药敏试验及药敏试验结果介绍

药敏试验及药敏试验成果分析1精选ppt第1页一、药敏试验MIC：在与微生物生长速率有关特定期间间隔内，一般是18－二十四小时，能够抑制被测菌生长最低药品浓度。对倍稀释长处：操作容易敏感株MIC呈正态分布辨别异常(R)与敏感(S)菌群2精选ppt第2页药敏试验折点建立1.MIC分布

2.药代动力学和药效学

定MIC折点3.临床疗效和细菌清除率4.抑菌圈直径分布…定抑菌圈折点统计学线性回归计算错误率：尽也许减少极主要误差(假敏感率)3精选ppt第3页MIC分布4精选ppt第4页药代动力学和药效学药代动力学：药品吸取，分布，代谢，排泄药效学：药品对机体作用时间依赖型（％T>MIC〕：β－内酰胺类，大环内酯类浓度依赖型（AUC/MIC比率〕：AGS,FQ这些参数可用于计算具有最佳药效给药方案5精选ppt第5页MIC与抑菌圈直径线性关系耐药中介敏感RISLog2.MICD1d2抑菌圈直径（mm)6精选ppt第6页抑菌圈直径与MIC关系7精选ppt第7页不一样国家判定折点

－也许不一样原因：用药剂量不一样，服药间隔不一样评价敏感时较保守更强调检测出耐药株（即特定耐药群）技术原因：接种、培养基8精选ppt第8页敏感性分类(NCCLS定义)敏感（Susceptible）用常规用量治疗有效常规用药时达成平均血药浓度超出细菌MIC5倍以上。耐药（Resistance）用常规用量治疗不能抑制细菌生长MIC高于药品在血、体液中也许达成浓度9精选ppt第9页敏感性分类（2）中介(Intermediate)MIC接近血、体液中药品浓度，治疗反应率低于敏感株药品生理浓集部位有效(尿－FQ)加大用药剂量也许有效缓冲区：避免操作系统误差造成重大成果判定错误10精选ppt第10页药敏试验办法学半定量…纸片扩散法(抑菌圈直径)MIC法：稀释法(肉汤、琼脂)自动化仪法抗生素连续梯度法(Etest)流式细胞仪11精选ppt第11页药敏试验办法选择纸片法有独特之处选药灵活、便宜、易懂MIC法：商品肉汤法(自动化法)↑可用于厌氧菌、苛氧菌计算机管理迅速，但也许有错误（如诱导型菌）新药评价12精选ppt第12页药敏试验办法1（纸片扩散法〕材料：浸有一定Abs干燥园滤纸片步骤：制备菌悬液－涂平板－贴纸片－孵育－卡尺测量抑菌圈直径－判定R、I、S长处：选药灵活、便宜、一种平皿可测多种药缺陷：影响原因多适用于快生长菌、部分苛养菌13精选ppt第13页纸片扩散法－影响原因MIC接种菌量细菌生长率抗生素含量、扩散性平皿厚度温度，预孵育时间14精选ppt第14页纸片扩散法－标准化NCCLS：美国试验室标准化委员会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards)每年修订更改包括质控新药判定标准特殊耐药性检测15精选ppt第15页NCCLS法规要求纸片含量、接种浓度、培养基、平皿厚度、判定标准、质控要求常规测试报告抗生素不一样药判定标准不一样不一样菌判定标准也不一样16精选ppt第16页常规测试并报告药品分组(1)

肠杆菌科

绿脓和非肠杆菌科一级氨苄 头孢他啶唑林，庆大 庆大，替卡，哌拉二级阿米卡星 阿米卡星氨苄/舒，阿莫/克 吡肟，哌酮，氨曲南头孢肤肟，头霉 环丙，亚胺培南，替卡/克噻肟，曲松，环丙 妥布，磺胺亚胺培南，替卡，哌拉三级氨曲南，头孢他啶 头孢曲松卡那，奈替，妥布 氯霉素，奈替四环素，氯霉素 17精选ppt第17页常规测试并报告药品分组(2)

葡萄球菌

肠球菌一级苯唑，青霉素 青霉素，氨苄二级红霉素类 万古霉素克林，万古三级氯霉素 庆大18精选ppt第18页常规测试并报告药品分组(3)

流感嗜血杆菌

肺炎链球菌一级氨苄，青霉素 青霉素，红霉素TMP/SMZTMP/SMZ二级头孢肤肟，噻肟 氧氟，四环素他啶，氯霉素万古霉素三级阿奇，头孢克罗 氯霉素，利福平环丙，亚胺培南 利福平，四环素19精选ppt第19页预报用药(一)

