核酸检测平台技术商业计划书

傲立昂生物技术OrionisBioTekCorporation商业打算书传真：地 址：中国云南昆明市5－1－10110保密承诺本商业打算书内容属商业隐秘，全部权属于傲立昂生物技术。其所涉及的内容和资料仅对有意向的投资人公开，本公司要求有意向的投资人收到本打算书时做如下承诺：妥当保管本商业打算书，未经本公司同意，不得向第三方公开商业打算书所涉及的公司商业隐秘，亦不得作为案例等用于教学，假设收件人不期望涉足本打算所述工程，请与指定联系人联系并将本打算书完整退回，并不得将本打算书全部和/或局部地予以复制、传递给他人、影印、泄露或散布给他人，否则应担当相应法律责任。授方：傲立昂生物技术收件方：日期：目 录

综述公司介绍产品及技术优势行业及市场分析风险掌握综述位於美国硅谷的傲立昂生物技术公司于2023年制造了这项迄今为止最先进的(CAD)PCR技术。傲立昂公司已在世界主要国家为该技术申请了专利。与目前市场上最好的同类技术，荧光(TaqMan)PCR相比，高效定量定量(CAD)PCR技术已经在检测人类基因这一最简单DNA序列试验中取得了成功，因此，这一成熟的高技术平台可以很便利地应用到在临床诊断及其他检测领域SARS，艾滋病，乙型肝炎，丙型肝炎等，都是高效定量(CAD)PCR技术应用的抱负对象。高效定量(CAD)PCR技术的广泛应用，除了能从而带来巨大的商业利润。傲立昂公司现正在中国乐观查找合作伙伴，共同将高效定量(CAD)PCR这一30%，是极有吸引力的工程。公司简介总部位于美国硅谷的傲立昂生物技术是一个处於创业初期的小型生效劳等。公司成功地开发出代表当今世界最高水平的高效定量(CAD)PCR技术，该技术比目前国内外最先进最常用的荧光(TaqMan)PCR技术具有更高的准确性和灵敏度，且制造工艺简洁，可以便利地应用到各种疾病的早期检测，并且在遗传病普宗旨本公司自成立之日起，便充分利用自身雄厚的技术优势，致力于最领先生物的经济效益和社会效益。以中国大陆留美学者为主组建的傲立昂生物技术公司，始终亲热关注祖国生安康水平供给最高质量的效劳。为帮助中国抗击SARS，公司投入了大量人力物力，及早开发出了目前特异性最高的SARS之尽早投入临床使用。除SARS外，艾滋病、乙肝、丙肝等疾病的诊断产品都已设计完成。公司组织构造业开发部门。位於硅谷的总部拥有现代化的试验室、科研设备及小样生产力量，主要负责为公司的成熟产品查找抱负的合作伙伴。泽西州几乎集中了全世界全部大型医为了与中国公司有效合作，公司正在考虑今年在中国开设一个分公司。其次部份公司董事会及治理团队董事会公司董事会由三人组成，毕万里、史长平和朱晟，董事长为毕万里。治理团队公司目前虽然尚在初创阶段，但已初步建成了一个由顶尖生物科学家、医学系，为公司今后进一步进展奠定了根底。治理团队主要成员简介毕万里，男，毕业于北京大学生物系，于美国辛辛那提大学医学院获博士学公司，应用生物系统(AppliedBiosystem)公司，任资深科学家多年，拥有多项与核酸检测技术相关的高技术专利制造。作为高效定量(CAD)PCR技术的制造人，毕万取得了突破性进展，不久马上公布于世。史长平，毕业于北京大学生物系，于美国图灵大学获博士学位，并于加州大Chiron公司任资深科子合成业务和日常治理。朱晟，毕业于北京大学生物系，并于美国印地安那大学获MBA学位，主修金品的商业开发。(现北京大学医学部)医疗系，在美国印地安那大学获硕士学位及美国医学博士。曾任职于雅培(Abbott)药厂、法玛西亚(Pharmacia)制药公司、辉瑞(Pfizer)制药厂、西尔金(Celgen)生物技术公司，任临床试验和药品安全资深科学家、经理多年。目前主要负责公司的产品的临床试验和审批。第三局部：产品及技术优势是迄今为止最先进最便利的核酸检测平台技术，为有效阐述高效定量(CAD)PCR，首先从核酸检测说起。核酸检测技术核酸检测技术的定义与功能核酸检测技术是一种近十年来进展起来的全的临床检测手段，通过检测出(DNARNA)，以确定该病原体或生物的存在。