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文档简介
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第1页二、试验原理果蝇(Drosophilamelanogaster)是生物学研究中一个主要模式生物。约在1909年,摩尔根就开始用果蝇作为材料进行遗传学试验,处理了一系列重大遗传学问题。
果蝇作为遗传材料含有很多突出优点:染色体数目少,2n=8;含有许多可遗传突变性状;世代周期短,在25C
下约9~10天就完成一个世代;个体小,易于喂养,费用低廉;繁殖能力强,一次杂交可产生大量后代供统计分析。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第2页果蝇生活史
果蝇为昆虫纲双翅目昆虫,生活史经过:
卵-幼虫-蛹-成虫,是完全变态昆虫。
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第3页DrosophilalifecycleAdult成虫FertilizationEmbryo1dayFirstinstarlarva1day1daySecondinstarlarvaThirdinstarlarva21/2-
3daysPupa31/2-
41/2daysinpupalstage蛹Egg卵三龄幼虫一龄幼虫二龄幼虫果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第4页果蝇生活周期和温度关系
培养温度
10℃15℃20℃25℃
卵→幼虫
8天5天
幼虫→成虫
57天18天6.3天3.4天
15天7~8天20~25C是果蝇最适生长温度,生活周期为10天。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第5页果蝇培养基
果蝇食物主要是酵母,凡是能使酵母发酵基质都能作为培养基,最常见、效果最好是玉米粉培养基。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第6页三、试验步骤1.果蝇生活史观察卵
成熟雌蝇交尾后(2~3d)将卵产在培养基表层。用解剖针针尖在果蝇培养瓶内沿着培养基表面挑取一点培养基将其置于载玻片上,然后滴上1滴清水,用解剖针将培养基展开后放在显微镜低倍镜下仔细进行观察。果蝇卵为椭圆形,长约0.5mm,腹面稍扁平,前端伸出触丝可使卵附着在培养基表层而不陷入深层。幼虫
果蝇受精卵经过一天发育即可孵化为幼虫。幼虫在培养基内及瓶壁上都有,培养基内幼虫普通要小一些。这是因为果蝇幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕皮,形成二龄和三龄幼虫,伴随发育而不停长大,三龄幼虫往往爬到瓶壁上来化蛹,其长度可达4~5mm。幼虫一端稍尖为头部,黑点处为口器。幼虫在培养基内和瓶壁上蠕动爬行。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第7页蛹幼虫经过4~5d发育开始化蛹。普通附着在瓶壁上,颜色淡黄。伴随发育继续,蛹颜色逐步加深,最终为深褐色。在瓶壁上看到几乎透明蛹是已经羽化完而遗留蛹空壳。
成虫刚羽化出果蝇虫体较长,翅膀也没有完全展开,体表未完全几丁质化所以成半透明透乳白色。伴随发育,身体颜色加深,体表完全几丁质化。羽化出果蝇在8~12h后开始交配,成体果蝇在25℃条件下寿命为37d。
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第8页2.果蝇麻醉
将麻醉瓶小口拔去橡皮塞。滴入数滴乙醚(注意不能太多,以使乙醚流入瓶内)再塞上橡皮塞。将要麻醉果蝇试管在海绵板上敲击几下,使其都集中在底部。然后快速拔去棉塞,插入麻醉瓶大口,拍打试管,使果蝇全都倒入麻醉瓶。然后快速盖上麻醉瓶口盖子。麻醉到一定程度把果蝇倒在白磁板上。当果蝇翅膀上翘45°时,表示已经死亡。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第9页3.雌雄果蝇判别
体型腹部末端背部条纹性梳
♀大无色、端尖7条(可看见5条)无♂小黑色、钝圆5条(可看见3条)有性梳:雄蝇前肢第5节附节上有10根象梳子棕毛果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第10页
雌果蝇体型大于雄果蝇雌果蝇有6节体节,腹部底部为产卵管,展现圆锥状凸出。雄果蝇有4节体节,腹部底部为交尾器,呈現黑色圆形外观。前肢先端第二节含有性梳。
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第11页4.突变性状观察眼色:红眼与白眼红眼与白眼是一对相对性状,分别由X染色体上基因+与w(或X+
和Xw)决定果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第12页其它眼睛突变
Cinnabar:朱色Sepia:棕褐色果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第13页残翅(Vestigialwing,vgvg)
长翅和残翅是一对相对性状,由位于第二染色体上基因+/vg决定
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第14页小翅(miniaturewing,mm),由位于X染色体上隐性基因m决定。翅膀比野生型短些,仅长至腹端。Apterous:无翅果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第15页翅膀其它突变Dumpy:粗短;scalloped:圆齿状果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第16页体色突变黑檀体
(ebonybody,ee)由位于第3染色体上隐性基因决定。
Sable(黒貂色,tan(棕褐色)
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第17页刚毛
野生型果蝇头胸部以及复眼周围含有平直,先端略弯长型粗黑硬毛。
焦刚毛(singedbristle,sn3sn3),刚毛卷曲,由位于X染色体上隐性基因决定。。
果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第18页刚毛其它突变类型Forked:开叉;spineless无骨;stubble:茬状果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第19页试验统计管号眼色翅型体色刚毛雌雄个数果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第20页5个品系果蝇性状观察品系眼色翅膀刚毛体色1红长翅直灰2红残翅直灰3白小翅焦刚毛灰4红长翅直黑檀体5白长翅直灰果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第21页5.果蝇培养基配制
玉米培养基80ml水+2g琼脂+13g蔗糖放在大烧杯中煮沸。80ml水+17g玉米粉+1.4g酵母粉,装在小烧杯中调匀。待大烧杯中琼脂融化后,将小烧杯中调匀混和液倒入,烧开。每一试管分装1.5~2cm高度(5~10ml)培养基,注意请勿将培养基碰到管壁。高压灭菌。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第22页果蝇杂交试验基础步骤选处女蝇
将雌雄果蝇放在一起培养,雌蝇生殖器中有贮精囊,可保留交配所得大量精子,雌蝇一次交配所得精子,足够它屡次排出卵受精,所以在做杂交试验时,雌蝇必须选取处女蝇(没有交配过雌蝇)。雌蝇孵出后12小时内不会交配,这个时间内把果蝇全部倒出,分出雌雄蝇,单独喂养,这时搜集雌蝇是处女蝇。果蝇的性状观察雌雄鉴别和饲养方法第23页配制杂交组合把所需品系雄蝇直接放处处女蝇培养瓶中,标注亲本基因型及交配日期;(7天)7~8天后,倒掉亲本(以免亲代和子代混同);再过4~5天后,F1成蝇性状观察;F1自交,无需处女
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