测试药 菌名 推测其他药品敏感性

苯唑西林 葡萄球菌 所有β－内酰胺类四环素 所有（除葡 多西环素，米诺环素

萄球菌和不 动杆菌〕红霉素 G＋球菌 罗红，克拉，阿奇克林霉素 所有 林可霉素20精选ppt第20页预报用药(二)测试药 菌名 推测其他药品敏感性氨苄西林 肠球菌 青霉素青霉素G 葡萄球菌 氨苄，美洛，替卡头孢噻吩 肠杆菌科 拉定，头孢氨苄，克罗奈啶酸s

肠杆菌科 所有FQs万古霉素s

所有 替考拉宁s21精选ppt第21页纸片扩散法操作规程(一)培养基：MH(反复性好，低抑制剂，营养好)厚度：4mmPH：7.2~7.4pH低时，氨基糖甙,大环内酯↓pH高时，青霉素类活性↑离子浓度(Ca2+,Mg2+)影响氨基糖甙类、四环素对Pae活性高时，抑菌圈↓；22精选ppt第22页纸片扩散法操作规程(二)接种：纯新鲜菌落，0.5号麦氏比浊管菌悬液在15分钟内种入平皿内纸片中心间距>=24mm孵育：CO2影响Ags,Tet,Macrolides质控:ATCC25922,35218ATCC27853,ATCC2592323精选ppt第23页纸片扩散法成果判定1.

先看菌名（判定到种〕2.不一样药品使用不一样折点药名 菌名 R S 菌株1 菌株2Pip/Taz 绿脓 ≤17 ≥18 16R

30SCAZ 绿脓 ≤14 ≥18 16I

19S3.同是S时，偏离敏感折点越高药,

MIC越低，活性也越高24精选ppt第24页抑菌圈分布25精选ppt第25页抑菌圈分布26精选ppt第26页非NCCLS系统扩散试验办法 国家 学会 培养基 评论比较法 UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsStokes UK BSAC Iso-Sensitest 不校正MICsSFM 法国 SFM MH 与NCCLS相近DIN 德国 DIN MH 与NCCLS相近SIR 瑞典 SMS PDM－ASM MIC有关值低Neo-sensitabs丹麦、比利时 MH 药片，易保存双歧 澳大利亚 Sensitest 无中介27精选ppt第27页药敏试验错误起源(一)每个系统特有不足（快生长菌〕培养基（成份、厚度、pH、离子浓度）多种材料正确保存(纸片－20℃)操作步骤纯菌、35℃、16－28h葡萄球菌、肠球菌24h28精选ppt第28页药敏试验错误起源(二)体内、体外试验不一致性某些菌测某些药，成果有误头孢菌素、氨基糖甙类：沙门菌、志贺菌头孢菌素：李斯特菌属头孢菌素、氨基糖、克林、TMP/SMZ：肠球菌Beta－内酰胺类：MRS虽然敏感，也应报告耐药29精选ppt第29页问题菌和耐药机制有些菌无标准化药敏试验棒杆菌、芽胞杆菌、气单胞菌、巴斯德菌某些耐药机制需要多种检测办法诱导型：VanB,BushI型酶MRS异质型体现ESBL药敏也许无法检出新出现耐药，VISA30精选ppt第30页药敏试验办法2－肉汤稀释法4 8 16 32 64128256ug/ml混

混清抗生素倍比稀释，种菌105CFU/ml，孵育35℃，16-20h，判读31精选ppt第31页药敏试验办法2－肉汤稀释法调整离子浓度MH肉汤宏量肉汤法（2ml,13x100mm） 微量肉汤法（0.1ml,微量板）自动化仪长处：精确，可靠，可用于研究缺陷：劳动强度大细菌生长情况不可查32精选ppt第32页药敏试验办法3－琼脂稀释法浓度16 32 64128256ug/ml制备含对倍抗生素浓度梯度平板，制备菌悬液，点种菌，104/每个点，孵育，判读成果33精选ppt第33页药敏试验办法3－琼脂稀释法长处：金标准精确可靠可同步测定多株菌（40株）细菌生长情况可查缺陷：测多种药时劳动强度大制备平皿费时费劲34精选ppt第34页药敏试验办法4－Etest法