由於基因序列的物种特异性及高度稳定性(尤以DNA为甚)，核酸检测技术免疫检测技术。核酸检测技术的主要功能、用途测。目前的绝大多数疾病都在此范畴。常见病、流行病的普查和预防：如非典、艾滋病等疾病，只有核酸检测可体，一般在病原体侵入后的数天至两周，因此免疫诊断无法用作早期检测。大的遗传病有地中海贫血病等50余种，基因普查在我国尚属空白，急待开发。病、乙肝、丙肝等献血源的筛查，信任不久国内亦会跟上。转基因动植物检出：将保护中国不受转基因动植物倾销之害。个人基因图谱档案的建立：可对个人寿命、性格、行为、智力等因素有效必将会成为大多数安康人大消费内容。用途。核酸检测技术的特点由於基因序列的物种特异性及高度稳定性(尤以DNA为甚)，核酸检测技术比免疫检测无法到达的。核酸检测技术的原理核酸检测技术包括：标本样品(如血液、生物组织、粪便、痰等)的采集和处(DNA)，在人工条件下，特异性地曾加某一段DNA分子的数量。扩增技术有以PCR为代表的多种方法。(即乙肝病毒DNA)。与扩增技术相比，目前检测方法则相对甚少。高效定量(CAD)PCR的独特之处便是在检测方面有其突出奉献(详见后述。PCR及相关检测技术(CAD)PCR中不行替代的关键步骤，故在此介绍一下PCR的技术背景。PCR技术原理PCR技术是以一条病源(如乙肝病毒)DNA或RNA为模板，在人工掌握的条件下，通过DNA合成酶的作用，经过数十次温度变化周期，于试管中复制出数以亿计的完全一样的DNA片段。如此众多的DNA复制片段使得核酸检测成为可能。PCR相关的检测技术DNARoche公司的荧光(TaqMan)PCR方法到达了单一步骤均一闭合系统检测的水平。这里所说的单一步骤均一闭合系统在检测中至关重要，下面具体介绍。核酸的单一步骤均一闭合系统检测首先争论非单一步骤均一闭合系统检测。当PCR在一个闭合容器内完成后，将此闭合容器翻开，取出众多的DNA复制片段，移至另一容器中进展检测，如分量的DNA复制片段在取出过程中，造成试验室穿插污染。由于DNA格外稳定，测。单一步骤均一闭合系统检测就是把检测染色试剂在PCR开头前即参加PCR反响容器，取出DNA。这样既消退了穿插污染，又节约了时间，还能在反响过程中实时监测，从而到达定量检测的效果。目前只有荧光(TaqMan)PCR技术既能到达单一步骤均一闭合系统检测，又推出了商业产品。荧光(TaqMan)PCR技术RocheTaqMan公司，紧接着推出了荧光(TaqMan)PCR产品，以其明显的优越性很快就成为了行业产品也有其难以抑制的缺陷。荧光(TaqMan)PCR的特点快速：整个过程在2小时内完成。清洁：不会对试验室造成穿插污染。定量：通过实时监测，定量检测病源体。DNA分子激活而发出荧电脑软件同时完成。荧光(TaqMan)PCR的缺陷荧光(TaqMan)PCR必需使用一种特别的DNA合成酶(Taq合成酶)，而这种酶的生的，主要有以下表现。热稳定性差。由於该技术使用的DNA合成酶的最适温度远低于PCR的反响温度，因此该(<100拷贝)，常常产生假阴性结果。假阴性会在临床上产生大量疑似病例，如今年SARS流行时大量疑似患者的隔离。这样就起不到早期检测的效果。准确性差DNA合成酶的保真度和特异性差，导致大量复制错误，降低了扩增反响的准确性，从而大大影响了定量检测的结果。对各种DNA合成抑制剂均敏感由於所用的DNA合成酶对多种抑制剂都过於敏感，因此荧光(TaqMan)PCR中国国情的高质量产品替代荧光(TaqMan)PCR,无模板合成多年来荧光(TaqMan)PCR的使用结果显示，其所用的酶生物活性不稳定，常常并非模板的复制物，由此产生多种意想不到的结果，既有假阴性，也有假阳性，大大降低了其使用效果。价格昂贵荧光(TaqMan)PCRRoche公司拥有。该公司已宣布正在加紧开发以荧光(TaqMan)PCR为根底的SARS检测试剂盒，并将于今年秋季投放中国市场。它选择的时机说明白它要在今年冬季可能消灭的SARS顶峰期抢占中国SARS检测市场的企图。