PCR实验室可开展项目_第1页
PCR实验室可开展项目_第2页
PCR实验室可开展项目_第3页
PCR实验室可开展项目_第4页
PCR实验室可开展项目_第5页
已阅读5页,还剩11页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

PCR第一篇:PCR试验室可开展工程基因扩增试验又称PCR试验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物学争论和试验的常规方法,广泛应用于生物学各个领域,如:检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病,癌基因的检测和诊断,DNA指纹、个体识别、亲子鉴别及法医物证,动、植物检疫,动物及其衍生产品检测,动物饲料、扮装品、食品卫生检测,转基因作物与转基因微生物检测等。基因扩增试验室又称PCR试验室,试验室原则上分为四个单独的工作区域,前两区为扩增前区,后两区为扩增后区。扩增前区与扩增后区应严格分开。试验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂预备区→样品处理区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流淌。试验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流淌。各工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的工作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各区之间假设是严密相连,需安装物品传递窗。每个工作区域的顶部应安装紫外灯,紫外灯254nm20m240W试验室较为抱负的布局模式为有一个专用走廊,试剂预备区、标本制备区、扩增区和产物分析区很标准地排列在一起,前三个区各有一个缓冲间,可供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。内试验区域设为正压或常压状态,缓冲间内设为负压状态〔可上设一抽风装置〕,使这三个区的空气流向为由试验区域内向外,缓冲间内通向内试验室和走廊的门可安装一种连锁装置,当一个门翻开时,另一门必需处于关闭状态,防止消灭两个门同时翻开的状况。产物分析区可不设缓冲间,但应设为负压状态〔装一个排风扇即可〕,使空气流向由外向内,以防止扩增产物的随空气流出。每一区域都须有明确的标记,工作按试剂预备区、标本制备区、扩增区至产物分析区单一流向进展,各区的仪器设备包括工作服、鞋、试验记录本和笔等都必需专用。假设无法作到以上模式,以下根本要求必需做到:1、四个区域必需是相互独立的;2、各区的仪器设备及各种物品必需是专用的;3、各区完全独立,缓冲间可有可无。如为一个区套一个区的模式,区间不能直通,应有缓冲间,供换工作服及鞋子用,并保证两个区域间始终处于完全的分隔状态;4、产物分析区应安装排风扇或其它抽风装置,维持负压。试验室空调通风系统设计及压力把握各个区域之间应具备单向的试验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避开试验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对试验过程造成污染产生假性结果。PCR试验室并没有严格的净化要求,但是为避开各个试验区域间穿插污染的可能性,宜承受全送全排的气流组织形式。同时,要严格把握送、排风的比例以保证各试验区的压力要求。试验室装修试验室的墙体,包括顶棚,应构造结实、气密性好;全部阴角宜承受圆弧形线条过渡;墙体内壁光滑、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光滑、耐腐蚀的要求。其次篇:PCR试验室简介Pcr试验室又叫基因扩增试验室。PCR是聚合酶链式反响(PolymeraseChainReaction放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特别DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能快速把握患者体内的病毒含量,其准确度高达纳米级别,准确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否特别转变能准时推断病人最适合使用哪类抗病毒药物、推断药物疗效如何、给临床治疗提供了牢靠的检验依据条件1PCR荧光试验室;实时荧光定量PCR技术于1996AppliedBiosystems公司推出由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、方法及参照问题作一介绍2、检测设备必需符合标准PCR荧光试验室设置要求;荧光定量PCR仪+实时荧光定量试剂+通用电脑+自动分析软件,构成PCR-DNA/RNA3、必需通过国家临床检验中心的验收和认证;4、检测人员必需通过国家临检中心业务培训并取得合格证书;PCR试验室内工作人员必需参与由国家卫生部或各省临床检验中心举办的临床基因扩增培训班,并持证上岗。PCR试验室通过验收,试验室至少必需应有两个以上持有“临床基因检测上岗证”。PCR试验室必需建立严格的试验室治理制度、建立标准化操作程序〔SOP〕、建立系列质量治理文件等,确保试验室日常运行符合国家卫生部的要求,确保检测结果准确、确保试验室卫生安全,确保试验室长期稳定运行5、必需在无菌无尘环境下进展操作功能能够对患者病情进展科学、准确、实时的掌控,并结合抗HBV与T细胞免疫来打破免疫耐受,阻断肝病病毒复制的疗法、有效的分解肝炎病毒,解决了乙肝病毒易变异、耐药,病毒复制模板难以治疗,人体免疫耐受状态不易打破等医学难题,能快速消退临床病症,而且有效抑制乙肝病毒复制,明显加快e抗原、抗体的血清转换速度,杀灭血液及肝细胞内的病毒,为防止再感染供给了长期保护,有效阻断和逆转肝纤维化、肝硬化进程。