细菌生长区Etest塑料条椭圆形细菌生长抑制区2561288016判读抑菌浓度（MICug/ml)35精选ppt第35页药敏试验办法4－Etest法长处连续浓度梯度，与琼脂稀释法有关性好影响原因少，稳定性高操作简单，省时缺陷：昂贵用途：快生长菌，苛养菌，厌氧菌，酵母菌， 分枝杆菌36精选ppt第36页评价药品体外抗菌活性指标MIC50,MIC90,MIC均值，MIC范围，R，I，SMIC50/MIC90：MIC从小到排列，位于第50/90百分位菌株MIC值单纯比较MIC50，MIC90是片面，还要同步看平均MIC及MIC范围同步结合R，I，S，（不一样药品血浓度不一样，安全范围不一样〕37精选ppt第37页抗生素细菌人体RESISTANCEPHARMACODYNAMICSINFECTIONIMMUNITYSIDEEFFECTSPHARMACOKINETICS抗生素、细菌、人体38精选ppt第38页39精选ppt第39页TimeaboveMIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

TimeaboveMICTimeAntibioticconcentration(ug/ml)2DrugADrugBABDrugApresentatconcentrationof2ug/mlfor50%ofdosingintervalDrugBpresentatconcentrationof2ug/mlfor30%ofdosinginterval468040精选ppt第40页RelationshipbetweenTimeaboveMICand

efficacyinanimalinfectionmodels020406080100020406080100TimeaboveMIC(%)PenicillinsCephalosporinsMortalityafter4daysoftherapy(%)Craig.DiagnMicrobiolInfectDis1996;25:213–21741精选ppt第41页Antibiotic

concentrationMIC

TimeAreaunderthecurveoverMIC24-hrAUC/MICiscorrelatedwithoutcomeofinfection,themagnituderequiredforsuccessandMICatwhichthisoccursbecomesthePDbreakpoint

24-hrAUC/MIC

CorrelationofserumpharmacokineticswithMIC(susceptibility)

ofanorganism

42精选ppt第42页Therelationshipbetween‘timeaboveMIC90’andbacteriologicalcureinS.pneumoniae(red)and

H.influenzae(blue)inotitismediaandsinusitisOtitismediaSinusitis‘TimeAboveMIC’(%ofdosinginterval)Bacteriologicalcure(%)020406080100020406080100Craig,ECCMID2023,Stockholm,Sweden43精选ppt第43页抗生素选择时需考虑原因药品感染部位浓度对细菌MIC成果微生物学抗菌机制抗菌谱药代动力学吸取、分布、代谢、排泄给药方案药效学时间/浓度依赖型杀菌剂/抑菌剂组织渗入抗菌时效临床效果细菌清除患者依从性耐受性耐药产生44精选ppt第44页抗生素治疗失败主要原因病人有关原因依从性差不合适给药途径免疫抑制病灶药品原因给药剂量与方式不当药效学考虑欠妥药品失活微生物有关原因病原确立错误治疗中出现耐药抗菌活性不足接种效应其他原因非感染（误诊）基础疾病45精选ppt第45页抗生素药效学与药代动力学关系研究

PK/PD—药代条件下药效

PARAMETERS：PK：Cmax、AUC、T1/2

PD：MIC

PK/PD：AUC/MICCmax/MICT>MIC46精选ppt第46页抗生素药效学与药代动力学关系研究

抗生素PK/PD分类抗生素分类PK/PD参数药品时间依赖型（短PAE）T>MIC青霉素类、头孢菌素类、氨曲南、碳青霉烯类、大环内酯类、克林霉素、恶唑烷酮类、氟胞嘧啶时间依赖型（长PAE）AUC24/MIC链阳霉素、四环素、万古霉素、替考拉林、氟康唑、阿齐霉素浓度依赖型AUC24/MICorCmax/MIC氨基糖苷类、氟喹诺酮类、daptomycin、酮内酯、甲硝唑、两性霉素B47精选ppt第47页抗生素药效学与药代动力学关系研究

PK/PD研究应用—给药方案制定与优化48精选ppt第48页抗菌药品合理应用药理学考虑药动学/药效学参数与抗菌效力（动物模型）参数 药品 高于MIC时间 青、头孢、碳青烯、氨曲、大环、克林 24hAUC/MIC 氨基糖苷、氟喹酮、阿奇 峰值/MIC 四环、万古、链阳

