《生物化学》实验教学大纲（供本科临床医学、口腔医学等专业使用）

《生物化学》实验教学大纲（供本科临床医学、口腔医学等专业使用）Ⅰ前言生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,发挥学生的主体作用，教师只做必要的实验原理和注意事项的讲解，并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，提高学生的实践能力和创新能力，目的在于培养学生的动手能力和解决实际问题的能力。本大纲适用于本科临床医学、口腔医学、法医学、医学检验技术、麻醉学、食品质量与安全、医学影像学、预防医学、临床药学专业使用。现将大纲使用中有关问题说明如下:一为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别,教学内容与教学要求级别相对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示)便于学生重点学习。二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容，有的内容可留给学生自学。三总教学参考学时为32学时。四教材：《生物化学与分子生物学实验教程》，第四军医大学出版社，陆红玲，1版，2010年。Ⅱ正文实验一生物化学实验技术简介一教学目的通过本次实验的学习，掌握实验室须知，实验报告的书写格式和要求；掌握分光光度计操作，玻璃仪器的使用和清洗。二教学要求（一）掌握实验室须知，实验报告的书写格式和要求。（二）掌握分光光度计操作，玻璃器皿的正确使用和清洗。（三）熟悉实验基本技术：分光光度法、层析法、离心法、电泳法等。（四）了解生化实验样品制备。三教学内容（一）观看生化实验基本技术录像片40分钟。（二）实验室规则，实验报告的书写格式和要求。（三）介绍生化实验样品制备。（四）分光光度计操作。（五）玻璃仪器的正确使用和清洗。实验二蛋白质定量分析：BCA法一教学目的在学习BCA法测定蛋白质的原理及操作的基础上，进一步复习分光光度法测定的实验原理及熟练掌握操作技能，了解蛋白质的含量测定的多种方法。二教学要求（一）掌握BCA法测定蛋白质的基本原理：利用碱性条件下蛋白质将二价铜离子还原为一价铜离子，后者使二辛可酸（BCA）还原为稳定的紫蓝色复合物的特点进行蛋白质含量测定。掌握分光光度法在实验中的应用及实验结果的计算。（二）熟悉BCA法的操作步骤及注意事项。（三）了解利用蛋白质理化性质进行蛋白质含量测定的多种方法。三教学内容（一）BCA法测定蛋白质的原理及注意事项。（二）利用蛋白质理化性质进行蛋白质含量测定的多种方法。（三）实验操作：将待测样品与BCA工作液混匀后保温，用分光光度计进行比色。（四）通过用牛血清蛋白制备的标准曲线计算样品中蛋白质含量。实验三血清γ-球蛋白的提纯一教学目的学习综合利用盐析、凝胶层析、透析等多种实验技术对蛋白质进行分离纯化的方法。

二教学要求（一）掌握盐析、凝胶层析、透析法分离纯化蛋白质的基本原理。（二）熟悉实验操作及注意事项，蛋白质及NH4＋定性检测的几种方法。三教学内容（一）盐析、凝胶层析、透析法分离纯化蛋白质的基本原理、实验操作及注意事项。（二）实验操作：运用分段盐析法分离、提取γ-球蛋白；凝胶层析法将γ-球蛋白与NH4＋分离，以纯化γ-球蛋白；透析法将清蛋白与NH4＋分离，以浓缩、纯化清蛋白。（三）应用双缩脲试剂或磺柳酸试剂对分离提取液进行蛋白质的定性检测，应用纳氏试剂对液体中的NH4＋进行定性检测，判定分离纯化结果。实验四质粒DNA的提取一教学目的学习质粒DNA提取的基础上，掌握质粒基本特点，掌握离心机、移液枪的工作原理及正确使用。

