发芽实验测定-课件

发芽试验、生活力测定、活力测定及健康测定

1PPT课件第十三章发芽试验

第一节概述一、发芽试验的目的和意义发芽试验的目的是测定种子批的最大发芽潜力，据此可比较不同种子批的质量，也可估测田间播种价值。二、有关术语发芽:发芽率:正常幼苗:2PPT课件不正常幼苗幼苗的主要构造新鲜不发芽种子硬实复胚种子单位50%规则(50%rule)如果整个子叶组织或初生叶有一半或一半以上的面积具有功能，则这种幼苗可列为正常幼苗；如果一半以上的组织不具备功能，如缺失、坏死、变色或腐烂，则为不正常幼苗。当从子叶着生点到下胚轴有损伤和腐烂的迹象时，这时不能采用50%规则。当初生叶形状正常，只是叶片面积较小时，则不能应用50%规则。3PPT课件第二节发芽设备一、发芽箱和发芽室发芽箱是提供种子发芽所需的温度、湿度或水分、光照等条件的设备。发芽箱可分为两类：一类是“干”型，只控制温度不控制湿度，其中又可分为恒温和变温两种；另一类是“湿”型，既控制温度又控制湿度。我国目前常用的发芽箱多数属于“干”型，如光照变温发芽箱。它们有一个保温良好的箱体，箱的上下部分别设有加热系统和制冷系统，可根据发芽技术要求升温、降温或变温。箱体后部装有鼓风机，箱内中间配有数层发芽架，箱体的内壁装有日光灯。其特点是可调节和控制温度和光照条件，是一种功能较为完备的发芽箱。4PPT课件5PPT课件6PPT课件在选用发芽箱时，应考虑以下因素：①控温可靠、准确、稳定，箱内上、下各部位温度均匀一致；②致冷致热能力强，变温转换要能在1h内完成；③光照强度至少达到750～1250lx（勒克司）；④装配有风扇，通气良好；⑤操作简便等。发芽室可以认为是一种改进的大型发芽箱，其构造原理与发芽箱相似，只不过是容量扩大，在其四周置有发芽架。发芽室跟发芽箱一样，也有“干型”和“湿型”，干型发芽室放置的培养皿需加盖保湿。7PPT课件二、数种设备为使合理置床和提高工作效率，可使用数种设备。目前使用的数种设备主要有活动数种板和真空数种器等。1．活动数种板数种板由固定下板和活动上板组成。其板面大小刚好与所数种的发芽容器相适应。上板和下板均开有与欲数种子大小和形状相适应的50或25个孔。固定下板有糟，使活动上板定位。数种板适用于大粒种子，如玉米、大豆、菜豆和脱绒棉子等种子的数种和置床。8PPT课件操作时，数种板放在发芽床上，把种子散在板上，并将板稍微倾斜，以除去多余的种子。然后进行核对，当所有孔装满了种子并每孔只有一粒种子时，移动上板，使上板孔与下板班孔对齐，种子就落在发芽床的适当位置。2．真空数种器通常由数种头、气流阀门、调压阀、真空泵和连接皮管等部分组成。数种头有圆形、方形和长方形，其数种头面积大小刚好与所用的培养皿或发芽盒的形状和大小相适应。其面板设有100、或50个数种孔，孔径大小也与种子类型相适应。真空数种器主要适用于小、中粒种子，如水稻、小麦种子的数种和置床。9PPT课件操作时，在未产生真空前，将种子均匀撒在数种头上，然后接通真空泵，倒去多余种子，并进行核对，使全部孔都放满种子，并使每个孔中只有一粒种子。然后将数种头倒转放在发芽床上。应避免将数种头直接嵌入种子，防止有选择选取重量较轻的种子。必须注意的是，使用数种设备应确保置床的种子是随机选取的。10PPT课件三、发芽器皿根据GB/T3543.4－1995《农作物种子检验规程发芽试验》的要求，发芽试验种子置床培养至幼苗主要构造能清楚鉴定的阶段，以便鉴定正常幼苗和不正常幼苗，因此，要求发芽器皿（如培养皿）透明、保湿、无毒，具有一定的种子发芽和发育的空间，确保一定的氧气供应，使用前要清洗和消毒。11PPT课件12PPT课件13PPT课件第三节发芽介质与发芽床发芽床是供发芽测定的容器，由供给种子发芽水分和支撑幼苗生长的介质和盛放介质的发芽器皿构成。种子检验规程规定的发芽床主要有纸床、砂床以及土壤发芽床等种类。各种发芽床都应具备保水、通气性好，无毒质，无病菌和具一定强度的基本要求。14PPT课件一、发芽介质及其要求1．纸采用纸作为发芽介质是种子发芽试验中应用最多的一类发芽床。供作发芽床用的纸有专用发芽纸、滤纸等。一般来说，发芽纸应满足以下要求：①持水力强。吸水良好的纸，不但吸水要快（可将纸条下端浸入水中，2min内水上升30㎜或以上的纸为好），而且持水力也要强，使发芽试验期间具有足够的保水能力，以保证对种子发芽不断供应水分。②无毒质。纸张必须无酸碱、染料、油墨及其他对发芽有害的化学物质。纸张的pH值应在6.0～7.5范围内。③无病菌。因为纸上带有真菌或细菌会导致病菌滋长而影响种子发芽，所以所用纸张必须清洁干净，无病菌污染。15PPT课件④纸质韧性好。纸张应具有多孔性和通气性，并具有一定强度，以免吸水时糊化和破碎，并在操作时不致撕破和发芽时种子幼根不致穿入纸内，便于幼苗的正确鉴定。2．砂采用砂作为发芽介质是种子发芽试验中较为常用的一类发芽床。一般加水量为其饱和含水量的60%～80%水分。通常也可采用简便方法调配，即100g干砂中加入18～26mL的水，充分拌匀后，达到手捏成团，放手即散开，不能出现手指一压就出现水层。16PPT课件应注意，须将所用砂子加水拌匀后再分放入培养盒，不能将干砂先倒入培养盒，然后加水拌匀。这种拌砂法往往会造成砂中水分多、孔隙少，氧气不够，影响正常发芽。3．土壤供作发芽试验用的土壤其土质必须疏松良好、不结块（如土质粘重应加入适量的砂），无大颗粒。土壤中应基本上不含混入的种子、细菌、真菌、线虫或有毒物质。使用前，必须经过高温消毒，一般不重复使用。湿润发芽床的水质应纯净，不含有机杂质和无机杂质，无毒无害，pH值在6.0～7.0范围内。17PPT课件二、发芽床的种类和用法1．纸床（1）纸上（简称TP）纸上是指种子放在一层或多层纸上发芽，可采用下列三种方法：①在培养皿里垫上两层发芽纸，充分吸湿，沥去多余水分，种子直接置放在湿润的发芽纸上，用培养皿盖盖好或用塑料袋罩好，放在发芽箱或发芽室内进行发芽试验；②数种置床于湿润的发芽纸上，并将其直接放在“湿型”发芽箱的盘上，发芽箱内的相对湿度尽可能接近饱和；18PPT课件③放在雅可勃逊发芽器上，这种发芽器配有放置发芽纸的发芽盘。（2）纸间（简称BP）纸间是指种子放在两层纸中间发芽，可采用下列两种方法：①在培养皿里把种子均匀置放在湿润的发芽纸上，另外用一层发芽纸松松地盖在种子上；②采用纸卷，把种子均匀置放在湿润的发芽纸上，再用一张同样大小的发芽纸覆盖在种子上，底部褶起2厘米，然后卷成纸卷，两端用橡皮筋扎住，竖放在培养皿或塑料筒里，套上透明塑料袋保湿，放在规定条件下发芽。有些种子可用短纸卷，直接放在塑料袋内包好放在发芽箱内发芽。19PPT课件（3）褶裥纸（简称PP）把种子放在类似手风琴的具有50个褶裥的纸条内，通常每个褶裥放两粒种子，或者具有10个褶裥，每褶裥放5粒种子。将褶裥纸条放在盒内或直接放在“湿型”发芽箱内，并可用一张纸条盖在褶裥纸上面。规程规定使用TP或BP进行发芽的，可用这种方法代替。20PPT课件2．