建立方法1、建立样品预备区这个区域特地用作样品的预备,在制备和操作用于核酸提取的试剂时应当实行预防措施:⑴PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。⑵组织培育物、组织标本和血清样品都带进样品预备间处理,以依据应用的需要提取DNA或RNA。⑶用于样品处理的工具不能被用作一般分子克隆的工具,也不能用作操作靶序列。⑷DNA样品应当用有特地的防护或正压活塞式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。⑸大体积样品应当用单独包装的无菌一次性移液管吸取。⑹管子翻开前都要简短离心以削减气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。⑺任何时候都应当穿试验服和带手套,手套要常常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。试验服要特地用于样品预备间,常常清洗。2、样品预备和RNA-PCRRNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的时机。为了避开这一问题,反转录RNA-PCR中应用UNG以防止污染的方法也有报道。3PCR该去特地用于预备各种反响,这个区域必需保持干净,而且没有来自克隆和样品预备的污染。前PCR区必需要有试剂和预备,特别是PCR4、PCR⑴所用的全部溶液都应当没有核酸和〔或〕核酸酶〔 DNase和RNase〕污染。⑵全部PCR试剂中使用的水都应当是高质量的-颖蒸馏的去离子水,用0.22μm过滤的,并且是高压灭菌。⑶在20℃到25℃贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂,在扩增试剂或样品制备试剂中参与0.025%的叠氮钠不抑制扩增反响。⑷所用试剂都应当以大体积配制,试验一下看试剂是否满足,然后分装成仅够一次使用的量进展贮存。⑸全部试剂和样品预备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。⑹配制的试剂在用于预备的标本之前应当加以检验。⑺样品预备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应当留神保存。5PCRPCR⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃,在试验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。⑵假设你的试验室使用多套引物,以致于配制包括全部试剂的单一反响混合物不够经济,可以考虑分装保存够一天的PCR成分。⑶作为一个规章,应当保存一套阴性、弱阳性和强阳性比照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和干净程度。而且,你也期望通过使用一个的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。⑷阴性样品要与每组样品同时做,以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染,阴性比照顾当包括核酸以外的全部试剂。⑸当做阳性比照时,有两个理由打算了应当使用最少数量的核酸。⑹由于必需有比照反响,比照模板的特点应当予以考虑。6、把握污染的方法。已设计出很有力的酶学方法用来消退一种形式的污染—使用UNG,这一技术能有效地消退由PCR产物引起的污染。另一种把握污染的方法是使用紫外线,这种方法不能完全消退污染问题,但可以将污染降低几个数量级。7、后PCR区PCR完成以后,需要分析样品并解释数据,应当留出一个特地用于反响后处理样品的地方。后PCR活动中使用的所用试剂、一次性耗材和仪器都必需是特地用于这一目的,决不能把试验室PCR第三篇:PCR试验室高端PCR试验室把握设计说明PCR试验室即分子生物学试验室,在医疗、科研、生物技术方面得到广泛的应用。因其在不同行业的应用各有区分,在具体设计时也有不同之处,就医疗机构的应用而言,主要使用三区或四区设计,即试剂预备区、样品提取区、扩增分析区;此类三区设计时候应用于类似荧光定量型或同类PCR分析设备,及扩增与分析过程在设备内一次完成。而四区设计在三区的根底上讲扩增分析区拆分为扩增区与分析pcr在PCR试验的设计上,经过多年的阅历累积,已经在一些关键技PCRDNA与RNA片段过于微小,以至于可以穿透高效过滤器,所以在试验室设计上已经不在强制要求设计高效净化系统,但是为了提高试验环境水平及保护试验室内的敖贵设备方面,假设在具备条件的状况下可考虑追加高效空气净化PCRDNARNA污染是始终以来PCR试验的重点问题。此类污染主要至上次试验中所产生的基因片段对下次试验产生的污染,而且一旦试验环境中的污染形成后很难处理。由于消毒等传统方式对于基因污染没有很良好的效果。所以在PCR试验室设计中一般将整套试验室设计为全风型试验室,这样而已通过有效的换气次数来到达净化室内污染的作用。而在把握方面也有很多不同之处,由于各单位对PCR试验的重视程度各有不同,所以在设计上也有不同,主要的把握设计有定送定排式压力控制系统、变送定排式压力把握系统变送变排式压力把握系统。在把握设备方面也有很多区分如压力无关型把握系统、压力有关型把握系统。依据业主要求,本PCR试验室为三区设计,各区可独立使用,不设置高效过滤系统等相关要求,依据业主以上要求,我方给出的设计方案为压力无关型变送变排压力把握系统。本系统的特点是,设备启动后可依据试验室内使用节点调整送风量及排风量来把握各房间状态,系统说明见以以下图每个房间可分别把握,使用时通过房间开关输出启动信号,当设备接到启动信号时设备运行,运行中依据管道压力反响打算变频器大小,房间内送排风量由压力无关型风量调整阀把握。当有多个房间开启或关闭时,设备更加管道压力反响,调整设备变频器增加或减少送排风量来稳定管道压力。各房间内压力又房间内的压力无关型定风量阀进展把握。当BSC〔生物安全柜,B2全排〕开启时BSC专用供风机组运行,BSC-供风机-排风机连锁运转。当BSC做变风量调整时,依据房间内压力变化,BSC专用供风机组前安装的压力无关型变风量调整阀依据压力变化增减送风量,确保房间压力执行在可控范围内。