细胞因子及抗体检测技术课件

细胞因子及抗体检测技术细胞因子及抗体检测技术1背景知识◎研究细胞因子对阐明机体免疫应答及其调节机制、免疫相关疾病的发生、发展规律和指导临床治疗均具有重要意义抗体具有高特异性、高亲和力等特点,目前已广泛应用于免疫学、微生物学、肿瘤学、遗传学以及分子生物学等各个领域背景知识2细胞因子的检测方法:1)生物学方法①依赖性细胞株:生物分析法②功能检测:生物分析法2)分子生物学方法①分子杂交技术:mRNA表达水平的测定②多聚酶链反应技术(PCR):mRNA的测定3)免疫学方法①免疫测定:免疫酶技术②功能测定与抗体抑制细胞因子的检测方法:3抗体检测技术◎免疫酶技术◎免疫荧光技术lmlIa◎间接血凝试验.3e-009.thcepioterabusviusMHALLFSPLLVLGVEUNS卫ELE放射免疫测定FER.HKPPDACR出PAEDXHWLR◎蛋白印迹JILNhLDJECDIHC'UKP◎免疫共沉淀观BLE以深邻0亲和力测定GDEVEDFVETILPDY4.493aVD抗体检测技术4酶联免疫吸附测定实验(ELISA)Enzymelinkedimmunosorbentassay公司DH5ang/ml酶联免疫吸附测定实验5≯基于N30抗独特型抗体可替代虫源性抗原≯率先应用生物技术制备抗原代替传统虫源抗原≯血吸虫抗体属短程抗体,治疗后阴转较快,具有疗效考核价值≯该试剂盒的诊斷效能多项指标均已达到或超过经典抗体检测法,较以前病原学检查和免疫学检测方法,更为简便快速≯优点:仅用一滴血,20分钟即可判读结果,不需其他仪器设备,便于在基层、现场使用≯本试剂盒已在血吸虫流行区已应用近120万人次面面面目≯基于N30抗独特型抗体可替代虫源性抗原6管晓虹(1946-2012),女,汉族,江苏丹阳人,博士,教授,博士生导师。农工民主党员。农工民主党第十二、十三届中央常委,第九、十届全国人大代表江苏省妇联副主席1970年毕业于中国协和医科大学;1981和1985年先后在原南京医学院获医学硕士和医学博士学位;198年在美国布朗大学作博士后研究曾任寄生虫学教研室副主任、江苏省医学分子生物学重点实验室主任、卫生部抗体技术重点实验室主任。承担国家“七五”八五”、“九五”科技攻关项目各1项(血吸虫病免疫诊断);国家“863”计划项目1项和国家自然科学基金项目6项;发表论文100余篇;主编或参编卫生部规划教材6部;获部省级科技进步二等奖2项、三等奖2项;获国家发明专利授权6项。获“全国优秀教师”国家级有突出贡献的中青年专家”等荣誉称号。享受国务院政府特殊津贴管晓虹(1946-2012),女,汉族,江苏7实验原理是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的种免疫技术此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速优点:微量、特异、高效、经济、方便、安全等广泛用于生物学和医学科学的许多领域实验原理8实验原理ELISA利用了免疫反应的高度特异性和酶促反应的高度敏感性检测抗原或抗体1.使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性2.使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性3.按一定步骤进行抗原抗体反应4.加底物显色,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析实验原理9方法类型ELISA既可测抗原又可测抗体,根据试剂来源、标本性状以及检测的具体条件,可设计出不同类型的检测方法:1.直接法2.间接法3.双抗体夹心法4.双夹心间接法方法类型10细胞因子及抗体检测技术课件11细胞因子及抗体检测技术课件12细胞因子及抗体检测技术课件13细胞因子及抗体检测技术课件14细胞因子及抗体检测技术课件15细胞因子及抗体检测技术课件16细胞因子及抗体检测技术课件17细胞因子及抗体检测技术课件18细胞因子及抗体检测技术课件19细胞因子及抗体检测技术课件20细胞因子及抗体检测技术课件21细胞因子及抗体检测技术课件22细胞因子及抗体检测技术课件23细胞因子及抗体检测技术课件24细胞因子及抗体检测技术课件25细胞因子及抗体检测技术课件26细胞因子及抗体检测技术课件27细胞因子及抗体检测技术课件28细胞因子及抗体检测技术课件29细胞因子及抗体检测技术课件30细胞因子及抗体检测技术课件31细胞因子及抗体检测技术课件32细胞因子及抗体检测技术课件33细胞因子及抗体检测技术课件34细胞因子及抗体检测技术课件35细胞因子及抗体检测技术课件36细胞因子及抗体检测技术课件37细胞因子及抗体检测技术课