砂床砂床使用方法有两种：①砂上（简称TS），适用于小、中粒种子。将拌好的湿砂装入培养盒中至2～3cm厚，再将种子压入砂表层，即砂上发芽；②砂中（简称S），适用于中、大粒种子。将拌好的湿砂装入培养盒中至2～4cm厚，播上种子，覆盖1～2cm厚度（厚度取决于种子的大小）的松散湿砂，以防翘根。当由于纸床污染，对已有病菌的种子样品鉴定困难时，可用砂床替代纸床。有时为了研究目的和证实有疑问的幼苗鉴定，也可采用砂床。21PPT课件3．土壤床除了规程规定使用土壤床外，当纸床或砂床上的幼苗出现中毒症状时或对幼苗鉴定发生怀疑时，或为了比较或研究目的，可采用土壤床。选用符合要求的土壤，经高温消毒后，加水调配适宜水分，然后再播种，并覆上疏松土层。22PPT课件第四节发芽条件及其控制种子发芽需要有水分、温度、氧气和光照等条件。不同作物种由于起源和进化的生态环境不同，其发芽所要求的条件也有所差异。23PPT课件一、水分不同作物种的种子对水分的需求有差异。有些种子，如烟草、西瓜、大豆、大麦、棉花、菠菜等种子对水分较敏感，水分一多，则发芽差，甚至不发芽。而水稻、玉米等种子对水分不太敏感。根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量。如纸床，吸足水分后，沥去多余水即可；砂床加水为其饱和含水量的60%～80%(禾谷类等中小粒种子为60%，豆类等大粒种子为80%)；用土壤作发芽床，加水至手握土粘成团，手指轻轻一压就碎为宜。发芽期间发芽床必须始终保持湿润，并注意保持试验各重复间的水分和湿度的一致性。24PPT课件二、温度农作物种子发芽应按表13-1规定的温度进行。发芽箱的温度在发芽期间应尽可能一致，温度变幅不应超过±2℃。变温是模拟种子发芽的自然环境，一般来说，变温有利于种子渗入氧气，促进酶活化，加速发芽。新收获的休眠种子对发芽温度要求特别严格，必须选用表13-1中几种恒温中的较低温度或变温。如洋葱种子发芽温度有20℃、15℃，则应选用15℃发芽，又如西瓜种子，规定温度有20～30℃、30℃、25℃，则应选用20～30℃或25℃恒温。陈种子，也以选用其中的变温或较低恒温发芽为好。25PPT课件当规定用变温时，通常应保持低温16h及高温8h。对非休眠种子，可以在3h内完成变温。如果是休眠种子，应在1h或更短时间内完成急剧变温或将试验移至另一个设定低温的发芽箱内。三、氧气作物种的种子对氧气的需要量和敏感性是有差异的。一般来说，旱生的大粒种子，如大豆、玉米、棉花、花生等种子对氧气的需求较多；而水生的小、中粒种子则对氧气的需求较少。幼苗的不同构造对氧气的需要量和敏感性也是有差异的。种子发芽时，胚根伸长对氧气需求比胚芽伸长更为敏感。如果发芽床上水分多、氧气少，则长芽；反之，水少氧多则宜于长根。26PPT课件发芽期间应使种子周围有足够的空气，尤其是用纸卷发芽应注意纸卷需疏松，用砂床和土壤试验时，覆盖种子的砂或土壤不要压紧。应注意水分和通气的协调，防止水分过多在种子周围形成水膜，阻隔氧气进入种胚而影响发芽；防止水分过多或过少，导致幼苗的不均衡生长。四、光照①需光型种子。发芽时必须有红光或白炽光，促使光敏色素转变为活化型，如茼蒿等。特别是这类新收获的休眠种子发芽时，必须给予光照；②需暗型种子。这类种子必须在黑暗条件下，其光敏色素才能达到萌发水平，如黑种草种子；27PPT课件③光不敏感型种子。在光照或黑暗条件下均能良好发芽，这类种子包括大多数大田作物和蔬菜种子。表13-1中大多数种的种子可在光照或黑暗条件下发芽，但最好采用光照。即便是需暗型种子，也只是发芽初期必须黑暗，随着茎叶系统的形成，为其进一步生长发育提供能量和养分的光合作用也需要光。光照条件下培养发芽，利于抑制发芽过程中霉菌生长繁殖，并有利于正常幼苗的鉴定，区分黄化和白化不正常幼苗。需光照的光照强度为750～1250lx，如在变温条件下发芽，光照应在8h高温时进行。28PPT课件第五节发芽试验程序一、选用发芽床按表13-1规定，选用其中最适宜的发芽床。每一作物种通常列出2～3种发芽床，如水稻，表13-1中规定TP、BP和S三种发芽床。一般来说，小、中粒种子可用纸上（TP）发芽床，中粒种子可用纸间（纸卷，）(BP)发芽床；大粒种子或对水分敏感的小、中粒种子宜用砂床(S)发芽。活力较差的种子，也以用砂床的效果为好。在选好发芽床后，按不同作物种的种子和发芽床的特性，调节其适当的湿度。29PPT课件二、数种置床1．试样来源和数量除委托检验外，试验样品来源必须是净种子，从充分混合的净种子中随机数取，一般数量是400粒。净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取，也可以从送验样品中直接随机数取。一般小、中粒种子（如油菜、结球白菜、小麦、水稻等）以100粒为一重复，试验为4次重复；大粒种子（如玉米、大豆、棉花等）以50粒为一副重复，试验为8个副重复；特大粒的种子（如花生和蚕豆等）可以25粒为一副重复，试验为16个副重复。复胚种子单位可视为单粒种子进行试验，不需弄破（分开），但芫荽例外。30PPT课件2．置床的要求种子要均匀分布在发芽床上，种子之间留有1～5倍间距，以防发霉种子的相互感染和保持足够的生长空间。每粒种子应良好接触水分，使发芽条件一致。3．贴（放）标签在培养皿或其它发芽容器底盘的内侧放上或侧面贴上标签，注明样品编号、品种名称、重复序号和置床日期等，然后盖好容器盖子或套一薄膜塑料袋。31PPT课件三、在规定条件下培养按表13-1规定的发芽条件，选择适宜的温度，虽然各种温度均为有效，但一般来说，新收获的有休眠种子和陈种子，以选用其中的变温或较低恒温发芽为好。关于光照条件，对需光型种子如茼蒿种子发芽时必须光照促进发芽。除需暗型种子在发芽初期应放置黑暗条件下培养，由于光照利于抑制发芽过程中霉菌生长繁殖和幼苗子叶、初生叶的光合作用，其他种子发芽时，只要条件允许，最好在光照下培养。32PPT课件四、检查管理种子发芽期间，应进行适当的检查管理，以保持适宜的发芽条件。发芽床应始终保持湿润，水分不能过多或过少。温度应保持在所需温度的±2℃范围内，防止因控温部件失灵、断电、电器损坏等意外事故造成温度失控。如采用变温发芽，则应按规定变换温度。如发现霉菌滋生，应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时，应更换发芽床，以免霉菌传开。如发现腐烂死亡种子，则应及时将其除去并记载。还应注意通气，避免因缺氧而使正常发芽受影响。33PPT课件五、观察记载1．试验持续时间每个种的试验持续时间详见表13-1。试验前或试验间用于破除休眠处理所需时间不作为发芽试验时间的一部分。如果样品在规定的试验时间内只有几粒种子开始发芽，则试验时间可延长7d，或延长规定时间的一半。根据试验情况，可增加计数的次数。反之，如果在规定的试验时间结束前，样品已达到最高发芽率，则该试验可提前结束。34PPT课件2．