霉菌和酵母菌认知 霉菌的形态观察_第1页
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文档简介

基本原理霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子，霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3~10μm），通常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此用低倍显微镜即可观察。直接制片观察法载玻片培养观察法玻璃纸培养观察法目录直接制片观察法1基本原理霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制作标本时常将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。此染色液制成的霉菌标本片的特点是：细胞不变形；具有杀菌防腐作用。且不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；溶液本身呈蓝色，能增强反差；必要时还可以用树胶封固，制成永久标本。基本步骤洁净的载玻片→滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液→盖上载玻片→观察解剖针从霉菌菌落的边缘处取少量带有孢子的菌丝↓置于50%乙醇中浸一下↓载玻片培养观察法2基本原理此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上，接种后盖上载玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载波片的培养物置显微镜下观察。这种方法既可保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。基本步骤（1）培养小室的灭菌（2）琼脂块的制作（3）接种（4）培养（5）镜检玻璃纸培养观察法3基本原理此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，将霉菌生长在覆盖于琼脂琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。具体方法与放线菌的玻璃纸培养观察方法相似。这种方法用于观察不同生长阶段霉菌的形态，也可获得良好的效果。基本步骤（1）向霉菌斜面试管中加入5mL无菌水，洗下孢子，制成孢子悬液（2）用无菌镊子将已灭菌的、直径与培养皿相同的圆形玻璃纸覆盖于察氏培养基平板上（3）用1mL无菌吸管吸取0.1mL孢子悬液于上述玻璃纸平板上，并用无菌玻璃刮棒涂抹均匀（4）置于28℃温室培养48h后，取出培养皿，打开皿盖，用镊子将玻璃

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