体内药物分析方法及方法的设计与评价

体内药物分析

BiopharmaceuticalAnalysis体内药物分析方法及方法的设计与评价生物样本经预处理后，选用适当方法进行测定。可供生物体液中药物及其代谢物含量测定的分析方法很多，归纳起来主要有三类：（一）光谱分析法（二）免疫分析法（三）色谱分析法除以上三类主要方法外，在生物药物分析中有时还使用同位素标记药物，它们主要应用于RIA、同位素逆稀释分析，或作为GC-MS分析的内标，以及在药物分离中作示踪应用等。此外，还有一些含抗生素类药物的生物样品，它们可用微生物方法测定，利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较样品与药物标准品两者对接种的试验菌产生的抑菌圈的大小，借以测定样品内抗生素药物的浓度。（一）光谱分析法光谱分析法包括比色测定、紫外分光光度法和荧光分光光度法。光谱法在体内药物分析中是应用较早的方法之一，根据陆明廉对我国1975～1984年间血药浓度测定方法的统计，应用光谱法占应用血药分析方法总数的三分之一。虽然近十多年来色谱法的飞速发展，使光谱法退出了体内药物分析应用方法的主角地位，但因其操作简便、快速，在体内药物分析中仍占有一定的地位。由于光谱法不具备分离功能，选择性较差，因此对样品的预处理要求较高。选用专属的方法或试剂与之反应，测定衍生物的荧光或对光吸收强度，也可借助数学的方法消除干扰。1、比色法比色法灵敏度不高，通常只能测定出1ug/ml浓度以上的样品。但该法具有快速，简便，对仪器要求不高等特点。只要采用具有选择性的显色剂和反应条件，可不经分离提取等步骤，直接用于血药浓度监测。2、紫外分光光度法分光光度法的灵敏度较比色法高，适用于测定具有紫外吸收的药物，方法简单，仪器要求也不高。但用于测定含药浓度低的样品时，也受到一定的限制。如测定体液中药物浓度时，亦可能受体液中内源性杂质的干扰和影响。因此，本法在体内药物分析中也受到灵敏度和专一性的限制。但采用一些光谱分析技术，如用差示分光光度法，导数分光光度法，双波长和三波长分光光度法等，可适当提高方法的灵敏度和选择性，也可消除杂质的干扰，因此，该法目前仍用于一些生物样品中的药物检测。3、荧光分光光度法荧光分光光度法的灵敏度比紫外-可见分光光度法的灵敏度高，最高可达到10-12g/mL，虽然有荧光的物质数量不多，但体内许多重要的生化物质、药物及其代谢物或致癌物都有荧光现象。由于荧光衍生物试剂的使用，进一步扩大了荧光分光光度法的应用，因此该法在体内药物分析和药物动力学研究中得到广泛的应用。（二）免疫分析法免疫分析主要指放射免疫、酶免疫、荧光免疫分析等。该法的原理是利用抗原-抗体特异反应来测定体内药物的含量。该法具有灵敏度高、专一性强、操作简便、快速等优点，是临床治疗药浓监测和生化检验的常用方法，但需要一定的试剂盒和仪器。

(三)色谱分析法色谱方法包括HPLC、GC和TLC等方法。色谱法在我国体内药物分析中的应用始于20世纪80年代，由于色谱法具有分离分析功能，具有高的专属性和灵敏度，并能同时分离分析结构相似的药物和代谢物等优点，使得其近20年来发展迅速，尤其是HPLC法，己在体内药物分析领域中确立了主导地位，常用作体内药物分析中评价其他方法的参比方法。近年手性色谱技术、毛细管电泳技术、色谱与光谱联用技术、色谱与免疫联用技术等的建立与发展，更为色谱技术在体内药物分析中的应用增添了无量的前景。1、HPLC法HPLC法在体内药物分析中的应用已大大超过其他分析方法，成为体内药物分析中应用最广泛的技术之一。与GC法相比，它具有以下优点：(1)适用范围广，可在室温下进行检测。对于挥发性低的，热稳定性差的，分子量大的以及离子型化合物等均可测定。(2)样品预处理简单，可不经萃取和衍生化处理直接测定极性大的水溶性药物，特别适合生物样品的测定；(3)分离效率高，流动相选择范围广，仪器自动化程度高。(4)检测器多是针对整分子的光谱特征进行检测的，专一性较高。检测方法多采用非破坏性的。流出组分可回收，可用于样品的制备。2、GC法GC法是最先兴起的具有分离和分析两种功能的测定技术，在药物分析和体内药物分析中曾得到较广泛的应用。由于HPLC法的发展，尤其是RP-HPLC(反相-高效液相色谱法）的广泛应用，使GC法的应用相对减少。其原因是GC法本身具有一些缺点，应用时常受被测组分的挥发性和热稳定性等方面的限制。用GC测定药物时一般需要在120℃以上柱温条件下进行，因此不适合用于遇热不稳定和极性大或挥发性差的药物，不适合用于生物样品的测定。因而影响该法在体内药物分析中的广泛应用。（四）毛细管电泳法毛细管电泳法(CE)，又称高效毛细管电泳法(HPCE)，是20世纪末发展起来的一种高效、快速的分析技术。HPCE是以高电压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品各组分之间淌度和分配系数的不同而实现分离的一类液相分离技术。近年来HPCE发展十分迅速，已在化学、生命科学和药学等领域得到广泛的应用。由于该法具有高效、快速、灵敏、进样少、信息量大、运行成本低、易于自动化等优点。因此使其在体内药物分析及其代谢的检测中得到广泛的应用。根据HPCE法的分离模式的不同。HPCE又分为：毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦、毛细管等速电泳和毛细管电色谱法。上述这些方法近几年来在体内药物分析中均得到不同程度应用。选用何种方法进行体内药物分析为好呢？一般要根据药物的理化性质、结构持征、药物浓度大小、干扰成分的多少、预处理方法、实验目的以及实验室条件等因素综合起来进行考虑。分析方法的设定依据

(一)做好文献总结、整理工作对已有报道的药物进行测定，应系统总结前人的文献，从中找出哪些问题已解决，还存在哪些问题等。对尚无文献报道的，也可根据药物的性质情况，参考相似类型药物的文献资料。(二)充分了解待测药物的特性与体内状况药物的理化性质和体内过程是建立方法的主要依据。药物的理化性质包括酸碱性(pKa)、亲脂性、溶解度、极性、光谱特征、稳定性等，这些性质与分析方法的选择、实验条件的改善密切相关。与常规分析方法不同，体内药物分析的对象是来自生物体内的样品，因此对药物在体内的状况必须了解，如药动学参数、体内代谢情况等。这涉及样品取样频率与间隔，分析方法的选择等。(三)明确测定的目的、要求应了解拟建立的方法是用于测定药代动力学参数，还是用于临床药浓监测。前者要求具有一定的灵敏度和准确度，不强调简便、快速，设计方法时应考虑到不同时间获得的样品中药物浓度变化较大这一因素。而用于临床药浓监测，则要求方法简便、快速。另外，是否要求同时测定母体药物和代谢物，若需同时测定两者，则应选择具有分离能力或专属的测定方法。（四）结合实验室条件根据实验室现有的和可能获得的设备条件加以考虑，选择可行的方法。方法建立的一般实验步骤