鉴定幼苗和观察计数每株幼苗都必须按规定的标准进行鉴定。鉴定要在主要构造已发育到一定时期时进行。根据种的不同，试验中绝大部分幼苗应达到：子叶从种皮中伸出(如莴苣属)、初生叶展开(如菜豆属)、叶片从胚芽鞘中伸出(如小麦属)。尽管一些种如胡萝卜属在试验末期，并非所有幼苗的子叶都从种皮中伸出，但至少在末次计数时，可以清楚地看到子叶基部的“颈”。在初次计数时，应把发育良好的正常幼苗从发芽床中拣出，对可疑的或损伤、畸形或不均衡的幼苗，通常到末次计数。严重腐烂的幼苗或发霉的死种子应及时从发芽床中除去，并随时增加计数。35PPT课件末次计数时，按正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子分类计数和记载。复胚种子单位作为单粒种子计数，试验结果用至少产生一个正常幼苗的种子单位的百分率表示。当送验者提出要求时，也可测定100个种子单位所产生的正常幼苗数，或产生一株、两株及两株以上正常幼苗的种子单位数。36PPT课件六、结果计算和表示试验结果以粒数的百分率表示，计算时，以100粒种子为一重复，如采用50粒或25粒的副重复，则应将相邻副重复合并成100粒的重复。当一个试验的4次重复，其正常幼苗百分率都在最大容许差距范围内(表13-2)，则取其平均数表示发芽百分率。不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子的百分率按4次重复平均数计算。结果修约有特殊规定，不执行修约规则：37PPT课件在发芽试验中，正常幼苗百分率修约至最接近的整数，0.5则进位（与修约规则不一样）。计算其余成分百分率的整数，并获得其总和。如果总和为100，修约程序到此结束。如果总和不是100，继续执行下列程序：在不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子中，首先找出其百分率中小数部分最大值者，修约此数至最大整数，并作为最终结果；其次计算其余成分百分率的整数，获得其总和，如果总和为100，修约程序到此结束，如果不是100，重复此程序；如果小数部分相同，优先次序为不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子。38PPT课件表13-2同一发芽试验四次重复间的最大容许差距(2.5%显著水平的两尾测定)39PPT课件七、破除休眠和重新试验1．破除休眠当试验结束还存在硬实或新鲜不发芽种子时，可进行处理后(详见表13-1)重新试验，如预知或怀疑种子有休眠，这些处理方法也可用于初次试验。40PPT课件2．重新试验当试验出现下列情况时，应重新试验。（1）怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子)时，可采用上述休眠种子处理方法重新试验，将得到的最佳结果填报，同时注明所用的方法。（2）由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤发芽床重新试验。如有必要，应增加种子之间的距离。（3）当正确鉴定幼苗困难时，可采用表13-1中规定的一种或几种方法用砂床或土壤发芽床重新试验。41PPT课件（4）当发现实验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法重新试验。（5）当100粒种子重复间的差距超过表13-2最大容许差距时，应采用同样的方法重新试验。如果第二次结果与第一次结果相一致，即其差异不超过表13-4中所示的容许差距，则将两次试验结果的平均数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合，即其差异超过表13-4所示的容许差距，则采用同样的方法进行第三次试验。用第三次结果分别与第一次结果和第二次结果进行比较，填报符合要求的结果平均数。若第三次试验仍得不到符合要求的结果，则应考虑是否人员操作（如是否使用数种设备不当，造成试样误差太大等）、发芽设备或其他方面存在重大问题，无法得到满意结果。42PPT课件表13-4同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间发芽试验的容许差距(2.5%显著水平的两尾测定)43PPT课件八、发芽试验容许误差容许误差应符合GB/T3543.1和GB/T3543.4的规定，为了便于理解和掌握，举例说明如下。[例1]

某一水稻杂交种发芽试验4次重复的发芽率分别为97%、96%、98%、95%，其发芽试验条件为纸上，30℃恒温。4次重复的结果平均值为：（97+96+98+95）/4＝96.5，根据修约至最近似整数的原则，发芽率修约（0.5进为1计算）为97%。用97查表13-2（或GB/T3543.4—1995中表3），查得重复间最大容许差距为7，而重复间的最大值98与最小值95之差为3，在容许差距范围内，所以本试验结果是可靠的，发芽率的填报结果为97%。44PPT课件[例2]

现测得一发芽试验4次重复的发芽率分别为：76％、65％、68％和57％，其发芽试验条件为纸上，20～30℃变温，并经硝酸钾处理。4次重复的结果平均值为：(76十65十68十57)／4＝66.5，根据进入最大值保留整数的修约原则，用67查表13-2（或GB/T3543.4—1995中表3），查得容许误差为18，而重复间的最大差异为：76—57＝19，超过了容许误差18，所以必须进行重新试验。第二次的发芽试验4次重复的发芽率分别为：70％、70％、68％和72％。4次重复的结果平均值为：(70十70十68十72)／4＝70，用70查表13-2（GB/T3543.4—1995中表3），容许误差为18，而重复间的最大差异为：72—68＝4，未超过容许误差18。45PPT课件现在再比较两次试验的一致性：(66.5十70)／2＝68.25，用68查表13-4（或GB/T3543.4一1995中表4），其容许误差为7，而两次试验间的差距为70—66.5＝3.5，未超过容许误差。因此，发芽率的最后填报结果为68％。[例3]发芽试验的第一次结果为87％、72％、68％和85％，按上述例1计算超过容许误差；第二次发芽试验为91％、84％、80％和93％，按上述例2计算仍超过容许误差；第三次为93％、87％、89％和96％，这样最后填报符合要求的第二、第三次发芽试验结果为89％。46PPT课件[例4]有一批种子，种子销售者测定发芽率为87％，而种子消费者测定为80％，请问种子销售者的测定值可以接受吗?先计算两者平均值为84％，查GB/T3543.4—1995中表5，得容许误差为7，而两者试验差距为7，所以销售者的测定值可以接受。[例5]在例4中，如果第一次测定为80％，而第二次测定为88％，由于第二次测定好于第一次测定，就不必计算，得出第一次测定值可以接受。