当房间不适用时,房间与缓冲间均关闭电动密闭阀,确保房间处在密闭状态避开布朗运动造成的可能污染风险。房间换气次数均依据确定净化标准设计,当室内污染发生时,通过确定时间的换气处理后,污染问题可以根本解决。本系统假设业主需要,可在室内送风口末端加装高效过滤设备,房间可升级为净化型试验室。压力无关型风阀简介:压力无关型风阀的特点是不会依据管道压力的变化而影响风阀内部的送风量,在确定管道压力区间内能够自行调整阀体阻力,来稳定送风量,是高端试验室必备的关键部件,目前此类阀体技术均有国外生产厂家把握,目前国内主用使用的产品有妥思、文丘里、西门子等品牌。第四篇:PCR试验室说明PCRPCR试验室分为四个区域,进入各工作区域必需严格依据单一方向进展,不同的工作区域使用不同的工作服〔例如不同的颜色〕。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:1.试剂配制区n2n3.n4n如使用全自动,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。各区的功能是:1.1.1试剂预备区:扩增试剂的配制、分装和保存。1.1.2样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。 1.1.3扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。1.2扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。1.3使用商品化试剂盒可在样品处理区进展少量试剂配制。在满足以下操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂预备区可设在同一房间内:1.4.1在生物安全柜内操作。1.4.2每个试验人员、试验组分别使用各自的试剂及耗材。1.4.3盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。1.4.4用有效的方法对操作区域和共享器具在试验前后进展清洁及消毒。设计要求:PCR试验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。完成一组PCR试验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个试验过程,假设试验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。一、分散形式PCR试验室所谓分散形式PCR试验室,是指完成上述试验过程的试验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR试验室,由于各个试验之间不易相互干扰,因此无需特别条件要求。二、组合形式PCR试验室所谓组合形式PCR试验室,是指完成PCR四个试验过程的试验用房相邻布置,组成独立试验区域的形式。对于组合形式PCR试验室,由于各个试验间集中布置,简洁造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有确定的要求。各室在入口处设缓冲间,以削减室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过把握进风风量大于排风风量到达正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶集中出去污染试剂与样品,可以通过把握排风风量大于进风风量到达负压效果。在抱负状况下,PCR试验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。PCR试验室进风由原有中心空调把握,要求将中心空调风口安装2600mm假设使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。假设房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在削减室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。各个区域之间应具备单向的试验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避开试验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对试验过程造成污染产生假性结果。试验室的墙体,包括顶棚,应构造结实、气密性好;全部阴角宜承受圆弧形线条过渡;墙体内壁光滑、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光滑、耐腐蚀的要求。假设使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。假设房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在削减室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。各个区域之间应具备单向的试验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避开试验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对试验过程造成污染产生假性结果。试验室的墙体,包括顶棚,应构造结实、气密性好;全部阴角宜承受圆弧形线条过渡;墙体内壁光滑、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光滑、耐腐蚀的要求。主要设备试剂预备区仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、天平除了要专用外,还应有定期校准。试剂分装应在超净台中进展扩增反响混合液应使用分子生物学级的,试剂制备好后应有质检:一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。