方法初步拟定后，还需进行一系列实验工作，以选择最佳实验条件及验证所拟定的方法是否适合实样检测。通常包括下列步骤：（一）以纯品进行测定取药物或其代谢物纯品适量，按拟定方法测定，求得浓度与测定响应值之间的关系，进行线性范围、最适测定浓度、检测灵敏度、测定最适条件(如pH值、温度、反应时间等）等的选择。(二)空白样品测定取空白生物样品，按拟定的方法进行处理，测定空白值(或色谱图)。空白值高低或色谱图状况将影响到方法的灵敏度和专属性，应力求将空白值降低。在色谱分析中应力求减少体内样品中内源性杂质峰，对无法消除的内源性杂质峰应设法使其从待测物的色谱区域内移开。能否取得良好的样品空白实验结果，是决定测定方法实际可行性的重要环节，必须设法解决。(三)以水代替空白样品，添加标准后测定以水代替空白生物样品，添加标准后按拟定的方法进行测定，以了解提取回收率及最低检测浓度的大致情况，从而对萃取溶剂、pH值、挥发浓缩等条件进行选择。(四)空白样品中添加标准后测定于空白生物样品中添加一定量标准品后按拟定方法进行测定，求得样品回收率数据，建立标准曲线。若采用色谱法测定，多数情况下需要用内标法定量，则应首先选择合适的内标，然后进行回收率的测定。(五)体内实际样品测定经过上述(一)至(四)步骤后进行实际样品的测定。但要指出的是，以上步骤只是生物样品实样检测前的准备工作，不能完全确定是否适用于实样测定。因药物在体内变化是复杂的，如不注意药物代谢和蛋白结合情况，则应用体外建立的方法，进行体内实样测定时往往会失败，甚至导致错误的结论，所以在设计方法时强调对药物体内过程要有一定程度的了解，从而选择避免干扰和适合样品实际情况的方法。有时也可采用专属性强，已证明用于体内实样测定的步骤和方法作为对照测定，以此来检验所建立的方法的实际可行性。方法的评价

对于所建立的体内药物分析方法的可行性与可靠性，需要应用若干标准来进行方法学的考察与评价。这是研究和建立一个新的分析方法时必须着重抓住的几个环节。评价一个体内药物分析方法的优劣主要有以下几个指标：精密度、准确度、灵敏度、专属性或选择性、可测浓度范围、测定所需时间以及对生物样品的适应性等，现择要讨论如下：（一）准确度准确度(accuracy)是方法评价的最基本要点之一，它是表示测定结果与真值的符合程度。常用回收率(recovery)数值反映测定的准确程度，也可通过与其他已建立的方法进行比较的办法来加以反映。将已知量的药物纯品加到空白样品(如血样)中去，经过一系列的处理、测定，所得药物量与加入量之比值的百分率即为回收率。回收率当然越接近100％越好，但因样品组分复杂，含量低，处理步骤多时就很难达到高的回收率。对于一个方法来说，更为重要的是每次测定所得回收率要保持恒定，虽然有时回收率较低，但只要重现性好，通过校正后仍可采用。根据回收率测定方法不同可分为绝对回收率和方法回收率。1．绝对回收率绝对回收率也称萃取回收率、提取回收率，它反映了一个方法的萃取效率，与体内样品检测灵敏度有关，是评价体内药物分析方法的重要指标之一。现以色谱法为例，说明绝对回收率的求算过程。例如取一定量被测药物标准品，加到空白血样中，按规定方法处理，使最后溶液中药物标准品浓度为1ug/mL，测定色谱峰面积，记为A测，另取1ug/mL的药物标准品的纯溶剂溶液宜接进样，测得色谱峰面积记为A真，用外标法计算。绝对回收率应考察高、中、低3个浓度，低浓度选择在定量限(LOQ)附近，高浓度在标准曲线的上限附近，中间选一个浓度。对于回收率的大小与变异不宜苛求，一般添加量在10-6～10-9级，绝对回收率若能达到50％～80％，应认为是令人满意的。在色谱分析中常采用内标法测定含量，将药物标准品和内标准物质加到空白血样中，按规定方法处理，测得药物和内标峰面积，求出它们的比值R测＝A药/A内。另取相同浓度的药物标准品和内标准物质的纯溶剂溶液进样，得药物标准品和内标峰面积，计算两者的比值R真＝A'药/A'内。再根据下式求出回收率：在内标法中，应注意药物与内标准物质各自用外标法测得的绝对回收率应相近，两者相差应小于10％，否则回收率偏离100％太远。

