卷心菜。
步骤
(1)多种菜洗净并切成3~4cm长小块。第85页(2)将泡菜坛洗净,并用热水洗坛内壁两次。(3)将多种蔬菜、盐水、糖及调味品放入坛,混合均匀。假如希望发酵快些,可将蔬菜在开水中浸1分钟后入坛,再加上某些白酒。(4)将坛口用水封好,避免外界空气进入。(5)泡菜发酵第86页①准备白菜、萝卜、葱、辣椒、蒜等材料。
②切好萝卜、葱、蒜泥、辣椒末等,准备往白菜芯里放。
第87页③白菜切成两半后,放在盐里(水盐比4:1)一夜,第二天,用流动水清洗,再甩干水分。第88页⑤用外层白菜叶子包好里面,放上一周。
④往盐腌过白菜里添加第2项材料,要均匀涂抹。第89页⑥切开发酵泡菜,放在盘子里。
第90页第91页原料加工修整、洗涤、晾晒、切提成条状或片状加调味料装坛加盐盐水冷却泡菜盐水发酵成品测亚硝酸盐含量制作泡菜试验操作过程第92页假如加入某些已经腌制过泡菜汁更加好,这相称于接种已经扩增发酵菌,可减少腌制时间。1、加入白酒有什么作用?白酒可抑制泡菜表面杂菌生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。思考:第93页2、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么成果?水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝作用,空气中21%是氧气,这是最简易造成无氧环境办法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。
3、为何泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成?形成白膜是由于产膜酵母繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌繁殖。第94页
4、为何日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃寄存时间过长、变质蔬菜?有些蔬菜,如小白菜和萝卜等具有丰富硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后寄存太久时,蔬菜中硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。第95页二、亚硝酸盐含量测定1、测定亚硝酸盐含量原理亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,这一反应物再与N-1-萘基乙二胺偶联,结合生紫色产物。将通过反应显色后待测样品与标准液比色,即可计算出样品中亚硝酸盐含量。第96页
测定亚硝酸盐含量原理和比色原理。
(2)重氮反应形成产物与N—1—萘基乙二胺结合形成紫红色染料。将显色反应后样品与已知浓度标准液进行目测比较,能够大体估算出泡菜中亚硝酸盐含量。(也可使用比色仪)(1)在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应偶联第97页第98页
(2)配制标准液
用移液管吸取0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml亚硝酸钠溶液,分别置于50ml比色管中,再取1支比色管作为空白对照。并分别加入2.0ml对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后,再分别加入1.0mlN-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50ml,混匀,观测亚硝酸钠溶液颜色梯度变化。提取剂:分别称取50克氯化镉、氯化钡,溶解于1000ml蒸馏水中,用盐酸调整pH至1。氢氧化铝乳液和2.5mol/l氢氧化钠溶液。第99页
第100页
(3)制备样品处理液
将3坛样品做好标识后,分别称取0.4千克泡菜,榨汁过滤得200ml汁液。取其中100ml至500ml容量瓶中,加200ml蒸馏水、100ml提取剂,混匀,再加入40ml氢氧化钠溶液,用蒸馏水定容至500ml后,立即过滤。将60ml滤液转移至100ml容量瓶中,加入氢氧化铝(吸附脱色)乳液,定容至100ml,过滤。(4)比色
吸取40ml透明澄清滤液,转移到50ml比色管中,将比色管做好标识。按步骤2办法分别加入对氨基苯磺酸溶液和N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,并定容至50ml,混匀,静置15分钟。第101页
观测样品颜色变化,并与标准显色液比较,找出与标准液最相近颜色,统计对应亚硝酸钠含量,并计算。每隔2天测一次,将成果统计下来。计算:如测试液与标准比色液3微克相称,则亚硝酸盐含量计算为3/1000/0.00960.4千克x100/200x60/500x40/100=0.0096取材得滤液200毫升取100毫升500毫升取60毫升100毫升取40毫升第102页3.无机大分子颗粒吸附有机杂质原理和办法。
