实验叶绿体中色素的提取和分离

实验叶绿体中色素的提取和分离实验原理(1)提取：绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇中。(2)分离：各种色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。因而色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。操作流程(1)提取色素取材：称取5g绿色叶片

↓研磨：剪碎叶片，加少许SiO2和CaCO3，再加入15mL无水乙醇，迅速研磨

↓过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布，将滤液迅速倒入玻璃漏斗中进行过滤

↓中的色素：将5mL层析液倒入试管中，装置如图所示，插入滤纸条(有滤液细线的一端朝下)，随后用软木塞塞紧试管口注意：不能让小滤纸条上的滤液细线触到层析液

观察结果：滤纸条上色素带有四条，如图所示叶绿体色素层析装置示意图实验点拨(1)实验中几种化学试剂的作用①无水乙醇用于提取绿叶中的色素。②层析液用于分离绿叶中的色素。③二氧化硅可增加杵棒与研钵间的摩擦力，易破坏细胞结构，使研磨充分。④碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。(2)提取色素时应注意的几个问题①菠菜叶应剪碎，有利于研磨。②研磨要迅速充分，其目的是防止乙醇挥发并充分溶解色素。③过滤时用单层尼龙布，有利于收集色素。④收集滤液时要及时用棉塞塞紧，其目的是防止乙醇挥发及色素分子被氧化。(3)制备滤纸条需注意的问题①制备滤纸条时，要在画滤液细线的一端剪去两角。这是由于层析时，边缘扩散快，中间扩散慢，剪去两角可使层析液同时到达滤液细线，从而使每条色素带呈一条直线。②画滤液细线时，为了层析时起点相同以避免色素带重叠，要求细而直；同时，要待干燥后，重复1～2次以增加色素含量，增强实验效果。③分离色素时，一定不能让滤纸上的滤液细线触及层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。(4)影响色素溶液的因素①叶片颜色：叶片浓绿，色素溶液浓度高。②碳酸钙：不加碳酸钙，色素被破坏，色素溶液浓度低。③二氧化硅：不加二氧化硅，研磨不充分，色素溶液浓度低。④提取液的量：加入提取液过多，色素溶液浓度低。实战演练1．提取光合色素，进行纸层析分离，对该实验中各种现象的解释，正确的是(

)A．未见色素带，说明材料可能为黄化叶片B．色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液C．提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素bD．胡萝卜素在滤纸最前方，是因为其在提取液中的溶解度最高解析：选C。叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂中，由于叶绿素含量比胡萝卜素多且叶绿素呈现绿色，所以提取液呈现绿色。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，如胡萝卜素在层析液中扩散得最快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢，如叶绿素b。A选项中未见色素带，其原因是操作失误，不可能是选材不正确，即使是黄化叶片也应该有色素带，主要是叶黄素和胡萝卜素。2．某同学在做提取叶绿体中色素的实验时，收集到的色素提取液为淡绿色。分析产生该结果的可能原因是(

)①研磨不充分，色素未能充分提取出来②乙醇加入量太多，稀释了色素提取液③乙醇加入量太少，色素未提取出来④未加CaCO3粉末，叶绿素分子已被破坏A．①②④

B．①③④C．③④D．①②解析：选A。实验中收集到的色素滤液为淡绿色，说明单位体积滤液中叶绿素含量少。其中原因可能是①实验材料含叶绿素少；②操作中研磨不充分、不迅速；③乙醇加入量太多；④研磨时未加CaCO3。3．在圆形滤纸的中央，滴上绿叶中的色素滤液进行色素分离，可看到近似同心环状的四个色素圈，排在最外的一个呈(

)A．蓝绿色B．黄绿色C．黄色D．橙黄色解析：选D。因为呈橙黄色的胡萝卜素扩散的速度最快，因此排在最外一圈。4．下列哪组是影响叶绿体色素分离效果的关键因素(

)①选取植物②研磨③过滤④画滤液细线⑤层析时不要让滤液细线触及层析液⑥观察色素带A．①②⑤B．①②③C．②③④D．②③⑥解析：选A。要选取叶绿素含量高的植物叶片,研磨要充分，得到的色素多，滤液细线不要触及层析液，才能达到满意的分离效果。5．分别在A、B、C三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色(或褐色)、几乎无色。处理ABCSiO2(少量)＋＋＋CaCO3(少量)－＋＋95%乙醇(10毫升)＋－＋蒸馏水(10毫升)－＋－注：“＋”表示加；“－”表示不加。试回答：(1)A处理得到的溶液颜色是________，原因是________________________________。(2)B处理得到的溶液颜色是________，原因是________________________________。(3)C处理得到的溶液颜色是________，原因是________________________________。解析：观察表中A、B、C三个研钵的处理与结果的关系。(1)因为A中未加CaCO3，使其中的部分叶绿素受到破坏，所以溶液颜色为黄绿色。(2)B中加入了SiO2和CaCO3，研磨出的叶绿素等色素不能溶解于蒸馏水中，故溶液几乎无色。(