2．方法回收率取一系列浓度的药物标准品加到空白体液中，按设定方法测定，根据标准品浓度及响应的测定信号值绘制标准曲线，先按最小二乘法求出回归方程。然后取高、中、低浓度的药物标准品添加到空白体液中，每个浓度至少平行测定5份，按标准曲线制备方法同法测定，所得信号值代入回归方程，求得测定值。最后与加入量比较，得方法回收率。除定量限外，各浓度点测得的平均值偏离实际加入量应小于15％，定量限这一点应小于20％。在测定回收率时，不管采用何种方法，都要注意以下几个问题：①添加的药物量必须与实际测定量相近；②添加物质必须与实际存在的状态相似；③必须同时做空白试验。上述①、②两点的原因：一是如果添加量大，实际测定量小，那么有可能测定量在回收率的误差范围内，这样就不可靠；二是如果添加量大，蛋白质实际结合能力小，这样存在在空白血样中的添加药物部分没有结合，与实际存在的情况不符，测得回收率容易偏高。因此在报道一个方法的回收率时，必须说明添加量。方法的准确度有时也可用一个已证明有相当专属性和可靠性的方法与新建立的方法同时进行测定，然后比较两法测得结果的相关程度。用相关系数r来表示，一般要求r＞0.95，直线的斜率接近1，表明两法吻合。(二)精密度精密度(precision)是表示一组测量值彼此符合的程度。有多种表示方法，在体内药物分析中常用的表示方法有：精密度测定通常采用高、中、低三种浓度进行测定。低浓度选择在定量限(LOQ)附近，高浓度在标准曲线的上限附近，中间选一个浓度。每个浓度平行测定5～7次，计算测定结果的标准差。除定量限外，各浓度点的RSD不应大于15％，最低定量限这一点不应大于20％。精密度可进一步分为日内或批内精密度和日间或批间精密度。前者表示一次测定的重复性，后者表示不同时间测定结果的重复性。日内(或批内)精密度是考察分析方法在短期内测定方法的变异情况，凡是在同一天内将样品多次测定所计算出的精密度称为日内精密度；凡在同一批内样品多次测定所计算出的精密度称为批内精密度。所谓“批内”是指测定时使用同批试剂、同一条标准曲线等主要相同条件下完成的分析测定。日间(或批间)精密度是考察分析方法在不同时间测定结果的变异情况。由于体内药物分析面临样品数量多，测定持续时间长，往往在同一天或同一批内不能完成，因此样品测定时使用的仪器性能、试剂、标准曲线及环境条件等都可能发生微小的变化，从而导致分析结果的变异增大。因此，考察分析方法的精密度时，还应考察日间或批间精密度。测定时可使用日内(或批内)精密度测定时，所使用的高、中、低三种浓度样品，在同一周内不同日(或不同批)分别测定3～5次，然后计算出RSD。（三）灵敏度灵敏度(sensitivity)是指一种方法可以检测出有关化合物的最小量，常用以下几种表示方法。1．检测限(limitofdetection，LOD)检测限表示在生物介质中药物的最低可测度(或绝对量)。通常以被测信号和背景噪音比S/N为2～3倍时的被测物的绝对量来表示，LOD＝3N/S（N＝噪音，S＝被测物信号/单位重量)。例如，在色谱分析中，测得N＝1mm，取2ug/mL的样品液20uL进样，测得峰高为30mm。按上式计算：即以S/N＝3时，测得样品的LOD为4ng。也可通过多次空白试验，求得背景响应的标准差，再乘以2或3，作为LOD的估计值，然后配制相应检测限浓度样品，反复测试来确定。2．定量限(limitofqnantification，LOQ)定量限是指生物介质中药物可定量测定的最低量，表示方式和测定方法与检测限相同，它与检测限的不同在于定量限规定的最低测得浓度应该符合一定精密度和准确度的要求。通常以标准曲线的最低浓度点作为定量限。也可以S/N＝10或空白背景响应的标准差乘以10作为估计值，再通过试验确定。在进行药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验时要求LOQ至少能满足测定3～5个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1/10～1/20时的药物浓度。3．最低检测浓度最低检测浓度则多指可进行定量测定的某一药物的最低浓度，它与样品体积大小等因素有关，可通过下式求得，以上表示灵敏度的方法均是指仪器的灵敏度，即进入仪器的最低绝对量或最低浓度。如果我们要知道体内样品的浓度检测限，则要根据样品处理方法，考虑稀释度。体内样品的浓度检测限＝仪器的浓度检测限×样品稀释度例如，取血样1mL，经处理后进样前的血样最终体积为0.1mL，已知最低检测浓度为10-6，则血样中被测物的最低浓度为0.1×10-6。若经处理后，最终体积为10mL，则血样中被测物的最低浓度为10×10-6。这表明虽然仪器灵敏皮相同，但因样品预处理方法不同，就有可能影响到实际样品测定的灵敏度。要提高检测灵敏度，可采用如下一些方法：①提高仪器本身的灵敏度；②提高进样量；③降低仪器噪音；④提高样品的浓缩程度或降低样品稀释度；⑤消除干扰，降低空白值，这可通过改变色谱条件，改进预处理方法来减少于扰杂质的影响。（四）方法的专属性方法的专属性(specificity)也称选择性(selectivity)，是指样品中含有其他共存物质时，该法定量测定被测物的能力。即测定的讯号应是属于被测物所特有的，否则就易受干扰。考察一个方法是否专属，应着重考虑代谢物、内源性物质和同时服用药物的干扰。专属性的测定通常取6个个体空白样品(要求对这6个个体的取样时间、膳食结构以及影响实验的其他因素加以控制)，采用拟定的方法进行测定。所得结果与接近于定量限的被测物浓度的纯溶剂溶液所得结果进行比较。在药物、代谢物、内标物的tR处不应有大的干扰，任何有大的干扰的空白应舍去。如果大于10％的空白样品显示大的干扰，应另取一组空白样品重试，如果仍有10％以上的空白样品显示大的干扰，则应改变拟定的方法，以消除干扰。在报告专属性时，若采用色谱法测定，至少要提供空白生物样品色谱图，空白生物样品外加标准品色谱图及用药后的样品色谱图。(五)线性范围线性范围(1inearrange)是指利用该法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围。通常是将药物标准品加入空白体液中，制成一系列不同浓度的标准液，按规定方法处理、测定。根据药物标准品浓度和响应的信号值绘制标准曲线，或计算回归方程，求出r值和浓度范围。标准曲线的制备一般由一个空白，一个零标准(空白样品加内标)和5～8个非零标准(系列浓度标样)组成，要求覆盖实际的样品浓度范围，包括LOQ。空白和零标准不用作标准曲线的计算，仅作为对干扰的考察。线性程度可用最小二乘法处理数据，求得相关系数r，一般r不应低于0.99，同时必须符合一定的精密度和准确度。要求LOQ处偏离标准浓度应小等于20％，其他各点应小等于15％。（六）稳定性药物的稳定性(stability)是贮存条件、药物的化学性质、空白生物样品和容器系统的函数。在特定的容器和生物样品中待测物的稳定性不能外推至其他系统。在生物样品中待测物的稳定性包括长期贮存、短期贮存和冷冻-解冻循环过程中的稳定性，也包括标准贮备液中待测物的稳定性。1．长期贮存稳定性长期稳定性的贮存时间应超过收集第一个样品至最后一个样品分析所需的时间周期。贮存温度一船为-20℃，如果需要也可在-70℃贮存。要求高、低浓度至少分别测定3次，与第一天测得的相应浓度的结果进行比较。2．短期室温稳定性高、低浓度各3份于室温下放置4～24h(根据实际操作在室温中需维持的时间而定)，在不同时间点取样，进行分析，与0h测得结果进行比较。3．冷冻-解冻稳定性取高、低浓度样品至少各3份，于-20℃贮存24h，取出置室温放置使自然融解。当融解完全后，取样，进行分析。然后再把样品放回冷冻状态保持12～24h，如此解冻-冷冻应重复循环二次以上，然后比较各次分析结果。4．贮备液稳定性药物与内标的贮备溶液的稳定性应对其在室温下至少6h的稳定性进行考察，然后将其冷藏或冷冻7～14d或恰当周期后进行测定，所得仪器响应值与新鲜配制溶液所得响应值进行比较。应用实例