提取剂:氯化镉和氯化钡作为提取剂作用是提取样品处理液中大分子有机杂质,增加亚硝酸盐溶解度(1)提取剂在配制时为何要加入浓盐酸调整PH至1?氢氧化铝乳液:吸附泡菜汁液中杂质,使泡菜汁透明澄清,方便进行显色反应(2)为何需要用处理样品与提取剂在摇床上振荡提取1小时?(3)为何振荡后还需要加入氢氧化钠溶液?避免形成氢氧化铝氢氧化铬沉淀为使沉淀沉在容器底部中和乳酸和其他酸(4)为何加氢氧化铝?第103页2023年1月4日(封坛前)2023年1月8日2023年1月12日2023年1月15日2023年1月19日0.15
0.600.200.100.101号坛2号坛0.15
0.200.100.050.053号坛0.15
0.800.600.200.20泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化每隔2天测一次,将成果统计下来。第104页三、问题讨论:计算:P57亚硝酸盐含量发酵时间(d)
(1)亚硝酸盐含量在第
4天达成最高峰。(2)亚硝酸盐含量升高原因是蔬菜组织和细菌内
硝酸还原酶活性增强,将硝酸盐还原为亚硝酸。(3)亚硝酸盐含量减少原因是蔬菜组织和细菌内硝酸还原酶活性削弱,硝酸盐还原减少
第105页
例:泡菜是人们日常生活中比较喜欢一种食品,不过泡菜中却具有亚硝酸盐。当人体摄入亚硝酸盐总量达成0.3g—0.5g时,会引发中毒;达成3g时,会引发死亡。我国卫生标准要求,亚硝酸盐残留量在酱菜中不得超出20mg/kg。膳食中绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”形式随尿液排出,只有在特定条件下才会转变成致癌物——亚硝胺。针对泡菜在发酵过程中会产生亚硝酸盐事实,某中学生物活动小组设计试验,探究不一样食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化影响。(1)请补充试验设计空缺内容:①制作泡菜原理:
。②测量指标及办法:亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成玫瑰红色染料。先使泡菜样品及一系列已知浓度亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生显色反应,然后对比颜色,能够估测出泡菜液样品中亚硝酸盐含量。③确定浓度梯度:通过查找资料和初步试验,发觉当食盐浓度为3%下列时,制作泡菜容易发生腐败,而当食盐浓度在8%以上时,制作泡菜又容易成为咸腌菜。因此,分别设计了3%、5%、7%食盐浓度梯度来制作泡菜。利用乳酸菌在无氧环境下大量繁殖制作泡菜第106页④选择试验材料:红萝卜和白萝卜,哪种更适合于用做试验材料?白萝卜
。其原因是:避免植物中色素对显色反应干扰
⑤制作泡菜:将试验材料提成3组制作泡菜,除了试验材料重量相同外,还要确保每组泡菜制作(或培养、发酵)条件
相同。(2)下列图是该生物活动小组记录三种食盐浓度泡菜中亚硝酸盐含量与发酵天数关系图。根据此图试验成果,请你给出制作和食用泡菜最佳指导提议:用5%食盐浓度制作泡菜比较适合食用(1分),但要在发酵时间达11天(或9天)后来食用才比较合适(1分)。
⑥从第三天开始,定期测定泡菜中亚硝酸盐含量。请帮该小组设计一种用于试验统计表格。第107页你给出此提议理由是:食盐浓度为3%泡菜中亚硝酸盐含量总体上是3坛泡菜中最高;食盐浓度为5%泡菜中亚硝酸盐含量变化最快,它最高值是三坛中最高,说明乳酸菌代谢最旺盛,但从发酵11天后亚硝酸盐降到最低值;而食盐浓度为7%泡菜中亚硝酸盐含量变化不大,虽始终处于较低数值,但容易成为咸腌菜。(3分)第108页第109页果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测措施酵母菌,真菌,兼性厌氧醋酸菌,细菌,好氧菌毛霉,真菌,兼性厌氧乳酸菌,细菌,厌氧菌酵母菌无氧呼吸产生酒精20℃无氧重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌有氧呼吸产生醋酸30~35℃通入氧气品尝、pH试纸检测毛霉产生蛋白酶和脂肪酶15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温,无氧条件第110页■高中生物课件(人教课标版)第111页专项2:微生物培养与应用课题2:
微生物试验室培养第112页特点:构造都相称简单,个体多数十分微小.一般要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有甚至没有细胞构造.且体内一般不具有叶绿素.不能进行光合作用.微生物包括哪五类:病毒细菌放线菌真菌原生动物
原核生物界
原生生物界真菌界病毒界一、基础知识:
(一)微生物:是一切肉眼看不见或看不清楚微小生物总称.第113页病毒构造第114页病毒
第115页SARS冠状病毒、禽流感病毒第116页朊病毒(蛋白质病毒)第117页病毒增殖:第118页细菌外形与大小图1-1常见三种细菌典型形态A.球菌
B.杆菌C.弧菌第119页芽孢