47PPT课件结果修约例[6]发芽试验的结果为：正常幼苗90.5%，不正常幼苗2.5%，硬实2.75%，新鲜不发芽2.5%，死种子1.25%，根据发芽试验修约规定，本次试验的结果各为多少为多少？例[7]发芽试验发芽试验的结果为：正常幼苗90.25%，不正常幼苗3.5%，硬实2.75%，新鲜不发芽3.75%，死种子0.75%，根据发芽试验修约规定，本次试验的发芽率为多少？48PPT课件例6第1步结果：91、2、2、2、1（=98%）第2步结果：91、2、3、2、1（=99%）第3步结果：91、3、3、2、1（=100）例7第1步结果：90、3、2、3、0（=98%）第2步结果：90、3、3、3、0（=99%）第3步结果：90、3、3、4、0（=100%）49PPT课件九、结果报告填报发芽结果时，须填报正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子的百分率。假如其中任何一项结果为零，则将符号“－0－”填入该格中。填报正常幼苗等百分率时，同时还须填报采用的发芽床种类和温度、发芽试验持续时间以及为促进发芽所采用的处理方法。50PPT课件发芽试验结果填报：①发芽试验以最近似的整数填报，并按正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子、不正常幼苗和死种子分类填报。②正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子、不正常幼苗和死种子以百分率表示，总和为100％。如果某一栏为零，该栏必须填报为“—0—”。③如果发芽试验时间超过规定的时间，在规定栏中填报末次计数的发芽率。超过规定时间以后的正常幼苗数应填报在附加说明中，并采用下列格式：“到规定时间X天后，有Y％为正常幼苗。”④表格中的附加说明一般包括：发芽床、温度、试验持续时间、发芽试验前处理和方法。发芽试验采用的方法用规程中的缩写符号注明，如采用纸间在20℃下进行试验，就用BP，20℃表示。51PPT课件第六节幼苗鉴定一、幼苗鉴定基础知识1．幼苗的发育过程胚中着生一片子叶的称为单子叶植物，胚中着生两片子叶的称为双子叶植物。林木种子的针叶树种类（如松科等）胚中着生多个子叶称为多子叶植物。52PPT课件53PPT课件2．幼苗的出土类型（1）子叶出土型（epigealgermination）由于下胚轴伸长而使子叶和幼梢伸出地面的一种发芽习性,例如单子叶植物的洋葱（图13-2A），双子叶植物的菜豆（图13-3A）、油菜（图13-3B）、瓜类和棉花等。这类种子发芽时，随着胚根突出种皮，下胚轴背地性迅速伸长，将子叶和胚芽一起带出地面，此时子叶变绿展开并形成幼苗的第一个光合作用器官，接着上胚轴和顶芽发育生长。54PPT课件（2）子叶留土型（hypogealgermination）子叶或变态子叶(盾片)留在土壤中的种皮内的一种发芽习性，例如单子叶植物的水稻、小麦（图13-2B）、玉米（图13-2C）等，双子叶植物的蚕豆、豌豆（图13-3C）等。这类种子发芽时，仅子叶以上的上胚轴或禾本科的胚芽鞘和中胚轴伸长，它们连同胚芽向上伸出地面，形成植株的茎叶系统，子叶或盾片留在土壤中的种皮内。与子叶出土型发芽相比，首先进行光合作用的器官是初生叶或从胚芽中长出的第一片真叶。55PPT课件3．幼苗的主要构造幼苗的主要构造因作物种类而有明显差异，但通常由下列的一些构造的特定组合所组成：①根系，主要是初生根和次生根，在禾本科某些属中为种子根。②幼苗中轴，包括下胚轴、上胚轴、顶芽，在禾本科某些属中表现为中胚轴。③子叶，具有特定数目，1至数个。④芽鞘，禾本科中所有属。56PPT课件（1）单子叶植物幼苗的主要构造单子叶植物子叶出土型幼苗的主要构造包括初生根、不定根和管状子叶等，例如葱属（图13-2A）。单子叶植物子叶留土型幼苗的主要构造包括种子根∕初生根、次生根、不定根、中胚轴、胚芽鞘、初生叶等，例如小麦属（图13-2B）、玉米属（图13-2C）、稻属等。（2）双子叶植物幼苗的主要构造双子叶植物子叶出土型幼苗的主要构造包括初生根、次生根、下胚轴或上胚轴、子叶、初生叶和顶芽等部分，例如菜豆属（图13-3A）、芸苔属（图13-3B）等。双子叶植物子叶留土型幼苗的主要构造包括初生根、次生根、子叶、上胚轴、鳞片、初生叶和顶芽等，例如碗豆属（图13-3C）等。57PPT课件A．葱属幼苗（子叶出土型）B．小麦幼苗（子叶留土型）C．玉米幼苗（子叶留土型）（引自ISTAHandbookforseedlingevaluation,1979）图13-2单子叶植物幼苗的主要构造次生根初生叶胚芽鞘不定根中胚轴初生根不定根AB初生叶胚芽鞘种子根子叶不定根实生根C58PPT课件B芸苔属幼苗（子叶出土型）ABC初生叶叶柄子叶顶芽上胚轴下胚轴次生根初生根图13-3双子叶植物幼苗的主要构造A．菜豆幼苗（子叶出土型）C．豌豆幼苗（子叶留土型）（引自ISTAHandbookforseedlingevaluation,1979）子叶叶柄下胚轴初生根顶芽次生根初生叶上胚轴鳞叶子叶次生根初生根59PPT课件二、幼苗鉴定总则(一)正常幼苗的鉴定标准正常幼苗分为：完整幼苗带有轻微缺陷的幼苗次生感染的幼苗60PPT课件凡符合下列类型之一者为正常幼苗。1.完整幼苗幼苗主要构造生长良好、完全、匀称和健康。因种不同，应具有下列一些构造。①发育良好的根系，其组成如下：a．细长的初生根，通常长满根毛，末端细尖；b．在规定试验时期内产生的次生根；c．在燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中，由数条种子根代替一条初生根。61PPT课件②发育良好的幼苗中轴，其组成如下：a．出土型发芽的幼苗，应具有一个直立、细长并有伸长能力的下胚轴；b．留土型发芽的幼苗，应具有一个发育良好的上胚轴；c．在出土型发芽的一些属(如菜豆属、花生属)中，应同时具有伸长的上胚轴和下胚轴；d．在禾本科的一些属(如玉米属、高粱属)中，应具有伸长的中胚轴。62PPT课件③具有特定数目的子叶：a．单子叶植物具有一片子叶，子叶可为绿色圆管状(葱属)，或变形而全部或部分遗留在种子内(如石刁柏、禾本科)；b．双子叶植物具有二片子叶，在出土型发芽的幼苗中，子叶为绿色，展开呈叶状；在留土型发芽的幼苗中，子叶为半球形和肉质状，并保留在种皮内。63PPT课件④具有展开、绿色的初生叶：a．在互生叶幼苗中有一片初生叶，有时先发生少数鳞状叶，如豌豆属、石刁柏属、巢菜属；b．在对生叶幼苗中有两片初生叶，如菜豆属。⑤具有一个顶芽或苗端。⑥在禾本科植物中有一个发育良好、直立的芽鞘，其中包着一片绿叶延伸到顶端，最后从芽鞘中伸出。64PPT课件2.带有轻微缺陷的幼苗幼苗主要构造出现某种轻微缺陷，但在其他方面能均衡生长，并与同一试验中的完整幼苗相当。有下列缺陷则为带有轻微缺陷的幼苗。①初生根：a．初生根局部损伤，或生长稍迟缓；b．