例1：用HPLC法测定生物样品中淫羊藿苷的浓度。1、实验方法(1)色谱条件色谱柱：ZorbaxODS(10um，4.6mm×250mm)；柱温：35℃；流动相：四氢呋喃-水-冰醋酸(20：75：5)；流速：1.0mL/min；紫外检测波长：270nm；检测灵敏度：0.02UFS。(2)生物样品的处理①血浆：取样品0.1mL置10mL离心管中，加入乙酸乙酯3.5mL，振荡3min，离心(2000r/min，5min)，移取上清液，于50℃水浴用氮气吹干，残渣加内标液100uL，振荡溶解后进样20uL。②粪和尿：大鼠粪便样品于室温风干称重后，置乳钵内研成细末，用生理盐水按10％稀释使其成混悬液。取混悬液0.5mL或尿样0.5mL用乙酸乙酯4.0mL提取两次，合并两次提取液，于50℃水浴用氮气吹干，加入甲醇1.0mL，振荡溶解后进样10uL。③组织匀浆：将大鼠断头处死，取心、肝、脾、肺、肾、胃、肌肉、脑、睾丸各组织，称重，用组织匀浆器制成生理盐水匀浆，使每mL含各组织0.4g，取此匀浆0.2mL，按血浆样品处理方法进行处理分析。2．结果与讨论(1)色谱行为在上述色谱条件下，淫羊藿苷(icariin，ICA)与内标、淫羊藿提取液中的其他6种成分及血浆内源性物质得到良好分离(见图4-1)，ICA及内标苯甲酸的保留时间分别为7.92min和11.93min。(2)标准曲线的制备用甲醇精密配制成1mg/mLICA标准贮备液，再用甲醇稀释成100ug/mL标准工作液，置冰箱保存。另用甲醇制成1mg/mL内标贮备液，再用甲醇稀释成40ug/mL标准工作液，置冰箱保存。用ICA标准工作液及空白生物样品配制标准系列，按样品预处理方法操作，以ICA与IS峰高比为纵坐标，ICA浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程及相关系数。由于粪和尿中的代谢产物干扰内标色谱峰，因此粪和尿采用外标法、以ICA峰高为纵坐标，ICA浓度为横坐标绘制标准曲线。结果血浆、尿、组织匀浆和粪的线性范围分别为：1～128，2～32，2～32，4～64ug/mL。血浆的标准曲线方程(n＝6)为：其他生物样品标准曲线方程的r值均大于0.99。(3)回收率分别于空白血浆中准确加入一定量的ICA标准工作液，按上述方法经提取后进行HPLC分析，按血浆标准曲线方程测得浓度，求出方法回收率。标准品经提取后，与标准品直接进样测定所得各对应标准品与内标峰高比值相比较，求得血浆样品的提取回收率，见表4-1。其他生物样品的方法回收率均大于95.26％，提取回收率均大于73.57％。(4)精密度用空白血浆制成含ICA2，8，32，128ug/mL样品溶液各5管，测定日内及日间误差，结果见表4-1。其他生物样品的日内、日间相对标准偏差(RSD)均小于7.1％。(5)灵敏度测定按色谱峰信噪比(S/N)为3作为检测下限，结果显示ICA的最低检测浓度为0.5ug/mL。(6)色谱分析条件选择淫羊藿提取液中的主要化学成分为淫羊藿苷，还有其他黄酮类化合物存在，因此在上述色谱条件下可出现6～7个蜂。为了获得最佳分离效果，首先用甲醇:水为流动相进行分离，当比例为55:45时，虽然ICA与其他化学成分已分离，但其保留时间较长，峰形较宽，且柱压较高。为此，选用对黄酮类化合物分离选择性较好的四氢呋喃，并加入一定量的冰醋酸，使弱酸化合物分离效果更佳。经过调整不同比例，多次试验，最后确定四氢呋喃:水:冰醋酸最佳配比为20:75:5。(7)内标选择为能用内标法准确测定ICA浓度，本文对槲皮素、芦丁、橙皮苷、氨茶碱、阿斯匹林、非那西汀、黄体酮、苯甲酸和兰萼甲素等13种药物进行了测定，考察其与ICA在血浆中的分离情况，结果用保留时间小于ICA的药物作内标时，往往被血浆中干扰峰所干扰。阿斯匹林、非那西汀均在ICA前1～5min出峰，却被淫羊藿提取液中其他成分所干扰。兰萼甲素和苯甲酸均在ICA后2～4min出峰，没有任何峰干扰，因此两者均可作为内标，考虑到苯甲酸方便易得，故选用苯甲酸作为内标。(8)提取溶媒的选择本文考察了用乙醇、乙酸乙酯及乙醇:乙酸乙酯(1:5)为溶媒对ICA进行提取测定，发现前者提取回收率小于60％，而后者虽然提取回收率大于95％，但带入杂质峰较多，而且色谱系统稳定性下降。因此实验选用乙酸乙酯为提取溶媒，各生物样品的提取回收率均大于73％，且方法稳定。(9)药物在生物样品中的稳定性于各空白样品中加入ICA标准品，配制成15ug/mL浓度的样品数份，置-20℃冰箱保存，分别于第0、5、15、30d按实验方法测定，RSD均小于7.1％。说明该药物在各生物样品中-20℃冰箱保存下，至少可稳定1个月。(10)血药浓度的测定为了检验上述方法是否能满足ICA的药代动力学研究，应用本方法进行了大鼠静脉注射淫羊藿提取液。由大鼠颈静脉按10mg/kg静脉注射，于给药后5，10，15，20，25，30，40，60，80，120，180min于颈静脉各取血0.25mL，肝素抗凝，离心后取血浆0.1mL，按上述方法提取和测定ICA浓度，以给药时间为横坐标，血浆中ICA的对数浓度为纵坐标绘制药时曲线，见图4-2。血药浓度测定结果表明，本文建立的分析方法可满足ICA药代动力学研究的需要，具有灵敏度高、准确性好等优点。例2：用RP-HPLC法同时测定依普黄酮及其代谢物M-I血浆浓度。1．实验方法(1)色谱条件检测波长：254nm；色谱柱：WatersNova-PakC18柱(5um，3.9mm×150mm)；流动相：磷酸盐缓冲液(0.02mol/L，pH值3.5)-乙腈(1:1)；流速：1.0mL/min；灵敏度：0.001AUFS；柱温：室温；进样量：10～20uL。(2)溶液配制①标准液及内标液：精密称取依普黄酮对照品10.00mg于10mL量瓶中，加入乙腈溶解并稀释至刻度，精密量取此液1.00mL以流动相稀释至50.0mL，使其成20mg/L标准储备液，4℃避光保存。精密称取依普黄酮代谢物M-I对照品10mg，同法制成25mg/L标准储备液，4℃避光保存。另以流动相为溶剂配制30mg/L的克霉唑溶液作为内标液，同法冷藏备用。②流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，以磷酸调pH值至3.5，过滤，与等量乙腈混合，超声脱气10min。(3)标准曲线的绘制①标准血浆：精密量取依普黄酮标准贮备液和代谢物M-I标准贮备液各100uL于10mL刻度试管中，加入空白血浆9.80mL，振荡混匀，再进行倍比稀释，使其成每mL含依普黄酮200.0，100.0，50.0，25.0，12.5，6.25，3.125ng，含代谢物M-I250.0，125.0，62.5，31.25，15.625，7.813，3.906ug/L的标准血浆。②标准曲线：精密量取上述标准血浆1.00mL于10mL具塞玻璃试管中，加人提取缓冲液800uL和内标液100uL，摇匀后加提取液叔丁基甲醚3mL，于液体混合器内混合液涡旋处提取1min，离心(3000r/min)10min，吸取上层有机相置5mL尖底刻度试管中，在40℃水浴中通氮气吹干，以100uL流动相富集，进样10～20uL，测定峰高，依普黄酮与内标的峰高之比为横坐标，依普黄酮浓度为纵坐标绘制标准曲线；同法绘制代谢物M-I标准曲线。

2．结果与讨论(1)线性范围和灵敏度血浆中依普黄酮浓度在4～200.0ug/L范围内，代谢物M-I浓度在4～250.0ug/L范围内，线性关系良好，标准曲线方程分别为：在本文条件下血浆中依普黄酮及代谢物M-I最低检测浓度分别为2.0ug/L和2.5ug/L，最低检测量分别为0.04ng和0.05ng。(2)回收率与精密度实验①提取回收率：取上述标准血浆，按标准曲线项下方法处理，进样，测得峰高。另配制相应浓度的依普黄酮及其代谢物M-I溶液，在相同条件下直接进样，测定峰高，连续测定5次。平均提取回收率见表4-2。②方法回收率：取上述标准血浆，按标准曲线项下方法处理、测定，按标准曲线方程计算回收率，连续测定5次，结果见表4-3。③精密度：取上述标准血浆，按标准曲线项下方法处理、进样，连续测定5次，计算日内误差；另取上述不同浓度的标准血浆各5份，同法处理、进样，计算日间误差。(3)选择性选用检测波长λ＝254nm，在本文色谱条件下，依普黄酮及其代谢物M-I、内标物均有较大吸收。标准血浆中依普黄酮及其代谢物M-I和内标的保留时间分别为9.59．3.20和6.07min，无干扰蜂出现。样本血浆中虽有杂蜂出现，但与依普黄酮及其代谢物M-I及内标分离良好。色谱谱见图4-3。第三节分析文体特征和表现手法2大考点书法大家启功自传赏析中学生，副教授。博不精，专不透。名虽扬，实不够。高不成，低不就。瘫偏‘左’，派曾‘右’。面微圆，皮欠厚。妻已亡，并无后。丧犹新，病照旧。六十六，非不寿。八宝山，渐相凑。计平生，谥曰陋。身与名，一起臭。【赏析】寓幽默于“三字经”，名利淡薄，人生洒脱，真乃大师心态。1.实用类文本都有其鲜明的文体特征，传记的文体特征体现为作品的真实性和生动性。传记的表现手法主要有以下几个方面：人物表现的手法、结构技巧、语言艺术和修辞手法。2.在实际考查中，对传记中段落作用、细节描写、人物陪衬以及环境描写设题较多，对于材料的选择与组织也常有涉及。3.考生复习时要善于借鉴小说和散文的知识和经验，同时抓住传记的主旨、构思以及语言特征来解答问题。传记的文体特点是真实性和文学性。其中，真实性是传记的第一特征，写作时不允许任意虚构。但传记不同于一般的枯燥的历史记录，它具有文学性，它通过作者的选择、剪辑、组接，倾注了爱憎的情感；它需要用艺术的手法加以表现，以达到传神的目的。考点一分析文体特征从哪些方面分析传记的文体特征？一、选材方面1.人物的时代性和代表性。传记里的人物都是某时代某领域较