而中国公司迄今已开发出的SARS检测产品绝大多数都是基於荧光(TaqMan)PCRRoche的强大挑战。中国要么向Roche支付天价的专利使用费，要么将本国SARS检测市场拱手让给Roche。在这种状况下，高效定量(CAD)PCR就成了中国人民可以用来对抗SARS可能回潮的唯一有效的检测手段。在其他疾病的检测方面，中国也面临同样的问题。高效定量(CAD)PCR技术高效定量(CAD)PCR技术的特点PCR与单一步骤均一闭合系统检测奇异结合起来的最核酸检测平台技术，是下一代的实时定量PCR。高效定量(CAD)PCR吸取了荧光(TaqMan)PCR的优点，并对荧光(TaqMan)PCR的荧光染色检测方法及所用的酶系做了革命性的改进。高效定量(CAD)PCR2023年申请了专利。鉴于荧光(TaqMan)PCR所用的酶的缺陷，高效定量(CAD)PCR承受了一种全的DNA合成酶。这种酶具有热稳定性高，扩增保真度和准确性高，不易受核酸专利为中国人所拥有，所以不必要担忧昂扬的技术转让费。的根本原理与反响条件和荧光(TaqMan)PCR完全一样，PCR仪上进展，不必开发的配套仪器。PCRDNA合成酶的分析出很多种，每一种的复制保真度和准确度大不一样。下表列出八种DNA合成酶的相对准确度。323228.6282420181612R86.13.54332.110PabPfuUltraPfuTgoDeepVentVentKlenTaqTaq从表中可以看出，高效定量(CAD)PCR所用的酶，PfuUltra，比荧光Taq18倍。这从一个侧面说明为什么高效定量(CAD)PCR有如此之高的准确度。此外，高效定量(CAD)PCR所用DNA合成酶具有极高的热稳定性，比荧光30多倍，几乎不存在因高温而失活的问题，成为临床检测准确测定的又一保证。高效定量(CAD)PCR与荧光(TaqMan)PCR的试验比较经过如此改进的高效定量(CAD)PCR与荧光(TaqMan)PCR相比，各方面指标仅以一最具代表性试验为例，具体证明高效定量(CAD)PCR的明显优势。试验条件(TaqMan)PCR与高效定量(CAD)PCR两组反响，在除了各自的酶系之外完全一样的条件下同时进展，分析两者的结果。试验仪器：ABIPCR仪，型号为Prizm7000。该型号PCR仪是目前最先进的国际标准荧光(TaqMan)PCR仪。PCR扩增模板：使用购置ABI公司的PCR仪时附送的标准人类基因组1010000ABIPCR准产品，具有最高的纯洁度和稳定性。使用此模板，可以避开标本样品采集与制备过程中可能消灭的试验误差，避开了然后DNA合成酶抑制因子存在的可能，制造了荧光(TaqMan)PCR的最正确反响条件。PCR20倍浓度引物、探针混合物，稀释使用，620周0.20.DNA合成酶和其他试剂：荧光(TaqMan)PCR就使用PCR仪附送的配套标准合成酶和试剂，以使荧光(TaqMan)PCR在最正确条件下进展。高效定量(CAD)PCR则使用傲立昂公司自己生产的，特地用于高效定量(CAD)PCR的高保真度DNA合成酶系及配套试剂。(TaqMan)PCR的最适合反响条件，以期获得荧光(TaqMan)PCR的最正确结果。而在日常临床荧光(TaqMan)PCR检测实践要证明，在一般条件下高效定量(CAD)PCR的检测结果，可以轻易超过在最正确条件下荧光(TaqMan)PCR的结果，那么在临床实践中，高效定量(CAD)PCR无疑比荧光(TaqMan)PCR有着巨大优势。试验结果仪，开启实时监测和自动分析，经过约两小时，PCR仪自动打印出试验结果，转贴于此处。荧光(TaqMan)PCRCt=-3.66LgC+40.31R2:0.995Efficiency:87.6%10K1 .1.01高效定量(CAD)PCR10K1.1.01