初生根有缺陷，但次生根发育良好，特别是豆科中一些大粒种子的属(如菜豆属、豌豆属、巢菜属、花生属、豇豆属和扁豆属)、禾本科中的一些属(如玉米属、高粱属和稻属)、葫芦科所有属(如甜瓜属、南瓜属和西瓜属)和锦葵科所有属(如棉属)；c．燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中有一条强壮的种子根。65PPT课件②下胚轴、上胚轴或中胚轴局部损伤。③子叶(采用“50%规则”)：a．子叶局部损伤，但子叶组织总面积的一半或一半以上仍保持着正常的功能，并且幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂；b．双子叶植物仅有一片正常子叶，但其幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂。66PPT课件④初生叶：a．初生叶局部损伤，但其组织总面积的一半或一半以上仍保持着正常的功能(采用“50%规则”)；b．顶芽没有明显的损伤或腐烂，有一片正常的初生叶，如菜豆属；c．菜豆属的初生叶形状正常，大于正常大小的四分之一；d．具有三片初生叶而不是两片，如菜豆属(采用“50%规则”)。⑤芽鞘：a．芽鞘局部损伤；b．芽鞘从顶端开裂，但其裂缝长度不超过芽鞘的三分之一；c．受内外稃或果皮的阻挡，芽鞘轻度扭曲或形成环状；d．芽鞘内的绿叶，没有延伸到芽鞘顶端，但至少要达到芽鞘的一半。67PPT课件3.次生感染的幼苗由真菌或细菌感染引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，但有证据表明病源不来自种子本身。68PPT课件（二）不正常幼苗的鉴定标准不正常幼苗分为受损伤的幼苗、畸形或不匀称的幼苗和由初生感染的腐烂幼苗三类：1.受损伤的幼苗由机械处理、加热、干燥、冻害、化学处理、昆虫损害等外部因素引起，使幼苗构造残缺不全或受到严重损伤，以致不能均衡生长者。这类所产生的不正常幼苗类型主要有：子叶或幼苗中轴开裂并与其他幼苗构造分离；下胚轴、上胚轴或子叶横裂或纵裂；胚芽鞘损伤或顶部破裂；初生根开裂、残缺或缺失。69PPT课件2.畸形或不匀称的幼苗由于内部因素引起生理紊乱，幼苗生长细弱，或存在生理障碍，或主要构造畸形或不匀称者。这类所产生的不正常幼苗类型主要有：初生根停滞或细长；根负向地性生长；下胚轴、上胚轴或中胚轴粗短、环状、扭曲或螺旋形；子叶卷曲、变色或坏死；胚芽鞘短而畸形、开裂、环状、扭曲或螺旋形；缺失叶绿素（幼苗黄化或白化）；幼苗纤细；幼苗透明水肿状（玻璃体）。70PPT课件3.腐烂幼苗由初生感染(病源来自种子本身)引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，并妨碍其正常生长者。在实际应用过程中，由于不正常幼苗只占少数，而且只要能鉴别不正常幼苗就行。凡幼苗带有下列其中一种或一种以上的缺陷则列为不正常幼苗。71PPT课件（1）根①初生根初生根残缺；短粗；停滞；缺失；破裂；从顶端开裂；缩缢；纤细；卷缩在种皮内；负向地性生长；水肿状；由初生感染所引起的腐烂。②种子根种子根没有或仅有一条生长力弱的种子根。（2）下胚轴、上胚轴或中胚轴下胚轴、上胚轴或中胚轴缩短而变粗；深度横裂或破裂；纵向裂缝(开裂)；缺失；缩缢；严重扭曲；过度弯曲；形成环状或螺旋形；纤细；水肿状（玻璃体）；由初生感染所引起的腐烂。72PPT课件（3）子叶(采用“50%规则”)①除葱属外所有属的子叶缺陷子叶肿胀卷曲；畸形；断裂或其他损伤；分离或缺失；变色；坏死；水肿状；由初生感染所引起的腐烂。②葱属子叶的特定缺陷葱属子叶缩短而变粗；缩缢；过度弯曲；形成环状或螺旋形；无明显的“膝”；纤细。（4）初生叶(采用“50%规则”)初生叶畸形；损伤；缺失；变色；坏死；由初生感染所引起的腐烂；虽形状正常，但小于正常叶片大小的四分之一。73PPT课件（5）顶芽及周围组织顶芽及周围组织畸形；损伤；缺失；由初生感染所引起的腐烂。（6）胚芽鞘和第一片叶(禾本科)①胚芽鞘胚芽鞘畸形；损伤；缺失；顶端损伤或缺失；严重过度弯曲；形成环状或螺旋形；严重扭曲；裂缝长度超过从顶端量起的三分之一；基部开裂；纤细；由初生感染所引起的腐烂。②第一叶第一叶延伸长度不到胚芽鞘的一半；缺失；撕裂或其他畸形。（7）整个幼苗畸形；断裂；子叶比根先长出；两株幼苗连在一起；黄化或白化；纤细；水肿状；由初生感染所引起的腐烂。为便于全面理解其含义，图13-4至图13-10示意各种缺陷的不正常幼苗。74PPT课件1．残缺2.短粗3.停滞4.缺失缺失5.破裂6.从顶端开裂7．缩缢8．纤细9．卷缩在种皮内10．负向地生长11．水肿状12．由初生感染所引起的腐烂13．仅有一条生长弱或没有种子根图13-4初生根和种子根不正常幼苗类型75PPT课件1．缩短而变粗2．深度横裂或破裂3．纵向裂缝（开裂）4．缺失图13-5下胚轴、上胚轴或中胚轴不正常幼苗类型76PPT课件续图13-58．形成环状或螺旋状9．纤细10．水肿状11．由初生根感染所引起的腐烂

5．缩溢6．严重扭曲7．过度弯曲77PPT课件1．肿胀卷曲2．畸形4．分离或缺失3．断裂或其他损伤5．变色6．坏死7．水肿状8．由初生根感染所引起的腐烂图13-6（a）除葱属外的所有属的子叶缺陷不正常幼苗类型（采用50%规则）78PPT课件图13-6（b）葱属子叶的特有缺陷不正常幼苗类型（采用50%规则）9．缩短而变粗10．缩溢11．过度弯曲12．形成环状或螺旋状13．无明显“膝”14．纤细79PPT课件图13-7初生叶不正常幼苗类型（采用50%规则）1．畸形2．损伤3．缺失4．变色5。坏死6．由初生感染所引起的腐烂7．虽形状正常，但小于正常叶片大小的四分之一1．畸形2．损伤3．缺失4．由初生感染所引起的腐烂图13-8顶芽及周围组织不正常幼苗类型（采用50%规）则则）80PPT课件1．畸形2．损伤3．缺失4．顶端损伤或缺失5．严重过度弯曲图13-9胚芽鞘、顶芽及周围组织不正常幼苗类型（采用50%规则）81PPT课件6．形成环状或螺旋形7．严重扭曲8．裂缝长度超过从顶端量起的三分之一9．基部开裂10．纤细12．延伸长度不及胚芽鞘的一半11．由初生感染所引起的腐烂13．缺失14．撕裂或其他畸形续图13-982PPT课件1．畸形2．断裂5．黄化或白化6．纤细3．子叶比根先长出4．两株幼苗连在一起7．水肿状图13-10整株幼苗畸形类型8．由初生感染所引起的腐烂83PPT课件（三）幼苗鉴定指南ISTA于2003年发布第三版《幼苗鉴定手册》，其中较有参考价值之一是明确了幼苗鉴定指南，作为判定正常幼苗与不正常幼苗标准的补充。84PPT课件三、幼苗鉴定按属分类细则（一）幼苗鉴定按属分类由于各个种的不同属幼苗形态特征结构的差异和不同构造对鉴定正常幼苗的重要性，为了便于正常幼苗鉴定，ISTA幼苗鉴定手册将具有相似幼苗形态特征和发育特性的属归为一类。