突出的人物。2.选材的真实性和典型性。传记的材料比较翔实，作者从传主

的繁杂经历中选取典型的事例，来表现传主的人格特点，有

较强的说服力。3.传记的材料可以是重大事件，也可以是日常生活小事。[知能构建]二、组材方面1.从时序角度思考。通过抓时间词语，可以迅速理清文章脉络，

把握人物的生活经历及思想演变过程。2.从详略方面思考。组材是与主题密切相关的。对中心有用的，

与主题特别密切的材料，是主要内容，则需浓墨重彩地渲染，

要详细写；与主题关系不很密切的材料，是次要内容，则轻

描淡写，甚至一笔带过。三、句段作用和标题效果类别作用或效果开头段内容：开篇点题，渲染气氛，奠定基调，表明情感。结构：总领下文，统摄全篇；与下文某处文字呼应，为下文做铺垫或埋下伏笔；与结尾呼应。中间段内容：如果比较短，它的作用一般是总结上文，照应下文；如果比较长，它的作用一般是扩展思路，丰富内涵，具体展示，深化主题。结构：过渡，承上启下，为下文埋下伏笔、铺垫蓄势。结尾段内容：点明中心，深化主题，画龙点睛，升华感情、卒章显志，启发思考。结构：照应开头；呼应前文；使结构首尾圆合。标题①突出了叙述评议的对象。②设置悬念，激发读者的阅读兴趣。③表现了传主的精神或品质。④点明了主旨，表达了作者的情感。⑤运用修辞，使文章内涵丰富，意蕴深刻，增加了文章的厚度与深度。四、语言特色角度分析鉴赏传记的类别自传采用第一人称，语言或幽默调侃或自然亲切；他传采用第三人称，语言或朴实自然或文采斐然。语意和句式句子中的关键词所包含的情感、态度等，整句与散句、推测与肯定、议论与抒情、祈使与反问等特殊句式，往往有着不同一般的表现力。这些都是分析语言的切入点。修辞的角度修辞一般是用来加强语言的表现力的。抓住修辞特点，就能从语言的表达效果上加以体味。语言风格含蓄与明快、文雅与通俗、生动与朴实、富丽与素淡、简洁与繁复等。1.(2015·新课标全国卷Ⅰ)阅读下面的文字，完成后面的题目。[即学即练]朱东润自传1896年我出生在江苏泰兴一个失业店员的家庭，早年生活艰苦，所受的教育也存在着一定的波折。21岁我到梧州担任广西第二中学的外语教师，23岁调任南通师范学校教师。1929年4月间，我到武汉大学担任外语讲师，从此我就成为大学教师。那时武汉大学的文学院长是闻一多教授，他看到中文系的教师实在太复杂，总想来一些变动。用近年的说法，这叫作掺沙子。我的命运是作为沙子而到中文系开课的。大约是1939年吧，一所内迁的大学的中文系在学年开始，出现了传记研究这一个课，其下注明本年开韩柳文。传记文学也好，韩柳文学也不妨，但是怎么会在传记研究这个总题下面开韩柳文呢？在当时的大学里，出现的怪事不少，可是这一项多少和我的兴趣有关，这就决定了我对于传记文学献身的意图。《四库全书总目》有传记类，指出《晏子春秋》为传之祖，《孔子三朝记》为记之祖，这是三百年前的看法，现在用不上了。有人说《史记》《汉书》为传记之祖，这个也用不上。《史》《汉》有互见法，对于一个人的评价，常常需要通读全书多卷，才能得其大略。可是在传记文学里，一个传主只有一本书，必须在这本书里把对他的评价全部交代。是不是古人所作的传、行状、神道碑这一类的作品对于近代传记文学的写作有什么帮助呢？也不尽然。古代文人的这类作品，主要是对于死者的歌颂，对于近代传记文学是没有什么用处的。这些作品，毕竟不是传记文学。除了史家和文人的作品以外，是不是还有值得提出的呢？有的，这便是所谓别传。别传的名称，可能不是作者的自称而是后人认为有别于正史，因此称为“别传”。有些简单一些，也可称为传叙。这类作品写得都很生动，没有那些阿谀奉承之辞，而且是信笔直书，对于传主的错误和缺陷，都是全部奉陈。是不是可以从国外吸收传记文学的写作方法呢？当然可以，而且有此必要。但是不能没有一个抉择。罗马时代的勃路塔克是最好的了，但是他的时代和我们相去太远，而且他的那部大作，所着重的是相互比较而很少对于传主的刻画，因此我们只能看到一个大略而看不到入情入理的细致的分析。英国的《约翰逊博士传》是传记文学中的不朽名作，英国人把它推重到极高的地位。这部书的细致是到了一个登峰造极的地位，但是的确也难免有些琐碎。而且由于约翰逊并不处于当时的政治中心，其人也并不能代表英国的一般人物，所以这部作品不是我们必须模仿的范本。是不是我国已经翻译过来的《维多利亚女王传》可以作为范本呢？应当说是可以，由于作者着墨无多，处处显得“颊上三毫”的风神。可是中国文人相传的做法，正是走的一样的道路，所以无论近代人怎么推崇这部作品，总还不免令人有“穿新鞋走老路”的戒心。国内外的作品读过一些，也读过法国评论家莫洛亚的传记文学理论，是不是对于传记文学就算有些认识呢？不算，在自己没有动手创作之前，就不能算是认识。这时是1940年左右，中国正在艰苦抗战，我只身独处，住在四川乐山的郊区，每周得进城到学校上课，生活也很艰苦。家乡已经陷落了，妻室儿女，一家八口，正在死亡线上挣扎。我决心把研读的各种传记作为范本，自己也写出一本来。我写谁呢？我考虑了好久，最后决定写明代的张居正。第一，因为他能把一个充满内忧外患的国家拯救出来，为垂亡的明王朝延长了七十年的寿命。第二，因为他不顾个人的安危和世人的唾骂，终于完成历史赋予他的使命。他不是没有缺点的，但是无论他有多大的缺点，他是唯一能够拯救那个时代的人物。(有删改)【相关链接】①自传和传人，本是性质类似的著述，除了因为作者立场的不同，因而有必要的区别以外，原来没有很大的差异。但是在西洋文学里，常会发生分类的麻烦。我们则传叙二字连用指明同类的文学。同时因为古代的用法，传人曰传，自叙曰叙，这种分别的观念，是一种原有的观念，所以传叙文学，包括叙、传在内，丝毫不感觉牵强。(朱东润《关于传叙文学的几个名词》)②朱先生确是有儒家风度的学者，一身正气，因此他所选择的传主对象，差不多都是关心国计民生的有为之士。他强调关切现实，拯救危亡，尊崇气节与品格。这都是可以理解的。(傅璇琮《理性的思索和情感的倾注——读朱东润先生史传文学随想》)★作为带有学术性质的自传，本文有什么特点？请简要回答。答：________________________________________________解析本题考查分析文本的文体基本特征和语言特色。解答时，要在阅读的基础上，了解文章的文体特征、内容的侧重点、内容表达的特征。本文作为一篇带有学术性质的自传，突出特点之一就是偏重学术经历，介绍了自己的传记文学观及其形成过程。文章的开头与结尾，将自己的生平与学术结合起来，尤其是为张居正写传原因的解说，结合当时的社会背景和自己家庭的情况，更是呈现出学术背后的家国情怀。在行文方面，语言平易自然，穿插“怎么会在传记研究这个总题下面开韩柳文呢？”“我写谁呢？”等口语，语言平白如话，就像面对面闲谈一样。答案①偏重学术经历，主要写自己的传记文学观及其形成过程；②写生平与写学术二者交融，呈现学术背后的家国情怀；③行文平易自然，穿插使用口语，就像和老朋友闲谈一样。1.一般和具体结合我们在对文本的一般性特征进行分析的同时，也应该注意到富有个性的“具体”的特征。[思维建模]分析文体特征2要领2.注意效果解读