有些细菌在一定条件下,细胞里面形成一种椭圆形休眠体,叫做芽孢。芽孢壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣环境有很强抵抗力。例如,有细菌芽孢,煮沸3小时后来才死亡。芽孢又小又轻,能够随风飘散。当环境合适(如温度、水分合适)时候,芽孢又能够萌发,形成一种细菌.第120页菌落:单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一种肉眼可见,具有一定形态构造子细胞群体,叫做菌落。菌落是判定菌种主要根据。第121页细菌营养类型根据细菌所利用能源和碳源不一样,将细菌分为两大营养类型。自养菌:分类,举例?异养菌:腐生菌寄生菌大部分病原菌光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌第122页菌落细菌菌落特性因种而异第123页放线菌1、构造:单细胞原核分支状菌丝(基内菌丝、气生菌丝)第124页链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发觉了几千种抗生素,其中2/3是由放线菌产生
应用:第125页真菌第126页如图是酵母菌电子显微镜下形态构造酵母菌和霉菌青霉第127页生殖直立菌丝营养菌丝腐生生活孢子生殖第128页第129页(二)培养基
培养基(培养液)是由人工办法配制而成,专供微生物生长繁殖使用混合营养液。(1)按物理状态分:固体培养基和液体培养基、半固体培养基。(2)按功能分:选择培养基和鉴别培养基。(3)按成份分:天然培养基和合成培养基。1.培养基类型第130页固体培养基:菌落第131页液体培养基:表面生长均匀混浊生长沉淀生长第132页半固体培养基:无动力有动力(弥散)第133页2.不一样微生物往往需要采取不一样培养基配方3.不论哪种培养基,一般都具有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气要求.第134页4.培养基用途液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),判定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基:动力检测第135页(三)无菌技术1.无菌技术概念
无菌操作泛指在培养微生物操作中,所有避免杂菌污染办法。成功地培养微生物关键。第136页(1)消毒定义:2.消毒与灭菌概念及二者区分
(2)灭菌定义:3.常用消毒与灭菌办法第137页1、灼烧灭菌灭菌办法:第138页2、干热灭菌:160-170℃下加热1-2h。3、高压蒸气灭菌:100kPa、121℃下维持15-30min.第139页1.无菌技术除了用来避免试验室培养物被其他外来微生物污染外,尚有什么目标?2.请你判断下列材料或用具是否需要消毒或灭菌。假如需要,请选择合适办法。(1)培养细菌用培养基与培养皿(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)试验操作者双手答:无菌技术还能有效避免操作者本身被微生物感染。答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。旁栏思考第140页微生物试验室培养基本操作程序1、器具灭菌2、培养基配制3、培养基灭菌4、倒平板5、微生物接种6、恒温箱中培养7、菌种保存第141页三、试验操作
(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌)第142页1.计算、称量2.溶化3.调pH:pH7.6
4.过滤:这一步能够省去。5.分装:分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引发污染。分装三角烧瓶量以不超出三角烧瓶容积二分之一为宜。6.加塞7.包扎操作步骤第143页8.灭菌:
将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121℃,灭菌15~30min。将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160~170℃下灭菌2h。
9.倒平板:
待培养基冷却到50℃左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观测平板,无杂菌污染才可用来接种.10.无菌检查:将灭菌培养基放入37℃温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。第144页(二)纯化大肠杆菌接种办法有:平板划线法和稀释涂布平板法微生物接种技术:第145页
平板划线操作办法交叉划线法连续划线法
第146页平板划线操作第147页第148页一旦划破,会造成划线不均匀,难以达成分离单菌落目标;二是存留在划破处单个细胞无法形成规矩菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一种条状菌落。第149页第150页问题讨论
1.为何在操作第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为何?