85PPT课件其具体归类依据如下：1、按植物种类分为A、B两类：A、农业及园艺(如洋葱、水稻、小麦、玉米、油菜、菜豆、豌豆等)。B、乔木及灌木(如松树和冬青等)2、按子叶系统分类分为三类：1、单子叶植物(如洋葱、小麦、玉米等)2、双子叶植物(如油菜、菜豆、豌豆、西瓜、棉花等)。3、针叶植物(如松树等)86PPT课件3、按发芽习性分类分为两类：(1)子叶出土型发芽植物；(如洋葱、大豆、菜豆、甘蓝等)(2)子叶留土型发芽植物；(如小麦、玉米、水稻、豌豆等)4、按茎轴伸长和幼梢生长特性分类分为四类：(1)上胚轴不伸长种类(如油菜、西瓜)(2)上胚轴伸长种类(如豌豆、大豆、菜豆等)(3)幼梢不伸长，苗端被芽鞘包裹着种类(如水稻、小麦、玉米等)(4)块茎状下胚轴种类(如仙客来等)87PPT课件5、按根系发育特性及其在幼苗鉴定的重要性分类分为三类：(1)必需具备初生根的种类(如甘蓝、洋葱等)(2)可考虑发育良好次生根的种类(如水稻、玉米、棉花等)(3)具有相同种子根的种类(如小麦等)88PPT课件根据上述分类依据，就可按种、属编制正常幼苗的按属分组编码索引（见表13-5）。而根据各属分组幼苗鉴定索引就可把握该属幼苗鉴定的关键要素，从而更好地正确鉴定幼苗。例如小麦，属小麦属，幼苗鉴定的分类编码为A.1.2.3.3（A-农业及园艺；1-单子叶植物；2-子叶留土型发芽植物；3-胚轴不伸长，苗端被芽鞘包裹着种类；3-具有相同种子根的种类），含义为农作物的单子叶植物，子叶留土发芽，幼苗胚轴不伸长，苗端被胚芽鞘包裹着。在幼苗鉴定时，考虑具有相同的种子根。若种子根有损伤，但至少有一条健壮的种子根，则为正常幼苗。89PPT课件表13-5农作物种幼苗鉴定按属分组编码索引（略）90PPT课件（二）农作物幼苗发育类型根据幼苗鉴定按属分组编码方法，任何种、属都可以划分到这种属的幼苗形态特征和发育特性的组中。下面分别介绍GB/T3543.4－1995《农作物种子检验规程发芽试验》所包括的农作物幼苗发育类型。1．单子叶植物GB/T3543.4－1995《农作物种子检验规程发芽试验》包括的单子叶植物分属幼苗鉴定归属于五个组，其鉴定细则列表13-6。91PPT课件表13-6单子叶植物分属幼苗鉴定细则注：不正常幼苗评定标准指凡幼苗带有其中一种或一种以上的缺陷则列为不正常幼苗。92PPT课件例如：稻属(如水稻)、玉米属(如玉米)均属于A1．2．3．2组，为子叶留土型发芽的单子叶植物。幼苗胚轴不伸长，苗端被胚芽鞘包裹着，第一片营养叶生长。变态的子叶部分即盾片留在种子内与胚乳相连。根系统由初生根和次生根组成，在幼苗鉴定时，如初生根有缺陷，可考虑次生根的生长状况。93PPT课件2．双子叶植物GB/T3543.4－1995《农作物种子检验规程发芽试验》包括的双子叶植物分属幼苗鉴定归属于四个组，其鉴定细则列表13-7。94PPT课件表13-7双子叶植物分属幼苗鉴定细则注：不正常幼苗评定标准指凡幼苗带有其中一种或一种以上的缺陷则列为不正常幼苗。95PPT课件例如：棉属（如棉花）、甜瓜属（如西瓜）均属于A2．1．1．2组，为子叶出土型发芽的双子叶植物。幼苗中轴由一条伸长的下胚轴和两片子叶组成，在试验期间上胚轴不伸长，子叶间的顶芽不明显。根系由具有根毛的初生根和次生根组成，在幼苗鉴定时，如初生根有缺陷，可考虑次生根的生长状况。96PPT课件97PPT课件98PPT课件99PPT课件100PPT课件101PPT课件102PPT课件103PPT课件104PPT课件105PPT课件106PPT课件第七节包衣种子发芽试验包衣种子的发芽试验可用不脱去包衣材料的净丸化(净包膜)种子和脱去包衣材料的净种子两种方法进行试验。如同净度分析一样，后者只在特殊情况下：应送验者要求或为了核实(或比较)丸化或包膜种子内的净种子发芽能力时才使用。后者与非包衣种子检验程序完全相同，在除去包衣材料时不应影响发芽率。107PPT课件不脱去包衣材料的发芽试验程序如下。一、数取试样除委托检验外，包衣种子发芽试验的试样是从经净度分析后的净丸化(净包膜)种子中分取，先将其充分混合，随机数取400粒，分4个重复，每个重复100粒。种子带的发芽试验须在带上进行，不必从制带物质中取下种子。试验样品由随机取得的带片组成，重复4次，每重复至少含100粒种子。108PPT课件二、置床培养发芽床、发芽温度、光照条件和特殊处理采用GB／T3543．4规定。倘若发芽结果不能令人满意时，发芽床最好采用砂床，有时也可用土壤。或者丸化种子采用皱裥纸作发芽床，种子带必须采用纸间的发芽方法。供水情况依据包衣材料和种子种类而不同。如果包衣材料粘附在子叶上，可在计数时用水小心喷洗幼苗。109PPT课件三、幼苗计数与鉴定试验时间可能比GB/T3543.4所规定时间要长，因此延长试验时间是必要的。但发芽缓慢可能表明试验条件不适宜时，这时需要做一个脱去包衣材料的种子发芽试验作为对照。幼苗异常情况可能由于丸化或包膜材料所引起，当发生怀疑时用土壤进行重新试验。正常幼苗与不正常幼苗的鉴定标准仍按GB/T3543.4规定进行。一颗丸粒或包膜粒，如果至少能产生送验者所叙述种的一株正常幼苗，即认为具有发芽能力，如果不是送验者所叙述的种，即使长成正常幼苗，也不能包括在发芽率内。110PPT课件复粒种子构造可能在丸化种子中发生，或者在一颗丸粒中发现一粒以上种子。在此种情况下，应把这些颗粒作为单粒种子试验。用至少产生一株正常幼苗的构造或丸粒百分率表示。对产生二株或二株以上的丸粒，要分别计算其颗粒并记录。111PPT课件四、结果计算、表示与报告其结果以粒数的百分率表示。种子带发芽试验时，要测定种子带总长度(或面积)，记录正常幼苗总数，计算每米(或每平方米)的正常幼苗数，推算每米的正常幼苗数。结果报告按GB/T3543.4的规定。112PPT课件第十三章概述发芽试验的目的和意义有关术语观察记载发芽器皿破除休眠和重新试验发芽设备发芽箱和发芽室数种设备发芽介质与发芽床发芽介质及其要求发芽床的种类和用法检查管理结果计算和表示光照结果报告发芽试验容许误差发芽条件及其控制水分温度氧气发芽试验程序选用发芽床数种置床在规定条件下培养幼苗鉴定幼苗鉴定基础知识幼苗鉴定总则幼苗鉴定按属分类细则包衣种子发芽试验数取试样置床培养幼苗计数与鉴定结果计算、表示与报告发芽试验

