鲜铁皮石斛遗传毒性研究

鲜铁皮石斛遗传毒性研究

常绿石头。这是多年生蕨类植物科的一种多年生蕨类植物。它是中国罕见的中药。主要分布在西南部和东部省份，表皮呈绿色。据《本草纲目》记载铁皮石斛能“除痹、下气、补五脏虚劳赢瘦、强阴益精;久服、厚肠胃、补内绝不足、平胃气、长肌肉、益智除惊、轻身延年”。铁皮石斛化学成分多样,主要含有生物碱、多糖、氨基酸等材料表面1液氮罐和超净工作台702超低温冰箱(美国Thermo公司);HVE50高压灭菌锅(美国Thermo公司);Cryosysterm2000液氮罐(美国MVE公司);Nu425400E超净工作台(美国NUARE公司);DM4000/DM2500/DM1000正置显微镜及图像分析系统(德国Leica公司);DMIL倒置显微镜(德国Leica公司);3111二氧化碳培养箱(美国Thermo公司);HU400BM榨汁机(韩国Hurom公司)。2化水制备汁鲜铁皮石斛(FD,杭州中美华东制药有限公司,批号:20120608);取鲜铁皮石斛10g加200mL纯化水榨汁,过滤;取药渣,再加300mL纯化水榨汁,合并2次滤液并浓缩,得到浓度为100mg(生药)·mL组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌(TA97,TA98,TA100,TA102和TA1535)均购自美国Moltox公司,临用前从主平板上选取菌落,37℃恒温培养箱静止培养12h,增菌液浓度为每mL(1~2)×103细胞20细胞研究进展中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)购于中国科学院上海细胞研究所。SPF级ICR小鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,许可证号:SCXK(沪)2007-0005,动物合格证号:0037907。方法1平板加入实验条件采用标准Ames法,非代谢活化(-S9)和代谢活化(+S9),2种平板掺入实验条件。FD设5个剂量组(5000,1000,200,40,8μg·plate2fd中国粮仓肺纤维细胞chl染色体畸变实验FD的IC3fd大鼠骨髓检测采用红细胞微微滴落试验雄性ICR小鼠30只,按体重随机分成5个实验组,每组6只,包括FD高、中、低(2,1,0.5g·kg结果1两组抑菌率比较非活化系统条件下FD各剂量组回复突变菌落数均未超过阴性对照2倍,其中TA97在每皿5000μg剂量条件下回复突变菌落数减少,较正常对照组抑菌现象明显(P<0.05)。活化条件下FD各剂量组回复突变菌落数均未超过阴性对照2倍,其中TA100和TA102均有1个剂量组出现明显抑菌现象(P<0.05)。阴性对照组5种鼠伤寒沙门菌回复突变菌落数均在正常突变范围内,各阳性对照组5种菌株的回复突变菌落数均超过阴性对照的2倍以上,且统计学差异明显(P<0.01),表明该实验系统合理,结果见表1。2染色体畸变试验非活化代谢条件下,阴性对照组染色体畸变率均小于5%,在正常范围内,FD各剂量组畸变率在0.5%~4%之间,与阴性对照组比较无明显差异(P>0.05)。阳性对照组,染色体结构畸变率大于10%,明显高于阴性对照组(P<0.01),显示阳性结果,详见表2。结果表明FD各剂量组畸变率均<5%,未诱导CHL细胞染色体畸变。3两组微核试验率比较,2ICR小鼠分别经ig给予FD高、中、低3个剂量组后微核率与阴性对照组比较,均无明显差异(P>0.05),而阳性对照组较正常对照组微核率显著增加(P<0.01)。各组嗜多染红细胞与总红细胞比值[PCE/(PCE+NCE)]均在0.36~0.60之间,属于正常范围。且各组嗜多染红细胞占总红细胞总数均未少于阴性对照组20‰,见表3。结果表明,FD各剂量的微核率均小于5‰。发酵铁皮石斛的抗菌作用本实验通过对鲜铁皮石斛遗传毒性研究发现,在本实验条件下,鲜铁皮石斛Ames实验中未见菌株回复突变数增加,甚至在高剂量时出现对个别菌株的抑制作用,说明鲜铁皮石斛可能有抗菌作用,与石