二教学要求（一）掌握质粒基本特点，掌握离心机、移液枪的工作原理及正确使用。（二）熟悉试剂盒提取质粒的操作步骤及注意事项。（三）熟悉核酸浓度测定。(四)了解质粒提取实际应用。三教学内容（一）实验原理：质粒基本特点，质粒提取的基本方法，试剂盒提取质粒的原理，实验中各种试剂的作用；实验注意事项。（二）实验操作：试剂盒提取质粒，质粒DNA浓度测定。（三）离心机、移液枪的正确使用。实验五琼脂糖凝胶电泳一教学目的在学习琼脂糖凝胶电泳法分离、鉴定DNA基础上，掌握核酸分离、纯化常用方法之——电泳的实验原理，加深对核酸基本性质的理解。二教学要求（一）掌握电泳的实验基本原理及琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定DNA原理。（二）熟悉琼脂糖凝胶电泳的操作、注意事项；熟悉凝胶成像仪观察电泳结果。（三）了解电泳分类。三教学内容（一）常用电泳的实验基本原理及琼脂糖凝胶电泳分离、纯化DNA原理，操作注意事项。（二）凝胶成像仪观察电泳结果。（三）实验操作：制备凝胶、点样、电泳，凝胶成像仪观察电泳结果。实验六血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法）及肾上腺素对血糖浓度的影响一教学目的学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上，掌握血糖的正常参考值，掌握肾上腺素对血糖浓度的影响，熟悉尿糖的半定量检测。

二教学要求（一）掌握血糖的正常参考值，复习血糖的来源与去路；掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。（二）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。（三）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理，血清的制备，血糖浓度及血糖增高率的计算，尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。(四)了解动物耳缘静脉取血法，血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。三教学内容（一）实验原理：血糖的正常参考值，血糖的来源与去路，血糖调节的几种因素，肾上腺素对血糖浓度的影响机理，血糖测定的临床意义，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理；尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。（二）实验操作：血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响（收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血，制备血清，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度）；尿糖半定量检测。（三）计算血糖浓度及血糖增高率。实验七金氏法测定血清谷丙转氨酶活性一教学目的学习运用比色法测定血清谷丙转氨酶活性，了解转氨酶的作用及临床意义。

二教学要求（一）掌握实验原理中与理论课相关的知识：转氨基反应、转氨酶的作用、存在部位的特点及临床意义、影响酶活性测定的因素。（二）掌握金氏法测定血清谷丙转氨酶活性的原理。（三）熟悉实验操作及注意事项，进一步掌握标准曲线的绘制以及酶活性单位的计算。三教学内容（一）实验原理：谷丙转氨酶催化丙氨酸脱氨基生成丙酮酸，后者可在碱性条件下与2,4-二硝基苯肼结合而显色，通过比色分析即可测定谷丙转氨酶活性。（二）实验操作步骤及注意事项。（三）根据实验结果计算各管酶活性单位，在绘制的标准曲线上查找样品中谷丙转氨酶的活性。实验八牛血清白蛋白的分离纯化与鉴定一教学目的利用所学理论知识及实验方法设计实验，从牛血清中分离纯化及鉴定牛血清白蛋白。

二教学要求（一）掌握实验设计的基本过程和方法，培养分析问题、解决问题的能力。（二）熟悉常用实验仪器及玻璃器皿的正确使用。三教学内容（一）学生灵活运用已学过的知识，进行实验设计。（二）根据设计的实验，进行规范操作及正确使用常用实验仪器及玻璃器皿。（三）完成实验报告。Ⅲ教学组织与方法一实施机构：由基础医学院生物化学教研室执行。二组织内容：集体教学备课、教案讲义审核、教学方法研究、教学手段应用。三教学方法：1实验教学：集体备课，布置实验内容，课堂讲解和演示，学生独立操作。2教学点：在生物化学实验室教学，承担教师由生物化学教研室委派。3辅导形式：课堂巡视和指导、讨论、复习等结合。四考核办法：实验成绩占总评成绩的30%；实验平时成绩占实验总成绩的70%，实验考核占实验总成绩30%。实验考核不合格者不能参加理论课考试。Ⅳ教学时数分配表实验内容教学时数实验类型实验一生物化学实验技术简介4综合型实验二