答:操作第一步灼烧接种环是为了避免接种环上也许存在微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留菌种,使下一次划线时,接种环上菌种直接起源于上次划线末端,从而通过划线次数增加,使每次划线时菌种数目逐渐减少,方便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。第151页2.在灼烧接种环之后,为何要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。3.在作第二次以及其后划线操作时,为何总是从上一次划线末端开始划线?
答:划线后,线条末端细菌数目比线条起始处要少,每次从上一次划线末端开始,能使细菌数目伴随划线次数增加而逐渐减少,最后能得到由单个细菌繁殖而来菌落。第152页稀释涂布平板法第153页第154页第155页问题讨论涂布平板所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作?
应从操作各个细节确保“无菌”。例如,酒精灯与培养皿距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。第156页微生物恒温培养微生物恒温培养第157页微生物恒温培养第158页菌种保存1、临时保藏:接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。2、长期保存:甘油冷冻管藏法第159页本课题知识小结:第160页四、课题成果评价
(一)培养基制作是否合格假如未接种培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基制备是成功,不然需要重新制备。(二)接种操作是否符合无菌要求假如培养基上生长菌落颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落特点,则说明接种操作是符合要求;假如培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作尚未达成要求,需要分析原因,再次练习。(三)是否进行了及时细致观测与统计培养12h与24h后大肠杆菌菌落大小会有显著不一样,及时观测统计同窗会发觉这一点,并能观测到其他某些细微变化。这一步要求主要是培养学生良好科学态度与习惯。第161页【典例解析】
例1.关微生物营养物质论述中,正确A.是碳源物质不也许同步是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
解析:不一样微生物,所需营养物质有较大差异,要针对微生物详细情况分析。对于A、B选项,它体现是不完整。有碳源只能是碳源,如二氧化碳;有碳源可同步是氮源,如NH4HCO3;有碳源同步是能源,如葡萄糖;有碳源同步是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量情况还是存在,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。答案:D第162页例2.下面向发酵工程中灭菌理解不正确是A.避免杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前答案:B
解析:灭菌是微生物发酵过程一种主要步骤。A说是灭菌目标,由于发酵所用菌种大多是单一纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),因此是正确;B是错误,由于灭菌目标是避免杂菌污染,但实际操作中不也许只消灭杂菌,而是消灭所有微生物。C是正确,由于与发酵有关所有设备和物质都要灭菌;发酵所用微生物是灭菌后专门接种,灭菌必须在接种前,假如接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。第163页编号成份含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例3.右表是某微生物培养基成份,请据此回答:(1)右表培养基可培养微生物类型是
。(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想挥霍此培养基,可再加入
.自养型微生物
含碳有机物
第164页(3)若除去成份②,加入(CH2O),该培养基可用于培养
。(4)表中营养成份共有
类。(5)无论何种培养基,在多种成份都溶化后分装前,要进行是
。(6)右表中各成份重量确定标准是
。(7)若右表培养基用于菌种判定,应当增加成份
。固氮微生物
3调整pH
依微生物生长需要确定
琼脂(或凝固剂)
第165页
理解有关微生物及培养基基础知识,进行无菌技术操作,进行微生物培养。
一、课题目标:
掌握培养基制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,纯熟、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。
无菌技术操作。二、课题重点和难点:三、技能目标:第166页倒平板技术第167页1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么措施来估计培养基温度?问题讨论
答:能够用手触摸盛有培养基锥形瓶,感觉锥形瓶温度下降到刚才不烫手时,就能够进行倒平板了。2.为何需要使锥形瓶瓶口通过火焰?