标本制备区仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等扩增区扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。扩增仪需进展校准。并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对扩增效果的影响。分析区本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等干净试验区的缓冲间局部面积不能超过主试验室的八分之一,这是有规定的.1、主体构造:主体为彩钢板、铝合金型材。室内全部阴角、阳角均承受铝合金50内圆角铝,从而解决简洁污染、积尘、不易清扫等问题。构造结实,线条简明,美观大方,密封性好。2、标准的四区分隔和气压调整:将PCR过程分成试剂预备、标本制备和PCR扩增,产物分析四个独立的试验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立试验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调整,使整个PCR试验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。可翻开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ和PCR扩增区的排风扇往外排气,在试验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。3、消毒:在三个试验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。在试剂预备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对试验桌进展局部消毒。4、不锈钢传递窗:试剂和标本通过机械连锁不锈钢〔不建议使用电子连锁方式〕传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染〔人物分流〕。5、地面地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进展清扫,耐腐蚀。6、照明灯具要选用净化灯具,能到达便于清洗、不积尘的特点。在建设的过程中应留意:●标准的安装流程和全面的效劳流程。●严格依据标准科学设计的安装流程。●安装前需要确定以下安装条件,如:电源电压,电源进线位置,网络线进线位置,进水水压,最小安装空间,地面平坦度,通风孔、进水管和下水管的位置等,抱负状态三、工作区域及设备要求〔一〕试剂储存和预备区1、2-8C和-15C冰箱2、混匀器3、微量加样器〔1-1000ul〕4、移动紫外灯〔近工作台面〕5、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头〔带滤心〕6、专用工作服和工作鞋7、专用办公用品〔二〕标本制备区1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱2、高速台式冷冻离心机3、混允器4、水浴箱或加热模块5、微量加样器〔1-1000ul〕6、可移动紫外灯〔近工作台面〕7、生物安全柜8、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头〔带滤心〕9、专用工作服和工作鞋10、专用办公用品如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪。〔三〕扩增反响混合物配制和扩增区1、核酸扩增仪2、微量加样器〔1-1000ul〕3、可移动紫外灯〔近工作台面〕4、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头〔带滤心〕5、专用工作服和工作鞋6、专用办公用品(四)扩增产物分析区视检验方法不同而定。根本仪器设备如下:1、微量加样器〔1-1000ul〕2、可移动紫外灯〔近工作台面〕3、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头〔带滤心〕4、专用工作服和工作鞋5、专用办公用品5.人员和样品的安全是由生物安全柜和定向气流共同来保证。PCR试验室设计规程中规定人员和样品必需单向流淌。即从“试剂预备区到样品制备区,再从样品制备走向扩增区和产物分析区”,确定不能反向流淌,以辟免穿插污染。气流方向只规定试剂预备区为微正压或常压,样品制备区为常压或负压,扩增区和产物分析区为负压,压力梯度是从试剂预备到产物分析区,是高到低的。规程并没有规定要做成全风系统,但是为降低穿插污染的风险,建议做成全风系统。概述临床基因扩增试验又称PCR试验,是特地用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进展扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出一般检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生广为认可,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。但是,这种试验需要有能保证确定安全、配置合理的试验室和格外标准的操作为前提。近年来对临床基因扩增检验试验室的建设越来越得到重视,由于它对检测结果的牢靠性、准确性和安全性起到至关重要的作用。本文主要从临床基因扩增检验试验室的平面布局,空调通风系统设计、气流把握和污染的防制几个方面对试验室设计中的主要特点进展了阐述。临床基因扩增检验试验室设计的核心问题是如何避开污染。因此,试验室的平面布局、空调通风系统设计、气流把握等都是围绕这个核心问题进展的。下面就对这几个方面分别进说明。