CAR-T细胞制剂制备质量管理规范

CAR-T细胞制剂制备质量管理规范引言近年来，免疫治疗技术取得了快速的发展，其中以特异性过继免疫细胞疗法及免疫检查点抗体疗法为代表的新型免疫治疗技术因其在临床研究中取得的显著疗效而成为学术界和产业界共同关注的焦点。其中，嵌合抗原受体T细胞免疫疗法（CAR-T疗法）因其在白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤的治疗中展现出显著的治疗效果而成为国内外研究的热点。随着我国对CAR-T技术的研究不断深入，国内企业的积极布局和产业链的延伸，我国的CAR-T细胞治疗技术也在紧随国际趋势的发展。范围本标准适用于嵌合抗原受体修饰T细胞（CAR-T细胞）制剂的生产过程中的质量管理。术语和定义本标准中所涉及的术语和定义如下：基本要求本标准中所涉及的基本要求如下：基本原则制剂制备过程中应遵循规范化、标准化、系统化的原则，确保制剂质量的稳定性和一致性。人员的要求制剂制备过程中应有专职人员进行操作，且应具备相应的知识、技能和经验。场所和设施制剂制备过程中应有符合要求的场所和设施，确保制剂生产环境的洁净度和安全性。物料制剂制备过程中应使用符合规定的物料，确保制剂质量的稳定性和一致性。载体制备质粒制备和非病毒载体制备的基本要求应符合相关标准，病毒载体制备的基本要求应按照相关法规进行操作。细胞制备过程中的要求制剂制备过程中，样本的要求、T细胞的采集和分离、操作的要求、细胞转导及扩增的要求、安全性及有效性检测、CAR-T细胞制剂的质量要求、CAR-T细胞冻存、运输与复苏的要求应严格按照相关规定进行操作。CAR-T制剂的质量控制与放行制剂制备过程中应进行质量控制和放行，确保制剂质量的稳定性和一致性。追溯制剂制备过程中应建立追溯体系，确保制剂质量的可追溯性。保密原则制剂制备过程中应遵守保密原则，确保制剂技术的保密性。附则本标准的附则中列出了相关参考文献。参考文献本标准参考了相关的国内外标准和法规。CAR-T细胞治疗产业目前缺乏统一的标准和管理规范，这使得各制备机构或应用机构之间无法进行正常的评估和交流，从而不利于细胞治疗产业的专业化发展。为了确保CAR-T细胞治疗产业的规范性和安全性，必须确立安全、规范、稳定、可追溯的行业规范。因此，为了适应我国CAR-T细胞治疗产业的需要，加强CAR-T细胞治疗的管理，规范细胞制备过程，保证CAR-T细胞制品在临床应用的安全性，促进国际间同行的交流，制定中国医药生物技术行业的CAR-T细胞制剂制备质量管理规范是必要的。CAR-T细胞治疗是一种嵌合抗原受体修饰T细胞的治疗方法。本规范旨在协助CAR-T细胞制剂制备机构在制备过程中避免污染、交叉污染、混淆及差错，且保证CAR-T细胞制剂的安全性、生物学效应。本规范适用于CAR-T细胞制剂制备的所有阶段。本规范中的术语和定义包括嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞），外周血单个核细胞（PBMC），质粒，目的基因，载体，转导和冻存液。这些术语和定义旨在帮助制备机构理解和遵守本规范，以确保CAR-T细胞制剂的制备质量和安全性。CAR-T细胞制剂需要使用能够保护细胞在冷冻和复苏过程中不受损害的溶液或试剂来与活细胞相结合。标识或条码是用于区分不同对象的标记或注释，通常粘贴或附着在对象上。细胞批次是指从个体中采集的一次细胞样本，经过全过程制成的终末细胞培养物或收获物。CAR-T细胞制剂制备需要经过质粒制备、病毒制备、样本接收和处理、细胞刺激、转导、扩增、收获、质量检测、冻存和运输等全过程，每个操作环节和环境及人员都需要严格要求以确保最终产品符合标准。