113PPT课件第十四章生活力的四唑测定实际工作中如种子贸易时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态则难以通过发芽测定得到结果。种子生活力测定可以满足这一需要，四唑测定可以测定出休眠种子样品的生活力百分率。四唑测定方法于1942年由德国的G.Lakon教授发明，第2次世界大战期间传入美国。随着四唑测定技术的发展，ISTA(国际种子检验协会)于1950年成立四唑测定技术委员会，致力于种子四唑测定技术的发展。2003年出版《ISTA四唑测定工作手册》，列有120种农业和122种林业种、属的四唑测定方法。114PPT课件第一节概述一、生活力概念种子生活力（seedviability）是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。115PPT课件二、种子生活力测定的意义1.可以测定休眠种子的生活力2.快速预测种子发芽能力种子贸易中，常因时间紧迫，不可能采用正规的发芽试验来测定发芽力，这是因为发芽试验所需的时间更长。116PPT课件三、四唑染色测定的原理在种子组织活细胞内脱氢酶的作用下，无色的氯化三苯基四氮唑，接收活种子代谢过程中呼吸链上的氢，在活细胞里变成还原态的红色、稳定、不扩散的三苯基甲月替(TriphenylFormazam)。可根据四唑染成的颜色和部位，区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。117PPT课件2，3，5-三苯基氯化四氮唑三苯基甲月替(无色)(红色)118PPT课件种子有无生活力主要取决于胚和(或)胚乳(或配子体)坏死组织的部位和面积的大小，而不一定在于颜色的深浅。颜色的差异主要是将健全的、衰弱的和死亡的组织判别出来。根据以上理由和所用指示剂，把这种测定称为“局部解剖图形的四唑测定”(topographicaltetrazoliumtest)。这就是说，是根据种子胚和活营养组织局部解剖染色部位及颜色状况，鉴定种子胚的死亡部分，查明种子死亡的原因。119PPT课件四、四唑测定适用的范围收获后需马上播种的种子；具有深休眠的种子；发芽缓慢的种子；要求估测发芽潜力的种子。另外，也适用于测定发芽末期个别种子的生活力，特别是怀疑有休眠时；测定已萌发种子，或收获期间存在的不同类型和/或加工的损伤（热害、机械损伤或虫蛀等）种子；解决发芽试验中存在的问题，如不清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌剂的处理效果等。120PPT课件五、四唑测定方法的特点四唑测定是一种世界公认、广泛应用、实用方便、省时快速、结果可靠的种子生活力检验方法。具体地说具有以下几个特点：1.原理可靠，结果准确。如能正确使用四唑测定方法，四唑测定结果与发芽率误差一般不会超过3%～5%。2.不受休眠限制。3.方法简便、省时快速。4.成本低廉。四唑测定也有其缺陷：如对种子检验员经验和技能要求较高；结果不能提供休眠的程度；处理种子不会像发芽试验能反映药害情况。121PPT课件第二节试剂的配制和仪器设备一、试剂的配制1．四唑溶液2．磷酸缓冲液3．乳酸苯酚透明液采用乳酸苯酚透明液，是使小粒豆类和牧草种子经四唑染色后使种皮、稃壳或胚乳变为透明,以便透过这些部分清楚地观察其胚主要构造的染色情况。122PPT课件二、仪器和设备四唑测定的主要仪器设备与发芽试验设备相同，可采用其设备：如电热恒温箱或发芽箱、冰箱。四唑测定需配备的小器具有：种子切割工具如解剖刀或刀片、小针、切割垫板等；种子预湿需要纸、毛巾、烧杯等器具；染色时，要准备有盖的不同规格的染色盘、棕色加液器、镊子、吸管等；观察器具如体视显微镜或放大镜；以及保护器具如手套、眼睛保护镜、废液处理容器等。123PPT课件124PPT课件第三节四唑测定程序一、试验样品的来源数取试验样品来源必须是净种子。净种子可以从净度分析后的净种子中随机数取，也可以从送验样品中直接随机数取。一般随机数取100粒种子，2～4个重复或少于100粒的若干副重复。如果是测定发芽末期休眠种子的生活力，则可单用试验末期的休眠种子。委托检验可以直接从经充分混合的种子样品中随机数取种子。125PPT课件二、种子预处理在正式测定前，对所测种子样品需经过预处理（预措预湿），其主要目的是使种子加快和充分吸湿，软化种皮，方便样品准备和促进活组织酶系统的活化，以提高染色的均匀度、鉴定的可靠性和正确性。126PPT课件预措---是指在种子预湿前除去种子的外部附属物和在种子非要害部位弄破种皮，如水稻种子需脱去内外稃壳，豆科硬实种子刺破种皮等，但须注意，预措不能损伤种子内部胚的主要构造。绝大多数种子不须进行预措处理，但有一些种子在预湿前要进行预措处理。预湿是四唑染色测定的必要步骤。预湿方法目前常用的有以下两种方法：127PPT课件1．缓慢润湿缓慢润湿是按种子发芽试验所采用方法，将种子放在纸床上或纸巾间，让其缓慢吸湿。该法适用于那些直接浸在水中容易破裂和损伤的种子，以及已经劣变的种子或过分干燥的种子。缓慢润湿可采用下面两种方法：①纸卷或纸间预湿②纸床上预湿128PPT课件2．水中浸渍水中浸渍是将种子完全浸入水中，种子吸水快、均匀，并可缩短预湿时间。该法适用于种子直接浸入水中不会造成组织破裂损伤，并不会影响鉴定结果的种子种类，包括水稻、小麦、大麦、燕麦、黑麦草、黑麦、玉米等，详见表14-l。浸种温度一般采用20～30℃或30℃水温。129PPT课件三、染色前的样品准备为了使四唑溶液快速和充分渗入种子的全部活组织，加快染色反应和正确鉴定胚的主要构造，大多数种子在染色前必须采用适当的方法使胚的主要构造和(或)活的营养组织暴露出来。130PPT课件1．不须样品准备种皮渗水性良好的豆类种子，在四唑溶液里染色时，就能随着四唑溶液的渗入而吸胀，并在染色后剥去种皮就可正确鉴定，这类种子不须样品准备。2．沿胚纵切3．近胚纵切131PPT课件4．上半粒纵切5．斜切种子6．剥去种皮7．横切胚轴和盾片8．平切果种皮和胚乳，暴露出胚的构造9．穿刺或切开胚乳10．切去种子基端11．横切胚乳132PPT课件图14-1一些常见作物种子的准备示意图1．禾谷类和禾本科牧草种子通过胚和约在胚乳四分之三处纵切。2．燕麦属(Avena)和禾本科牧草种子靠近胚部横切。3．禾本科牧草种子通过胚乳末端部分横切和纵切。4．禾本科牧草种子刺穿胚乳。5．通过子叶末端一半纵切，如莴苣属(Lactuca)和菊科(Asteraceae)中的其他属。6．纵切面表明似上述第5种方式进行纵切时的解剖刀部位。7。沿胚的旁边纵切[伞形科(Apiaceae)中的种和其他具有直立胚的种]8．针叶树种子沿胚旁边纵切。9．在两端横切，打开胚腔，并切去小部分胚乳(配子体组织)o133PPT课件四、四唑染色四唑溶液必须完全淹没种子，溶液不能直接露光，因为光线可能使四唑盐类还原而降低其浓度，影响染色效果。按表14-1（GB/T3543.7-1995表1）的要求，将经过样品准备或不须准备的规定数量种子分别放入四唑溶液里染色。小粒种子可用直径6cm培养皿，大、中粒种子可用9cm培养皿或更大的容器，特别细小的种子可包在滤纸内，分别放入容器里。然后加入适宜浓度的四唑溶液，移置一定温度的恒温箱内进行染色反应。134PPT课件五、鉴定前处理为了确保鉴定结果的正确性，还应将已染色的种子样品，加以适当的处理，再进一步使胚的主要构造和活的营养组织明显地暴露出来，以便观察鉴定。1．不须处理，直接观察适用于染色前已进行样品准备的整个胚、摘出的胚中轴、纵切或横切的胚等样品。