Ct=-3.33LgC+39.19R2:0.994Efficiency:99.7%SNP单硷基突变1516如下图，上图为荧光(TaqMan)PCR的结果，以下图为高效定量(CAD)PCR的DNA10000，1000，100，10DNA拷贝。结果分析由上述结果可以清楚地看到两种PCR技术的优劣。荧光强度曲线分析：典型的荧光强度曲线应当呈S型，在反响初期，由于没有足够的DNA拷贝被复制出来，也就没有足够的荧光分子被激活，光吸取值保持DNADNA拷贝，光吸取值的上升也就渐渐停顿，曲线趋向平缓。由左上图可见，荧光(TaqMan)PCR的四条曲线随所用的DNA模板浓度降低而越变越矮，最终一条甚至缺乏第一条峰值的一半，究其缘由，主要是由所用DNA合成酶的准确性和热稳定性过低造成的。用于准确性低，产生出大量非目标DNA设计的探针自然无法将其检测出来，导致曲线变低。而热稳定性低使得DNA合成酶在反响后期根本失活，即使时间再长，也无法再合成出DNA合成酶抑制因子。而临床实践中制备出来的DNA模板，会含有多种此类因子，破坏酶阴性的消灭。左以下图则显示，与荧光(TaqMan)PCR不同，高效定量(CAD)PCR的四条荧光强度曲线全部呈完善的S型，说明白该技术无与伦比的保真度、准确性和稳定性。而且高效定量(CAD)PCR所用的DNA合成酶对各种抑制因子均不敏感，临床制备出来的模板也不会影响反响结果。标准曲线分析：比照两组标准曲线的扩增效率(Efficiency)，可以从另一个角度说明高效定量(CAD)PCR的优越。扩增效率是指PCR每一次扩增反响能够产生(TaqMan)PCR87.6%，即每一次扩增能产0.876DNA88次能产生完整的DNA分子，而且这还是在最正确反响条件下的结果。与之比照，高效定量14%。可以推测，在将降临床实际应用中，高效定量(CAD)PCR的扩增效率必将远远高于荧光(TaqMan)PCR的表现。以上分析清楚地说明，高效定量(CAD)PCR有着荧光(TaqMan)PCR无法比较过去数月中国抗击SARS的过程中，始终没有有效的临床试验室检测手段，以致大量疑似患者被长时间隔离。虽有多家争论单位和公司宣布成功开发出检测试剂来，如此高的假阴性比例，虽然有多种可能性，但荧光(TaqMan)PCR本身的固有缺陷很可能是主要缘由。高效定量(CAD)PCR技术的操作及产品高效定量(CAD)PCR可以应用在几乎全部疾病病源检测上，只要该疾病病源DNA(Primer)和检测探针(Probe)。然后从病源标本RNA，须增加反转录步骤)，参加引物，探针，酶，及核PCR仪上开头反响，假设仪器有实时监测功能，则反响2小时。高效定量(CAD)PCR与特异引物/探针的关系类似枪与子弹的关系，高效定量(CAD)PCR便是枪，众多特异性的引物/探针便是各种子弹，而病源体的DNA或RNA就是射击的靶子。高效定量(CAD)PCR的应用产品包括以下几类：特异高效定量(CAD)PCR检测试剂盒(装好子弹的枪)此种试剂盒装有用于扩增、检测的全部试剂，包括合成及检测的酶系，核苷用于某种单一疾病的检测，适用于医院，血站和单一疾病大规模普查。广谱高效定量(CAD)PCR检测试剂盒(没装子弹的枪)此种试剂盒除没有引物和探针外，与特异试剂盒完全一样。引物和探针由操主要客户为大学，争论所，及从事研发的公司。引物和探针(子弹)即特地为广谱检测试剂盒设计、制备的引物和探针。利用现代生物信息系统如今越来越多的病原体基因被解码，为高效定量(CAD)PCR的推广应用供给了便利条件。PCR(靶子))DNARNA，用于高效定量(CAD)PCR检测。不同的病原体有不同的标准制备方法。谈到市场，必需先说明一点，即高效定量(CAD)PCR是一种适用于众多与检三局部中谈到了核酸检测技术的应用领域，包括病源检测，流行病、常见病的普同样是高效定量(CAD)PCR的应用领域。下面仅以病源检测领域为主，分析高效定量(CAD)PCR技术的市场前景。国际市场PCR10年来快速崛起的全检测手1020%10年将保持2023年欧美市场年销售额将到达170亿美元之巨。近年来对一些严峻流行病的治理为核酸检测技术制造了难得的契机。例如1999年美国国家食品医药治理局(FDA)正式要求全国血站及相关构造，必需使用核Chiron公司制造了天赐良机。该公司此二种试剂的1999700202312千多万，三年增加了18倍。