氨基糖苷、氟喹酮

49精选ppt第49页

第一大类：

时间依赖杀菌作用（连续后效应------无或轻、中度）-LAbx（P、Cef、氨曲、碳烯类），克林和大环

（红、克）、四环在MIC4-5倍时杀菌率即处于饱合杀菌范围主要依赖于接触时间超出MIC时间是与临床疗效有关主要参数50精选ppt第50页氨基糖苷类属于浓度依赖性抗生素体内外研究证明Cmax/MIC为10左右为最佳治疗参数对革兰阳性、阴性菌均具有PAE（0.75~7.5hr）。第二大类:氨基糖苷类一日一次给药51精选ppt第51页低浓度易诱导适应性耐药高浓度不易选择耐药高剂量少次数给药可避免耐药氨基糖苷类一日一次给药52精选ppt第52页氨基糖苷类药品每日一次给药理论根据充足临床疗效不变或更加好毒副反应少更具经济学价值氨基糖苷类一日一次给药53精选ppt第53页二、药敏试验成果分析54精选ppt第54页分类方式不也许成果罕见成果（值得注意）罕见矛盾成果有提醒意义成果，成果需要修正

55精选ppt第55页肠杆菌科细菌成果

A.假如三代和四代头孢菌素R/I，而一代，二代头孢或头孢克肟、头孢泊肟、氨基青霉素敏感。这样成果不也许B.脲基青霉素R/I，而氨基和/或羧基青霉素S。这样成果不也许。C.粘质沙雷菌和斯氏普罗威登斯菌：四环素或呋喃妥因S，这里细菌对这两类抗生素天然耐药，成果不也许。56精选ppt第56页罕见成果（值得注意）-重作!

肠杆菌科细菌：亚胺培南/美洛培南R（沙雷菌中也许）阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和弗枸：头孢西丁S奇异变形菌：呋喃妥因和四环素S一般变形杆菌：头孢噻吩，氨基青霉素，头孢呋辛S沙雷菌：头孢呋辛S对所有受试抗生素均R，不也许成果57精选ppt第57页罕见矛盾成果假如奈替米星R/I而妥布霉素S（一般二者同步耐药）假如丁氨卡那R/I，而妥布霉素/奈替米星S（对丁氨卡那耐药肠杆菌科细菌对其他氨基糖苷类抗生素耐药）β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂R，而该种β-内酰胺类抗生素S，不也许成果。58精选ppt第58页有提醒意义成果，成果需要修正

A.非ESBL大肠埃希菌，所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸I/S，氨苄西林/舒巴坦I/S，所有三代头孢S，羧基青霉素R/I，脲基青霉素R/I，说明该菌耐药性也许是由于取得性β-内酰胺酶引发。成果应修正为所有青霉素R，所有一代头孢R。59精选ppt第59页B.大肠埃希菌，志贺菌或小肠结肠炎耶尔森菌：任何一代头孢R/I，所有羧基青霉素S，或所有脲基青霉素S，且所有三代头孢S，说明耐药性也许是由低水平头孢菌素酶引发。成果修正为所有一代头孢为R，所有氨基青霉素R/I，阿莫西林/克拉维酸R/I，氨苄西林/舒巴坦R/I。60精选ppt第60页C.大肠埃希菌：所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸或氨苄西林/舒巴坦R，所有一代头孢菌素R，所有二代头孢菌素R/所有头霉素R，所有三代头孢菌素R/I，说明耐药性由内在高水平头孢菌素和/或ESBL引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂，头孢菌素和单环类活性减少。成果修正为所有三代头孢R，所有青霉素R，氨曲南R，所有二代头孢R，所有青霉素/酶抑制剂R/I，所有口服三代头孢R，头孢哌酮R，所有头霉素R。61精选ppt第61页D.大肠埃希菌：所有氨基青霉素R，阿莫西林/克拉维酸R/氨苄西林/舒巴坦R，所有一代头孢菌素R，所有羧基青霉素/所有脲基青霉素R/I，所有三代头孢菌素S，说明耐药性由内在低水平头孢菌素和/或高水平取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂，二代头孢菌素活性减少。成果修正为所有青霉素R，所有青霉素/酶抑制剂R/I。62精选ppt第62页E.奇异变形杆菌、沙门菌：所有氨基青霉素R，所有三代头孢菌素S。修正成果为：所有青霉素R，所有一代头孢菌素R/I。F.ESBL型大肠埃希菌，成果修正为所有青霉素R，所有头孢菌素，除头霉素外R，氨曲南R。