分析文体特征时，不能仅仅停留在辨别认知的层面上，而必须懂得去对它们做“效果”分析。对“效果”的分析不外乎从这样的两个方面去考虑：一是从表达者的表达这个方面去考虑，看他采用这样的方式会给他的表达带来怎样的好处；二是从阅读者这个方面考虑，看他这样做可以对读者的阅读产生什么样的积极的效果。分析传记的文体特征☞咀嚼经典高考题目提升审题答题技能高考曾经这样考品答案，悟技巧，不丢分1.(2014·辽宁卷)本文第一自然段有何作用？请简要分析。(6分)(《侯仁之：城市的知音》)①交代侯仁之选择历史专业的原因；②写出了侯仁之对国家民族命运的关注，使传主形象更加丰满；③体现了传记的真实性；④为下文介绍侯仁之的学术研究及成就做铺垫。(答出1点给1分，2点给3分，3点给5分，4点给6分)2.(2013·福建卷)文章已有“《梦里京华》”一例，为何还要例举“委曲求全”？请简要分析。(4分)(《那一种遥远的幽默》)①增强说服力，进一步突出王文显剧作别有一番幽默，肯定他喜剧创作的能力和影响。②引出下文对王文显任代理校长时行事风格的叙写，形成对比，以突出王文显治校的持重务实，一丝不苟。(每点2分，意思对即可。)3.(2012·新课标全国卷)12(1)选项E：本文撷取谢希德人生的若干片断，描写她热爱祖国、献身科学、关爱亲人的事迹，表现了一位杰出女性的伟大人格。(√)(《谢希德的诚与真》)本选项考查对文体特征的理解，涉及文章的选材、文本的主要内容与主题等内容。(正确选项，3分)因传记是记载人物生平或事迹的一类记叙文体，它的表达技巧比较接近于小说和散文，可以说文学类文本的表现手法都与传记相通。由于传记的文体特征，需要格外注意其他人物对传主的映衬、细节描写、引用和议论等方面。考点二分析表现手法3题型(一)叙述1.顺叙的作用(效果)：思路清晰，结构条理。2.倒叙的作用(效果)[知能构建](1)能增强文章的生动性，使文章产生悬念，更能引人入胜。(2)强调作用，这一段主要写了……放到开头强调了传主的……(与传主精神、品质等的关系)。(3)表达了作者对传主怎样的情感(与作者情感的关系)。(4)深化了主旨(与主旨的关系)。(5)使文章结构富于变化，避免了叙述的平淡和结构的单调。3.插叙的作用(效果)(1)内容上：①(如果是引述他人的话，或是传主自己的话、书信等)突出了传记的真实性，使文章内容更充实。②深化了文章主题。③使人物形象更加鲜明。④(如果是引述他人的话等就属于侧面描写)侧面烘托了传主的……⑤(如果插叙的语段拿传主和其他人对比)通过对比，衬托出了传主的……(2)结构上：①避免了结构的平铺直叙，使行文起伏多变，使结构更加紧凑集中。②对……做了必要的铺垫照应，补充说明。(二)描写(主要是细节描写)1.描写的三种作用(1)让传主形象更全面完整，更立体化。传主形象是由多个侧面组成的，只表现其伟大的一面，而不展现其普通的一面，人物就不能立体化。

(2)让人物真实可信。要把人物写好，就要写其普通的一面，因为读者是普通的公民，他愿意接受伟人身上普通的一面。这样的人物会让读者觉得真实亲切，易于接受。(3)符合读者心理需要。对于大人物诸如政治家、艺术家、影视明星等，读者已经从媒体中了解了一些他们在本行业内的成就、事迹。对于传记作品，读者更渴望了解一些花絮。因此，一些细节正能解决这一问题。2.两种答题方式(1)如果是写人物的细节，可以这样：①思维趋向：写人物的细节＝细节内容＋独特形象＋表现主题＋读者心理。②答题方式：通过描写……细节，……刻画出一个……形象，突出……(主题思想)，给读者……感受。(2)如果是场面细节，可以这样：①思维趋向：场面细节＝细节内容＋读者感受＋表现主题。②答题方式：通过对……的描写，传神地写出在场人……的心情，烘托了……的现场气氛，使读者仿佛置身于现场之中，产生身临其境之感。真实性和感染力都很强。真实地反映了……表达了……的情感倾向。(三)议论的作用1.内容上：对主题表达起画龙点睛的作用。评论性文字既是对