2PCR试验室平面布局临床基因扩增检验试验室原则上分为四个单独的工作区域:试剂贮存和预备区、标本制备区、扩增反响混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免穿插污染,进入各个工作区域必需严格遵循单一方向进展,即只能从试剂贮存和预备区→标本制备区→扩增反响混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。各试验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进展。PCR1所示。图1PCR试验室平面布置示意图3试验室空调通风系统设计及压力把握PCR试验室并没有严格的净化要求,但是为避开各个试验区域间穿插污染的可能性,宜承受全送全排的气流组织形式。同时,要严格把握送、排风的比例以保证各试验区的压力要求。3.1试剂贮存和预备区该试验区主要进展的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反响混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必需贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压3.2标本制备区该区域主要进展的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其参与至扩增反响管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避开从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避开在本区内不必要的走动。3.3扩增反响混合物配制和扩增区该区域主要进展的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的参与和主反响混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反响混合液等也可在本区内进展。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必需翻开反响管,因此巢式扩增有较高的污染危急性,其次次加样必需在本区内进展。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避开气溶胶从本区漏出。为避开气溶胶所致的污染,应尽量削减在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进展。3.4扩增产物分析区该区域主要进展的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭器检测,此区域可不设。本区是最主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避开扩增产物从本区集中至其它区域。4污染的预防与把握PCR试验室设计的核心问题是如何避开污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;自然基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,试验就必需停顿,直到找到污染源为止,而且试验结果必需作废,需重进展实验。所以发生污染后再围绕试验室来查找污染源不但耗时而且繁琐,铺张人力物力。因此要避开污染,首先应是预防,而不是排解。4.1工作区域的严格划分〔1〕各个试验区域设置合理;〔2〕各个试验区域要有明显的标记〔如醒目的门牌或不同的地面颜色等〕,以避开各个不同试验区域设备物品、试剂等发生混淆。4.2合理的系统设置〔1〕合理的空调通风系统设置,尽量承受全送全排的空调系统;〔2〕严格的气流压力把握,保证不同的试验区内不同的压力要求。4.3标准的操作〔1〕临床基因扩增检验试验室的技术人员必需进展上岗培训,经培训合格后才能从事临床基因扩增检验的工作;〔2〕在试验操作过程中,操作者必需戴手套,并常常更换。此外,操作中使用一次性帽子也是一个有效地防止污染的措施;〔3〕清洁工作准时、正确。试验工作完毕后,必需马上对本区进展清洁。除常规的消毒液体对外表进展擦拭消毒或紫外线灯的照耀消毒外,对一些试验设备还应进展高压消毒处理。4.4严格的治理〔1〕严格把握进出试验室的人员。与试验无关的人员不得任凭进出试验室,有条件的状况下要设置独立的通道和进出整个试验区的门;〔2〕在各个试验区域使用带有明显区分标志的工作服〔如不同颜色〕,当工作人员离开时不得将本区的工作服带至其它区域;〔3〕尽量削减在试验区内不必要的走动以削减穿插污染的可能性。〔4〕扩增产物分析区是最主要的扩增产物污染来源,废液不能在试验室中倾倒,必需经消毒液浸泡消毒后在远离试验室的地方弃掉,用过的吸头等一次性材料也应经消毒液浸泡消毒后统一处理,如燃烧等;〔5〕扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质,4.5完备的试验室配套设施完备的试验室配套设施是保证明验工作的必要条件,应依据各个试验室试验内容的不同配备相应的设备和仪器,如超净工作台、离心机、加样器等。PCR试验室并没有严格的净化要求,但是为避开各个试验区域间穿插污染的可能性,宜承受全送全排的气流组织形式。同时,要严格把握送、排风的比例以保证各试验区的压力要求。3.1试剂贮存和预备区该试验区主要进展的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反响混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必需贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的把握,本区并没有严格的要求。3.2标本制备区 该区域主要进展的操作为临床标本的保存、核酸 (RNA、DNA)提取、贮存及其参与至扩增反响管和测定RNA时cDNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避开从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论