答:通过灼烧灭菌,避免瓶口微生物污染培养基。第168页3.平板冷凝后,为何要将平板倒置?4.在倒平板过程中,假如不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为何?
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既能够使培养基表面水分更加好地挥发,又能够避免皿盖上水珠落入培养基,造成污染。
答:空气中微生物也许在皿盖与皿底之间培养基上滋生,因此最佳不要用这个平板培养微生物。第169页■高中生物课件(人教课标版)第170页专项2微生物培养与应用第171页课题2
土壤中分解尿素细菌分离与计数第172页课题背景
尿素是一种主要农业氮肥。不过尿素并不能直接被农作物吸取。只有当土壤中细菌将尿素分解成氮之后,才能被植物利用。土壤中细菌之因此能分解尿素,是由于它们能合成脲酶。尿素最初是从人尿液中发觉。
1828年,德国化学家维勒成功地通过无机物化学反应合成了尿素,揭开了历史上人工合成有机物新篇章。第173页尿素第174页研究思绪
筛选菌株
PCR自动化需要耐高温DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右高温。科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温TaqDNA聚合酶。为何Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?由于热泉70--80℃高温条件淘汰了绝大多数微生物,而使耐高温Taq细菌脱颖而出。第175页试验室微生物筛选原理
应用筛选Taq细菌原理,人为提供有助于目标菌株生长条件(包括营养、温度、pH等),同步抑制或制止其他微生物生长。第176页统计菌落数目
常用稀释涂布平板法统计样品中活菌数目。样品稀释度足够高时,培养基表面生长一种菌落,起源于样品稀释液中一种活菌。通过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约具有多少活菌。为确保成果精确,一般选择菌落数30—300平板计数。第177页培养基上菌落第178页设置对照设置对照主要目标是排除试验组中非测试原因对试验成果影响,提升试验成果可信度。第179页试验设计结合课本上给出资料与试验流程示意图,思考有关问题,然后进行试验设计,并且些出详细试验方案。资料一土壤取样资料二样品稀释资料三微生物培养与观测第180页操作提醒无菌操作
1.取土样小铁铲和盛土样信封在使用前都需要灭菌。
2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好土样倒入烧瓶中,塞好棉塞。
3.在稀释土壤溶液过程中,每一步都要在火焰旁操作。第181页做好标识本试验使用平板和试管比较多。为避免混同,最佳在使用前就做好标识。例如:在标识培养皿时,应注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品稀释度。
第182页规划时间对于耗时较长生物试验,我们需要实现规划时间,方便提升工作效率,在操作时愈加有条不紊。第183页成果分析与评价结合对照,分析培养物总共是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出某些菌落?是否取得了某一稀释度下,菌落数目在30—300平板。在这一稀释度下,是否最少有两个平板菌落数相接近?你统计每克土壤中具有能分解尿素细菌菌落数是多少?与其他同窗成果接近吗?假如差异很大,也许是什么原因引发?第184页课题延伸本课题对能分解尿素细菌进行了初步筛选,这只是纯化菌种第一步。对分离菌种作深入判定,还需要借助生物化学办法。我们能够通过检测培养基pH变化来判断细菌是否分解尿素化学反应是否发生。批示剂也能够帮助我们精确地判定该种细菌能否分解尿素。第185页有关链接活菌计数技术广泛应用于土壤含菌亮测定、食品卫生和水源污染度检查等方面。假如你赶爱好,能够从下列项目中选做一种。空气中微生物总数检测水中细菌总数检测牛奶中细菌分离与计数土壤中真菌(或放线菌)分离与计数第186页■高中生物课件(人教课标版)第187页课题3:
分解纤维素
微生物分离第188页教学目标:1、懂得纤维素酶种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素微生物试验办法第189页阅读课本27页基础知识部分第一、二段,回答下列问题:1、纤维素在生物圈分布情况?2、纤维素酶组成及作用?纤维素是地球上含量最丰富多糖类物质。植物根、茎、叶等器官都具有大量纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高天然产物。纤维素酶是一种复合酶,一般以为它最少包括三种组分,即CX酶、