事实的阐释，也是作者自我态度的呈现。2.结构上：①用在开头，起统领全文、点明中心、引出下文的

作用，并能使文章的主题思想得到鲜明的表达；②用在文章

的结尾，一般是为了加深对所写人物的认识，深化文章的主

题思想，凸显所写人物的品格意义，起画龙点睛的作用；③用在文章的中间，起承上启下的作用，使事与事之间紧密

地连接起来，使文章结构显得严谨。1.从侧面表现传主通过写与传主相关的人、事、物，从侧面表现传主的道德性格、特点、品性等。可以使传记具有更为真实感人的力量，可以塑造丰满的传主形象，突出传主的精神面貌，起到增强作品历史深度和情感力度的作用，增强文章的真实性和可读性。2.内容和情节的需要不交代其他相关的人、事、物，内容情节就不完整，就无法更好地表现传主。只有把传主放到一定的环境中，他的行为、性格才显现其合理性。这样写可以更好地体现作者的写作意图，丰富文章内容，增强文章内涵，增强文章文化底蕴等。3.由点及面，深化主题作者要揭示某种社会道理或者一个大的群体，比如整个民族的某种品质，光凭传主一个人无法全面地展现，就必须拓展，传主再加上其他的人、事、物，点面结合，就可以更全面、更深刻地表现主题。4.增强表达效果增强文章的文学色彩；让人产生丰富的想象，发人深省，耐人寻味；等等。直接引用大量原始材料，可以更好地突出人物的特点，揭示人物的精神面貌，对人物作出客观公正的评价。在传记中，引用主要包括以下几个方面：引用内容引用效果直接引用可以增加作品真实性，更好地突出人物的特点，揭示人物的精神面貌，对人物做出客观公正的评价。引用诗词可以从侧面烘托和丰富传主的思想精神，使传记显现出一种古朴文雅的风格。引用故事可以增强文章的趣味性，使文章更具有可读性。引用传主在书信、日记中的表白以及传主的话可以印证作者的观点，也可以使传记具有更为真实感人的力量。引用他人的话使文章对人物的评述更加全面客观、真实可信，也能从侧面烘托传主的形象。阅读下面的文字，完成后面的题目。[即学即练]朱启钤：“被抹掉的奠基人”林天宏①2006年6月13日下午，一场大雨过后，正阳门箭楼被带着水雾的脚手架包裹得严严实实。北京旧城中轴线上的这座标志性建筑，正经历着新中国成立后规模最大的一次修缮。②由正阳门箭楼北望，长安街车水马龙，它与城楼左右两侧的南北长街、南北池街，一同构成了北京旧城东西、南北走向的交通要道。③我问同行的一个记者：“你知道改造北京旧城，使其具有现代城市雏形的第一人是谁？”“梁思成？”她答道。④这个答案是错误的，却并不让人意外。随着北京旧城改造不断进入媒体视野，梁思成等一批建筑学家已被大众熟知。但少有人知晓的是，从1915年起，北京已开始有计划地进行市政工程建设，正阳门箭楼、东西长安街、南北长街与南北池街，都是在时任内务部总长朱启钤的主持之下改造与打通的。⑤同样少有人知晓的是，1925年，25岁的美国宾夕法尼亚大学留学生梁思成，收到父亲梁启超从国内寄来北宋匠人李诫撰写的《营造法式》一书，兴趣大增，由此走上中国古代建筑研究之路。1930年，梁思成加入中国营造学社，在那里撰写了《中国建筑史》，成为建筑学一代宗师。而《营造法式》一书的发现者与中国营造学社的创始人，正是朱启钤。⑥“朱启钤是中国古建筑研究工作的开拓者与奠基人，没有他，就不可能在上个世纪30年代出现像梁思成这样的建筑学领军人物，我们读到《中国建筑史》的年份，还不知要推迟多少年。”中国文物研究所某研究人员曾这样评价。但是，“由于历史原因，他被研究者们有意无意地抹掉了”。⑦朱启钤于1930年创办的中国营造学社，将他的筹划与组织才能发挥得“淋漓尽致”。他为学社请来当时最为优秀的学术精英：东北大学建筑系主任梁思成，中央大学建筑系教授刘敦桢，著名建筑师杨廷宝、赵深，史学家陈垣，地质学家李四光，考古学家李济……他还以其社会人脉，动员许多财界和政界人士加入学社，直接从经费上支持营造学社的研究工作。曾有建筑史家这样评价朱启钤：“人力、物力、财力，这些都是研究工作所必不可少的条件，能把这方方面面的人事统筹起来，是需要非凡之才能的。朱启钤以一己之力，做了今天需要整个研究所行政部门做的事。”⑧有数据显示，截至1937年，营造学社野外实地测绘重要古建筑达206组，因此探索出一整套研究中国古建筑的科学方法，为撰写中国建筑史构建了扎实的科学体系。⑨假若没有朱启钤，中国的古建筑研究，又会是怎样的图景？如今，斯人已逝，营造学社停办也已整整60周年。⑩6月13日的那场大雨，将故宫端门外西朝房冲洗得干干净净。游人如织，屋宇间却依旧透着落寞，此处正是营造学社旧址。而位于东城区赵堂子胡同3号的朱启钤故居，住着数十户人家，杂乱之中，依稀可辨当年气魄。(摘自2006年6月21日《中国青年报》，有删改)【注】朱启钤(1872—1962)，曾任全国政协委员、中央文史馆馆员。★2.文章多处提到梁思成，这对写朱启钤有什么作用？请选一例作简要分析。答：______________________________________________解析结合文章第③⑤⑥段进行分析，写梁思成主要是从侧面表现朱启钤，让读者对传主有一个全面的、立体的了解。答案文章通过对梁思成有关事迹的叙述，或直接或间接地写出了朱启钤对我国古建筑研究的重要贡献。所选事例及分析：第③段，文章写记者认为改造北京旧城第一人是梁思成，间接说明朱启钤不为人所熟知，点明题意，引出下文。第⑤段，梁思成因《营造法式》一书而走上中国古代建筑研究之路，加入中国营造学社，在中国建筑学界有很高的地位；而《营造法式》一书的发现者与中国营造学社的创始人就是朱启钤，这间接反映出朱启钤鲜为人知的贡献，照应题目。第⑥段，点明如果没有朱启钤，就不可能在上个世纪30年代出现像梁思成这样的建筑学领军人物，直接突出朱启钤的贡献。★3.作者为什么两次提到6月13日那场大雨？请谈谈你的看法。答：________________________________________________解析文章两次提到大雨分别在第①段和最后一段。应注意从内容、结构和表现人物主题等角度进行分析。开篇写雨是为了引出人物，结尾写雨是为了营造落寞氛围，首尾照应，使文章浑然一体，有力地表现了传主。答案①文章开头写雨中正阳门箭楼的修缮，引出朱启钤1915年就开始有计划地进行北京市政工程建设(或：现代北京旧城仍保留了朱启钤当年规划的格局)。②结尾的雨引出营造学社旧址的落寞和朱启钤故居成为大杂院的情况，照应文题，引发读者的联想和感慨。③首尾呼应，结构完整。开头写正阳门箭楼的修缮，结尾写营造学社的旧址故宫端门外西朝房的落寞、朱启钤故居的杂乱，两者通过“雨”联系在一起，抚今追昔，深化了“不要忘记这位奠基人”的主题。[思维建模]分析传记表现手法及作用4角度1.传主角度：使人物形象更丰满，突出传主的精神面貌，增强作品的历史深度和情感力度。2.文本角度：丰富文章内容，增强文章的真实性、可读性、典雅性、文化底蕴。3.结构角度：照应标题，设置悬念，埋下伏笔，对比映衬，总结上文，深化主旨，彰显品格。4.读者角度：有助于读者全面深刻地了解传主的精神和影响，提升传记的阅读价值。答题模板：特点＋作用①＋作用②＋作用③分析传记的表现手法☞咀嚼经典高考题目提升审题答题技能高考曾经这样考品答案，悟技巧，不丢分1.(2013·福建卷)13题D项：文章最后一段描写了王文显旧居周边的环境与情景，营造了肃杀悲凉的氛围，表达了作者对王文显的深切怀念与沉痛哀悼。(×)(《那一种遥远的幽默》)本选项考查传记中的描写手法及其作用。