机构应该配备与规模相适应的专门人员，包括CAR-T细胞制剂制备人员和质量检测人员，操作人员需要具备基本的专业知识，并接受特定的专业技术培训后方可上岗。CAR-T细胞制剂制备场所应分为洁净区和非洁净区，洁净区包括细胞制备区、细胞储存区、病毒制备区、病毒储存区、中控区和部分质控区，非洁净区包括留样室、办公室、资料档案室、物料储存室和气体储存室等，各个区域相互独立。CAR-T细胞制剂制备所用的物料包括试剂耗材、生物活性分子以及与细胞制剂直接接触的包装材料和外包装材料等，应符合相应的质量标准。质粒制备是制备过程中的一个重要环节。5.1.1在样本送达时，应附上细胞制备申请单，其中包括患者的基本信息（如姓名、性别、年龄、身份证号等）、临床医学信息（如既往史、现病史、临床诊断、病理诊断、肿瘤特异性靶点信息）、实验室检测结果（如血常规及分类、病毒四项检查（HIV、HCV、HBV、梅毒）、肝肾功能）、治疗方案（如细胞的种类、治疗次数、回输方式等）以及知情同意书。5.2T细胞的采集和分离5.2.1采集应在国家卫生部门认可的采血科室进行，应用全自动血细胞分离机按照单核细胞分离程序采集外周单个核细胞富集血，或应用合格的医疗器材通过静脉采取患者外周血。根据制备要求对采集的外周血进行单个核细胞的分离及T细胞的分选，并对所分选出的T细胞进行刺激和活化。5.2.2在采集T细胞之前，应对患者进行血常规及乙型肝炎病毒（HBV）检测。对于乙型肝炎病毒阳性患者的T细胞，需要在专用细胞处理间进行细胞分离、培养和收集，以完成制备过程。5.2.3采集管路应使用一次性消耗品，并定期清洁和检测血细胞分离机。5.2.4在符合洁净要求的操作间分离PBMC，根据病人情况或实验要求再进一步确定是否分选特定细胞亚群进行转导，转导前进行细胞计数及细胞存活率测定。活化T细胞所采用的刺激抗体或磁珠抗体应符合相关质量要求。5.2.5培养过程中对培养基、活性因子等外源蛋白的要求如下：a)所有使用的培养基、活性因子等外源蛋白应有明确的来源及批号，并应有质量检定合格报告。b)CAR-T细胞体外扩增培养应避免使用异种、异体血清或血浆。所有成分应明确并符合无菌、低内毒素的质量标准，制剂中残留的培养基成分应对回输者无不良影响。5.3操作的要求5.3.1CAR-T细胞制剂的制备应按照经过验证后批准的操作规程要求进行，并有相关记录，以确保CAR-T细胞制剂达到规定的质量标准。5.3.2在感染性样本操作区以及病毒的制备区内，操作人员应穿戴该区域专用的防护服。5.3.3同一个培养箱内不得同时存放两个不同批次的细胞培养产品，以免混淆造成严重后果。应在细胞培养耗材及培养箱上进行标识。5.3.4应建立CAR-T细胞制剂以及病毒的批号编制规程和确定收获日期的操作规程。收获日期应明确日期及时间。每批细胞制剂以及病毒均应编制唯一的批号，并建立细胞制剂以及病毒的出入登记记录制度。每批次CAR-T细胞制剂的质量标准应该包括无菌检测、支原体检测、内毒素检测、外源血清残留、细胞存活率、细胞数量、细胞表型、效应细胞比率、CAR转导效率、复制型病毒等项目。检测方法可以参考现行版《中国药典》生物制品相关规程。为了确保CAR-T细胞制剂的唯一性和可追溯性，应该建立完整的细胞制备过程记录系统和标识标签系统以及免疫细胞制剂编码系统。记录和标识应当遵循相关法律和规范的要求。细胞制备记录应包括每天的细胞状况、细胞数量、转导条件、细胞因子浓度等具体信息。标识系统应记录患者姓名、病历号、病种、细胞制剂名称、批号、收获日期及时间、规格（细胞数量/体积）、储存条件、效期（精确时间）等信息。每个患者的信息应当双人复核。每份CAR-T细胞制剂必须编制唯一的编码，通过它能追溯到患者信息以及该细胞制剂操作和最终处理的所有记录，并建立相关程序能够关联新旧编码。为了保护病人的隐私信息不被泄露，应采取措施。其他关于免疫细胞制备的要求以