因为这些种子胚的主要构造已暴露在外面，所以不须附加处理，就可直接观察鉴定。135PPT课件2．轻压出胚，观察鉴定3．扯开营养组织，暴露出胚4．切去一层营养组织，暴露出胚和活营养组织5．沿胚中轴纵切，暴露胚的构造6．沿种子中线纵切，暴露出胚和活营养组织136PPT课件7．剥去半透明的种皮或种子组织，暴露出胚8．切去切面碎片或掰开子叶，暴露出胚9．剥去种皮和残余营养组织，暴露出胚10．乳酸苯酚透明液的应用加入2—4滴乳酸苯酚透明液，适当摇晃，使其与种子良好接触，38℃恒温箱保持30～60min，经清水漂洗或直接观察。137PPT课件六、观察鉴定一般鉴定原则是，凡是胚的主要构造及有关活营养组织染成有光泽的鲜红色，且组织状态正常的，为有生活力种子。凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光泽，并且活营养组织不染色部分已超过二分之一，或超过容许范围，以及组织软化的，完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色，且组织已软化腐烂或异常、虫蛀、损伤的均为无生活力种子。138PPT课件139PPT课件

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789101112图14-7油菜种子四唑染色图谱1、2.有生活力——胚全染成深红色。3.有生活力---子叶顶端有小于1/3不染色4.无生活力——胚根先端及侧面有大于直径1/4的不染色.5.无生活力—胚根基部不染色，子叶极小部分不染色6.无生活力——胚根一侧约1/2不染色。7.无生活力——胚根大部分不染色。8.无生活力——子叶与胚轴相连处不染色。9.有生活力—外方一枚子叶非关键部位部分不染色。10.无生活力——外方一枚子叶染色很浅。11.无生活力——仅子叶的一部分染成浅红色，其余全部不染色。12.无生活力——胚全不染色。case140PPT课件

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5678图14-6辣椒种子四唑染色图谱1.有发芽力——胚全染色。2.有发芽力——片子叶顶端约1／2不染色，另一片全染色。3.无发芽力—胚根先端不染色，子叶中部有一小段染色很浅。4.无发芽力——子叶中段不染色。5.无发芽力——子叶全不染色。6.无发芽力——子叶基部—端不染色。7.无发芽力——胚多处不染色。8.无发芽力——胚全不染色。141PPT课件

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5678图14-5番茄种子四唑染色图谱1.有生活力——胚全染色。2.无生活力——胚根基部及子叶先端不染色或染色很淡。3.无生活力一—子叶基部不染色。4.无生活力——子叶大部染色很淡。5.无生活力——子叶全不染色。6.无生活力——胚根先端明显不染色。7.无生活力——胚的中段，包括胚轴及与之相连的胚根及子叶均不染色8.无生活力——胚全不染色。142PPT课件

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56789图14-4棉花种子四唑染色图谱1.有生活力——染色后将子叶分开的胚可见两片子叶及怔根均染成红色。2.有生活力——胚全染成深红色3.无生活力——胚根中段不染色。4.无生活力——子叶关键部位不染色。5.无生活力——子叶基部不染色。6.无生活力——胚根中部很长一段不染色。7.无生活力——胚根先端不染色，子叶内部大部染色很浅。8.无生活力——子叶大部不染色。9.无生活力——胚全不染色。143PPT课件

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678910图14-3水稻种子四唑染色图谱1.有生活力——胚全染成深红色（不染部分属胚芽鞘和盾片间隙）。2.有生活力——盾片先端染色稍浅。3.有生活力---盾片先端及胚芽鞘先端不染色4.无生活力——胚根全不染色.5.无生活力—胚芽先端、胚芽鞘及盾片先端染色较浅。6.有生活力——胚全染成红色。7.有生活力——盾片全部染色，胚根胚芽鞘部分染色较浅。8.无生活力—盾片全不染色。9.无生活力——胚大部分染色较浅。10.无生活力——胚全不染色。144PPT课件

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789101112图14-2玉米种子四唑染色图谱1.有生活力——胚全染成深红色。2.有生活力——仅盾片两端少部不染色。3.有生活力---仅盾片先端及胚芽鞘先端及少部不染色4.有生活力——胚芽鞘先端不染色.5.有生活力—胚芽鞘先端及胚根顶端2／3以下不染色，种子根区染色6.无生活力——胚根大部不染色，已波及种子根区。7.无生活力——胚芽全不染色。8.无生活力——胚轴不染色。9.无生活力—盾片与胚轴连接处不染色。10.无生活力——盾片两端不染色部份已超过1／2。11.无生活力——盾片1／2以上不染色。12.无生活力——胚全不染色。145PPT课件第十四章概述试剂的配制和仪器设备生活力概念种子生活力测定的意义四唑染色测定的原理四唑测定适用的范围四唑染色四唑测定方法的特点试剂的配制仪器和设备四唑测定程序试验样品的来源数取种子预处理染色前的样品准备鉴定前处理观察鉴定生活力的生化测定

146PPT课件第十五章活力测定种子活力(seedvigor)是种子质量的重要指标之一,也是反映种用价值的主要组成部分,与种子田间出苗质量密切相关。活力的测定经过几十年的研究，已经取得了重大进展。在美国和欧洲，活力测定应用已经很普遍，许多种子公司把活力测定作为常规的检测项目。147PPT课件第一节概述一、种子活力的概念和定义种子活力不像种子发芽率那样是一个单一的测定特性，而是描述种子出苗不同方面（包括田间和贮藏期间）的综合特性。148PPT课件2004年出版的《国际种子检验规程》将活力定义为：“种子活力是指在广泛的环境条件下，决定可接受发芽率的种子批的活性和性能那些特性的综合表现”。并作了进一步的阐述，种子活力不是一种简单的测定概念，而是一种能表达如下有关种子批性能多种特性的综合概念：（1）种子发芽和幼苗生长速率和整齐度；（2）种子在不利环境条件下的出苗能力；（3）贮藏后，特别是能保持发芽力的性能。高活力种子批即使在不适宜的环境条件下，仍具有良好性能的潜力。149PPT课件二、种子活力的重要意义1．高活力种子的生产优越性种子活力是种子重要的品质，高活力种子具有明显的生长优势和生产潜力。(1)提高田间出苗率。(2)抵御不良环境条件。150PPT课件(3)增强对病虫、杂草的竞争能力。(4)抗寒力强，适于早播。(5)节约播种费用。(6)增加作物产量。(7)提高种子耐藏性。可见，高活力种子对农业生产具有十分重要的意义。151PPT课件三、活力、生活力和发芽力的区别及关系1．种子生活力