C1酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。一、纤维素和纤维素酶第190页二、纤维素分解菌筛选阅读课本课本28页有关部分,回答下列问题:1、纤维素分解菌筛选办法2、纤维素分解菌筛选办法原理刚果红染色法:这种办法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选刚果红是一种染料,它能够与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红—纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解为中心。这样我们能够通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈
第191页练一练:1、下列有关纤维素酶说法,错误是A、纤维素酶是一种复合酶,最少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法能够筛选出纤维素分解菌,下列说法错误是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈,则说明已筛选出了纤维素分解菌第192页三、试验操作土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上挑选产生透明圈菌落第193页土壤取样取样环境是如何,作出这种选择理由是什么?选择纤维素丰富环境,如树林中数年落叶形成腐殖土,数年积累枯枝败叶等等。生物与环境互相依存关系,在富含纤维素环境中纤维素分解菌含量相对提升,因此从这种土壤中取得目标微生物几率要高于一般环境第194页选择培养1、选择培养目标:增加纤维素分解菌浓度,以确保能够从样品中分离到所需要微生物2、制备选择培养基参照课本29页旁栏中百分比配备,回答下列问题a、旁栏中配方是液体培养基还是固体培养基?为何?b、这个培养基对微生物是否具有选择作用?假如具有,是如何进行选择?
c、你能否设计一种对照试验,说明选择培养基作用是液体培养基,原因是配方中无凝固剂有选择作用,本配方中碳源是纤维素,因此能分解纤维素微生物能够大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照第195页3、操作办法:将土样加入装有30ml选择培养基锥形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养1~2天,直至培养液变浑浊。也可反复选择培养思考:为何选择培养能够“浓缩”所需微生物?在选择培养条件下,能够使那些能够适应这种营养条件微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件微生物繁殖被抑制,因此能够起到“浓缩”作用第196页梯度稀释按照课题1稀释操作办法,将选择培养后培养基进行等比稀释,稀释最大倍数到106第197页将样品涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上1、制备培养基:参照旁栏中百分比2、涂布平板:将稀释度为104~106菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上,30℃倒置培养第198页挑选产生透明圈菌落参照课本刚果红染色法,挑选产生透明圈菌落,一般即为分解纤维素菌落第199页刚果红染色法办法一:先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应办法二:在倒平板时就加入刚果红思考:这两种办法各有哪些长处与不足办法一缺陷是操作啰嗦,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;长处是这样显示出颜色反应基本上是纤维素分解菌作用办法二长处是操作简便,不存在菌落混杂问题缺陷一是由于培养基中还具有淀粉类物质,能够使能产生淀粉酶微生物出现假阳性反应;缺陷二有些微生物具有降解色素能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成显著透明圈,与纤维素分解菌不易辨别第200页练一练1、在富含纤维素环境中寻找纤维素分解菌,符合下列哪一生物学观点?()A、生物构造与功能相适应观点B、生物构造与功能整体性观点C、生物与环境相适应观点D、生物发展进化观点2、从土壤中分离取得某种微生物步骤是()①土壤取样②梯度稀释③选择培养④菌悬液涂布平板⑤挑选出单个菌落A、①②③④⑤B、①③②④⑤C、①②④③⑤D、①④②③⑤3、有关选择培养正确论述是()A、能够增加纤维素分解菌浓度B、能够减少纤维素分解菌浓度C、所用培养基是固体培养基D、所用培养基是平板培养基CBA第201页四、成果分析与评价(一)培养基制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落(二)分离成果是否一致设置对照,若对照培养基在培养过程中无菌落生长则说明培养基制作合格。假如观测到产生透明圈菌落,则说明也许取得了分解纤维素微生物。假如不一样,分析产生不一样成果原因。第202页五、课题延伸本课题对分解纤维素微生物进行了初步筛选,不过这只是分离纯化第一步。为确定得到是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶试验,纤维素酶测定办法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生葡萄糖进行定量测定。第203页作业:完成基础训练19-22页有关题目第204页■高中生物课件(人教课标版)第205页