63精选ppt第63页G.一般变形杆菌：所有氨基青霉素R，所有一代头孢菌素R，所有羧基青霉素R/I或所有脲基青霉素R/I，所有三代头孢S。说明也许由内在头孢菌素酶和取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂、一代二代头孢菌素活性下降。成果修正为所有青霉素R，所有二代头孢R/I，所有青霉素/酶抑制剂R/I。64精选ppt第64页H.一般变形杆菌：所有氨基青霉素R，任何一代头孢R，所有羧基青霉素或脲基青霉素S，所有三代头孢菌素S。说明耐药性由内在头孢菌素酶引发，使一代、二代头孢菌素抗菌活性下降。成果修正为：所有一代头孢R，所有二代头孢R/I。I．肠杆菌科细菌：对环丙沙星耐药细菌对所有三代喹诺酮类抗生素耐药。

65精选ppt第65页J.志贺菌：所有氨基青霉素R，所有三代头孢S，任何羧基青霉素或任何脲基青霉素R/I，说明耐药性也许由取得性β-内酰胺酶引发，使青霉素和一代头孢菌素抗菌活性下降。成果修正为所有青霉素R，所有一代头孢菌素R/I。66精选ppt第66页K．奇异变形菌、沙门菌：所有氨基青霉素R，所有一代头孢和所有脲基青霉素R/I，所有头霉素S，任何三代头孢菌素R/I或头孢泊肟R，或氨曲南R/I，说明耐药性也许由ESBL引发，使青霉素、青霉素/酶抑制剂、头孢菌素和单环类抗生素抗菌活性下降。成果修正为：所有青霉素R，所有头孢菌素（除头霉素外）R，氨曲南R。

67精选ppt第67页非发酵菌铜绿假单胞菌/不动杆菌68精选ppt第68页不也许成果

A.假如三代和四代头孢菌素S/I，而一代，二代头孢或头孢克肟、头孢泊肟、氨基青霉素敏感。这样成果不也许B.所有氨基青霉素，或阿莫西林/克拉维酸，或氨苄西林/舒巴坦，或任何一种一代或任何一种二代头孢，或任何头霉素，或任何四环素，或任何一代喹诺酮类，或复方新诺明S。这样成果很罕见，铜绿假单胞菌对上述抗生素呈多重耐药性69精选ppt第69页C.鲍曼不动杆菌或无硝不动杆菌：所有氨基青霉素或一代二代头孢或氯霉S，这个成果不可靠，这两个菌对以上抗生素天然耐药。D.洋葱伯克霍尔德菌：氨基糖苷类抗生素或亚胺培南S，这个成果不太也许，该菌对以上抗生素天然耐药。70精选ppt第70页罕见成果（值得注意）

A.铜绿假单胞菌：假如亚胺培南R，而头孢他啶S，替卡西林S，说明耐药性最大也许为细菌细胞壁通透性下降所致，不批示与其他β-内酰胺类抗生素交叉耐药。B.不动杆菌属（洛菲不动杆菌和琼氏不动杆菌），气单胞菌属（嗜水、豚鼠、维罗纳气单胞菌温和生物变种），支气管炎博德特菌，浅黄金色单胞菌，多杀巴斯德菌，多食鞘氨醇杆菌，洋葱伯克霍尔德菌，施氏假单胞菌：对复方新诺明R。这种成果不太也许，这些细菌对该药一般是敏感。

71精选ppt第71页罕见矛盾成果

A.丁氨卡那R/I，庆大霉素或奈替米星S。成果矛盾B.妥布霉素R/I，庆大霉素S。成果矛盾C.假单胞菌：派拉西林R/I，任何氨基青霉素S或替卡西林S，该成果不也许，由于对脲基青霉素耐药细菌一般交叉耐受氨基和羧基青霉素。72精选ppt第72页有提醒意义成果，成果需要修正

A.非发酵菌：假如对环丙沙星R，则说明对其他喹诺酮类抗生素耐药，成果修正为：所有喹诺酮类抗生素R。B.铜绿假单胞菌：头孢他啶R/I，替卡西林/克拉维酸R或所有脲基青霉素R，说明细菌对所有三代头孢、青霉素、青霉素/酶抑制剂及单环类交叉耐药。报告修正为：所有三代头孢R/I，所有青霉素R/I，所有青霉素/酶抑制剂R/I，所有单环类R/I。73精选ppt第73页C.铜绿假单胞菌：替卡西林R，替卡西林/克拉维酸R或派拉西林R或阿洛西林R，头孢他啶S，氨曲南S。说明耐药性是由取得性β-内酰胺酶引发。成果修正为所有青霉素R。74精选ppt第74页葡萄球菌

75精选ppt第75页

不也许成果

葡萄球菌：青霉素GS或β-内酰胺酶阴性，苯唑西林S，这个成果较罕见，对青