今年美国FDA又把西尼罗病毒列入了血液制品必需测试的名单，的时机还在不断被制造出来。目前中国药检局，乃至世界各国都还没有批准任何一个SARS检测试剂参加临床试验，就是由于没有一个产品令人满足。假设高效定量(CAD)PCR此刻脱颖而出，获得批准，其本身的商业价值和社会影响之大，难以估量。高效定量(CAD)PCR是一种全的、高技术含量很高的检测方法，除了能带Roche公司的检测分公35%，甚至超过了它的制药分公司的利润率。除了市场飞速增长和高额利润之外，高度垄断是核酸检测的另一特征。众所周知，医药行业是一个垄断程度相对较低的行业，而检测试剂则是其中的一个异数，因其很大程度上依靠某一特别的技术或专利。以PCR为例，作为核酸检测的1991Roche3亿美元一次性买断专利后，为该12Roche公司的荧光(TaqMan)PCR以其便利、快捷的优势，几乎完全占有了中国的核酸检测市场。一旦有一个各项技术指标能全面超越它的技术问世，此技术必将取代荧光(TaqMan)PCR的地位，成为的垄断。国内市场国内的核酸检测市场自2023年国家药监局打算重开放以来，经受了难以置30%10%不到。实际上，早期诊断(CDC)Chlamydia造成的性传染病来说，每一美元用在早期检测的花销可以节约十一美元的治疗费用。毫无疑问，中国的核酸诊断市场，还有巨大的进展空间。门的统计，我国四种常见传染病每年的检测量为：梅毒 6580万人次AIDS 4680万人次丙型肝炎 9080万人次乙型肝炎 14080万人次另外还有献血员血液检测每年4000万人次。仅上述五项合计即到达每年4亿代免疫检测的垄断地位。美国FDA已正式要求使用核酸检测方法，筛查献血员及血液制品中的艾滋病人不寒而栗，而乙肝病毒携带者早已超过1亿，为严格掌握这些传染病的流行，信任70%已为国外产品垄断，面对将来的巨大市场，中国急需自己的优秀产品。第五局部：商业模式及赢利推测技术平台，生产一代诊断试剂，可以依据市场需求的迫切性而实行敏捷的商业模式。目前傲立昂公司已经成功开发出试验室水平的广谱诊断试剂盒，下一步则依据(SARS、艾滋病和乙肝)为目标，在一个月之内，小批量生产出特异诊断试剂盒，在临床样品(如血液、唾液、粪便等)上试验，结果满足后，向国家药检局申报，同时预备大规模生产和广告、促销等工作，一旦申报获得批准，马上全方位投入生产。假设第一期只选择艾滋病一个目标，依据卫生部统计资料，年检测量近四千5%的市场份额，应当毫无问题，即两百三十万份试剂。目前国内荧光(TaqMan)PCR的诊断价格为每人次二百人民币左右，试剂局部约60元，则年销售额可达一亿三千万元。据我们初步测算，每份30%40%，与进展中国家同类产品利润率相当，加假设干的疾病为目标，充分利用高效定量(CAD)PCR的专利平台技术优势，渐渐竞争。由于高效定量(CAD)PCR是当今世界最领先的技术，中国企业完全可以以此技术为先锋，进军国际核酸检测试剂市场。第六局部： 合作方式及资金需求合作伙伴对合作伙伴的要求如下：资金持。依据不同的合作方式，资金量有所不同。产品小样生产力量高效定量(CAD)PCR平台技术虽已成熟，但是对每一种所选择的目标疾病，PCR产品的阅历。临床试验及产品申报於美国的傲立昂公司很难拥有这方面的直接阅历，需要国内同行的帮助。大规模生产的力量至少有国内GMP认证，最好拥有国际CGMP认证。产品营销及公司治理生疏国内诊断试剂市场，有大规模营销、储运的阅历。合作方式傲立昂公司期望与中方合作伙伴组成合资股份，供给与高效定量(CAD)PCR有关的全部必需的专利、技术、学问，并乐观参与合资公司的日常管理。中方合作伙伴可以是一家有行业阅历的大型实业公司，也可以由多家公司组效的合作、合资方式。资金需求标为例，分析资金的投入。模式和进展方向。合资公司日常办公费用所需资金不多，此处无视。其次步，由傲立昂公司在美国设计、组装出小规模试验室用艾滋病毒诊断试剂盒，所需费用不超过100万元人民币，时间为一个月。然后在中国通过试验室检测，需资金50万元，耗时一个月。假设中方无现成的试验室，建立一个到