组织培养营养繁殖扦插嫁接压条
第206页课题1菊花组织培养第207页活动1:什么是细胞分化?细胞分化原因和成果?愈伤组织是如何形成?有什么特点?组织培养过程?以及组织培养理论基础?脱分化、再分化?影响组织培养原因?菊花组织培养过程,及注意问题?第208页
是指在人工培养基上,离体培养植物器官、组织、细胞,并使其生长、增殖、分化以及再生长成植株技术。组织培养1、细胞分化原因是什么?在特定时间和空间条件下,基因选择性体现。思考:(一)植物组织培养基本过程细胞分化个体发育中细胞在形态、构造和生理功能上出现稳定性差异过程第209页植物组织培养过程示意图2、上面示意图中尚有什么地方不够完善?没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。第210页离体植物器官、组织、细胞脱分化愈伤组织再分化根芽植物体植物组织培养基本过程第211页愈伤组织愈伤组织是通过细胞分裂形成,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态薄壁细胞。第212页(二)影响植物组织培养原因
材料选择、营养成份、激素、一定外界原因(温度、空气、无菌环境、适合PH、适时光照等)。第213页MS固体培养基成份及百分比同微生物培养基相比,MS培养基配方有哪些显著不一样?第214页
微生物培养基以有机营养为主。与微生物培养不一样,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须大量元素和微量元素两大类。阅读课文,思考下列问题1.同微生物培养基相比,MS培养基配方有哪些显著不一样?2、你以为组织培养过程中,成功关键有哪些?这些步骤合适条件是什么?
组织脱分化及愈伤组织再分化。
植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化最主要原因是植物激素。第215页激素配比对组织培养影响在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用先后次序、用量百分比等都影响成果。
高利于根分化、抑制芽形成生长素/细胞分裂素低利于芽形成适中利于愈伤组织形成
第216页第217页活动2:用自己话把菊花组织培养操作流程给描述出来?(提醒:如何配制MS培养基?外植体消毒应如何进行?接种、培养、移栽时应注意什么问题?)第218页1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入4、环境不清洁结合录像外植体灭菌与接种操作,谈谈组织培养污染主要途径及如何预防污染?第219页污染预防措施(一)避免外植体带菌(二)确保培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)确保接种与培养环境清洁第220页试评价下列操作正确是否第221页本课题内容小结菊花组织培养基础知识试验操作植物体组织培养影响组织培养原因细胞分化细胞全能性组织培养过程营养激素环境条件MS固体培养基制备外植体消毒接种培养移栽栽培第222页■高中生物课件(人教课标版)第223页课题2:
月季花药培养第224页一、课题目标说出被子植物花粉发育过程及花药培养产生花粉植株两种途径,说出影响花药培养原因,学习花药培养基本技术,尝试用月季或其他植物花药进行培养。二、课题重点与难点课题重点:选用合适培养材料和培养基。课题难点:选用合适培养材料和培养基。第225页(一)被子植物花粉发育被子植物花构造是如何?观测下列图,和减数分裂比较,你能指出对应时期吗?又有何特点?第226页雌蕊:花丝花药:囊状构造,内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞通过减数分裂而形成,因此,花粉是单倍体生殖细胞。花粉发育要经历:四分体时期、单核期、双核期第227页注意:①二核花粉粒:成熟花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)②三核花粉粒:有些植物花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样花粉在成熟时,具有一种营养核和两个精子。③两个精子和一种营养核基因型相同。④1花粉母细胞4个小孢子减分有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有分8个精子第228页又称人造种子、合成种子或无性种子,就是将组织培养所产生体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体,包裹在能提供营养胶囊(人造胚乳)里,再在外面包上一层具有保护功能和避免机械损伤外膜(人造种皮),造成一种类似种子构造,能在一定条件下萌发生长,形成完整植株。第229页(二)产生花粉植株两种途径有哪两种途径?原因是什么?花药中花粉花药中花粉胚状体愈伤组织丛芽丛芽生根移栽花药培养产生花粉植株两种途径第230页(三)影响花药培养原因1、材料选择不一样植物同一植物不一样生理情况(花期早期-初花期)合适花粉发育期(单核居中期与靠边期之间)另外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等2、培养基组成第231页材料选择:花期早期时花药比后期更容易产生花粉植株。一般,月季花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季初花期。选择合适花粉发育时期也是提升诱导成功率主要原因。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧时期,花药培养成功率最高。为了挑选到单核期花药,一般选择完全未开放花蕾。第232页为何花瓣松动会给材料消毒带来困难?答:花瓣松动后,微生物就也许侵入到花药,给材料消毒带来困难。第233页(一)材料选用染色镜检(二)材料消毒酒精、氯化汞、次氯酸钙(三)接种和培养成果分析与评价第234页
选择花药时,一般通过镜检来确定其中花粉是否处于合适发育期。最常用办法有醋酸洋红法。不过,某些植物花粉细胞核不易着色,需采取焙花青-铬矾法,这种办法能将花粉细胞核染成蓝黑色。第235页1、花蕾用V/V为70%酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面水分4、放入质量分数为0.1%氯化汞溶液中2~4分钟(也可质量分数为1%次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)5、无菌水冲洗3~5次用于培养花药,事实上多数未熟,由于它外面有花萼、花瓣或颖片保护,一般处于无菌状态,因此只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。第236页
灭菌后花蕾,要在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时,要尽可能不损伤花药(不然接种后,容易从受伤部位产生二倍体愈伤组织),同步还要彻底清除花丝,由于与花丝相连花药不利于愈伤组织或胚状体形成。一般每瓶接种花药7-10个,温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般通过20-30天培养后,会发觉花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,方便深入分化出再生植株。第237页
假如花药开裂释放出胚状体,则一种花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新培养基上,不然这些植株将很难分开。在花药培养中,尤其是通过愈伤组织形成花粉植株,经常会出现染色体倍性变化。(主要原因是营养核和生殖核融合造成。)第238页植物组织培养技术与花药培养技术异同点项目相同点不一样点植物组织培养技术离体植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。外植体为体细胞,染色体数无需加倍。花药培养技术取材为花药,培养为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株染色体数,并且为纯种。第239页三、课题背景分析课题背景介绍了花药培养历史以及花药培养在育种工作上意义。有条件话能够尝试某种植物花药培养。被子植物花粉发育知识重点:1.花粉是单倍体生殖细胞;2.花粉发育要经历不一样时期。产生花粉植株两种途径知识重点:花药培养产生花粉植株两种途径。影响花药培养原因知识重点:选用合适材料和培养基组成是花粉植株诱导成功关键。第240页练习1.答:F2代紫色甜玉米基因型组成也许为Aasusu或AAsusu。假如利用常规育种办法,将F2代中紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusu)进行测交,能够选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种办法比较繁琐,耗时也较长,需要最少三年选种和育种时间。假如利用花药培养技术,在F1代产生花粉中就也许有Asu组合,再将花粉植株进行染色体加倍,就能够直接得到紫色甜玉米纯合体(AAsusu)。这种办法能够大大缩短育种周期。第241页■高中生物课件(人教课
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