文中的描写意在表现王文显当年的住处如今已发生巨大变化，并非“肃杀悲凉”，表达的情感是“深切怀念”而非“沉痛哀悼”。(错误选项，2分)2.(2011·广东卷)请分别指出文中③④段画线部分所用的修辞手法，并具体说明这些修辞手法在文中的表达效果。(1)他走路比汽车或者比飞机还快。(2分)(2)对于他，辩论简直是练武术，手、腿、头、眼、身一齐参加。(2分)(《梁宗岱先生》)(1)夸张手法。(1分)突出了梁宗岱善于跑路，有强健的体格。(1分)(2)比喻。(1分)形象生动地写出了梁宗岱擅长且喜欢辩论，辩论的技巧出众，辩论时激情洋溢的性格特点。(1分)3.(2011·湖北卷)本文细节描写十分精彩，请举两例加以评析。(6分)(《才子赵树理》)①他在一篇稿子的页边批了一行字：“排版，校对同志请注意，文内所有‘你’字，一律不准改为‘妳’，否则要负法律责任。”赵树理在一个寻常字眼的使用上，不盲从，并郑重其事地在文稿中批字强调，凸显赵树理较真、坚持己见的性格。②老赵划拳与众不同，两只手出拳，左右开弓，一会儿用左手，一会儿用右手。赵树理不循常规，以出其不意的方式划拳，别具一格，意趣横生。这个细节描写体现赵树理幽默风趣的真性情，以及他和老舍之间的深厚感情。(每点3分)一、品悟经典课文：《贝多芬：握住命运的咽喉》以本为本，知能迁移——从教材中寻求解题突破[经典聚焦]手法运用作用及效果精雕细刻肖像烘托传主个性，为写命运做铺垫。大量的内心独白细腻地展示传主内心情感，直接体现人物精神，使文章具有真实感。引用传主书信直接展示传主精神，增强感染力。他人的话从侧面突出传主性格，使作者的评述更加客观全面、真实可信。对比以传主一生的种种不幸突出其性格的坚忍执着。以与歌德交往相处不和谐突出传主倔强的个性。叙述中插入议论抒情表明作者的观点态度，深化作品的主题，使作品更加真实深刻、更具表现力。细节描写：陌生的手替他阖上眼睛暗示不认识他的人也无比崇敬，表现贝多芬的伟大。二、重温经典手法1.本文是一篇由传主本人口述的自传，文章的语言有什么特点？请举例说明。《毛泽东：忆往昔，峥嵘岁月稠》答：_______________________________________________【提示】本文语言朴实，用词巧妙，富有特色。作为党的领袖和政治家，毛泽东在叙述经历的过程中，把革命斗争中一些常用的政治术语融入家庭琐事的描述当中，使文章语言形象、生动而幽默。如：①“我的不满增加起来了，辩证的斗争在我们的家庭中不断地发展着。”反映了毛泽东的叛逆精神，而且体现了他反抗意识的不断提高。②“在这个情形之下，双方互相提出要求，以期停止‘内战’……”“内战”通常指国内各军阀之间的战争。这件事体现了毛泽东在反抗父亲时已经开始采取一定的策略，与父亲交换条件，来达到自己的目的，从而获取胜利。这种策略性的反抗也反映在毛泽东后来的革命斗争中。2.本文第一人称的叙述方式有什么好处？《毛泽东：忆往昔，峥嵘岁月稠》答：______________________________________________【提示】事件更真实可信；自传贴近人物心灵，字里行间流露着自然、亲切与真实，传主在回忆中叙述饱含情感，易打动人，拉近了读者与文章的距离；语言个性色彩更浓厚，所叙事情多含自谦意味。3.本文的细节描写很多，试找出两三例与传主逃学有关的细节描写，并说说它们的作用。《沈从文：逆境也是生活的恩赐》答：______________________________________________【提示】(1)逃学的细节：①关于小孩子打架的细节；②关于爬山、翻筋斗的细节；③关于划船的细节；④关于下河洗澡的细节；⑤关于赶场集的细节。(2)这些细节描写，把传主逃学中所经历的人和事生动形象地展示出来，使读者在“饱览”了如此丰富多彩而又新鲜的生活的同时，可以深刻地领略大自然和社会生活对作者的人生观所产生的巨大影响，体会到“大书”的博大精深、奥妙无穷。4.作者为什么从杨振宁获诺贝尔奖及其在颁奖仪式上的演讲写起？《杨振宁：合璧中西科学文化的骄子》答：______________________________________________【提示】①一上来就抓住读者要急于了解杨振宁何以会获此大奖的心理；②通过演讲的内容透出杨振宁的自豪，点出了杨振宁获奖的原因；③紧紧扣住题目“杨振宁：合璧中西科学文化的骄子”。阅读下面的文字，完成1～2题。[训练提升]不朽的贝多芬罗曼·罗兰①在大风雨中，大风雪中，一声响雷中，1827年3月26日，贝多芬咽了最后一口气，一只陌生的手替他阖上了眼睛。②贝多芬！多少人颂赞他艺术上的伟大。但，贝多芬远不只是音乐家中的第一人。他是近代艺术的最英勇的力。对于一般受苦而奋斗的人，他是最大、最好的朋友。当我们对世界的劫难感到忧伤时，他会到我们身旁来，好似坐在一个穿着丧服的母亲旁边，一言不发，在琴上唱着他隐忍的悲歌，安慰那哭泣的人。当我们斗争到疲惫的辰光，到这意志与信仰的海洋中浸润一下，将获得无可言喻的裨益。③贝多芬分赠我们的是一股勇气、一种奋斗的欢乐。他在《致不朽的爱》一信中有言：“当我有所克服的时候，我总是快乐的。”《致韦格勒》一信中又说：“我愿把生命活上千百次……我非生来过恬静的日子的。”他还分赠我们一种感到与神同在的醉意。他仿佛在和大自然不息的沟通之下，竟感染了自然的深邃的力。申德勒说：“贝多芬教了我大自然的学问，在这方面的研究，他给我的指导和在音乐方面没有分别。使他陶醉的并非自然的律令，而是自然的基本威力。”格里尔巴策对贝多芬钦佩之中含有惧意，在提及他时说：“他所到达的那种境界，艺术竟和犷野与古怪的元素混合为一。”舒曼提到《第五交响曲》时也说：“尽管你时常听到它，它对你始终有一股不变的威力，有如自然界的现象，虽然时时发生，总教人充满着恐惧与惊异。”贝多芬的密友申德勒赞叹：“他抓住了大自然的精神。”——这是不错的：贝多芬是自然界的一股力；一种原始的力和大自然其余的部分接战之下，便产生了荷马史诗般的壮观。④贝多芬的一生宛如一天雷雨的日子。——先是一个明净如水的早晨，仅仅有几阵懒懒的微风，但在静止的空气中，已经有隐隐的威胁、沉重的预感。然后，突然之间巨大的阴影卷过，悲壮的雷吼，充满着声响的、可怖的静默，一阵复一阵的狂风，有如《英雄交响乐》与《第五交响乐》。然而白日的清纯之气尚未受到损害。欢乐依然是欢乐，悲哀永远保存着一缕希望。但自1810年后，心灵的均衡丧失了。目光变得异样。最清楚的思想，也看来似水气一般在升华：忽而四散，忽而凝聚，它们的又凄凉又古怪的骚动，罩住了心；往往乐思在薄雾之中浮沉了一两次以后，完全消失了，淹没了，直到曲终才在一阵狂飙中重新出现，即是快乐本身也蒙上苦涩与犷野的性质。所有的情操里都混合着一种热病、一种毒素。贝多芬1810年5月2日致韦格勒书中有言：“噢，人生多美，但我是永远受着毒害……”黄昏来临，雷雨也随着酝酿。尔后是沉重的云，饱蓄着闪电，把黑夜染成乌黑，夹带着大风雨，那是《第九交响乐》的开始。——突然，当风狂雨骤之际，黑暗裂了缝，夜在天空被赶走，由于意志之力，白日的清明重又还给了我们。⑤什么胜利可和这场胜利相比，波拿巴的哪一场战争，奥斯特利茨(系拿破仑1805年12月大获胜利之地)哪一天的阳光？曾经达到这种超人的努力的光荣？曾经获得这种心灵从未获得的凯旋？一个不幸的人，贫穷，残废，孤独，由痛苦造成的人，世界不给他欢乐，他用他的苦难来铸成欢乐，好似他的那句豪语所说的——那是可以总结他一生、可以成为一切英勇心灵的箴言——“用痛苦换来欢乐”。(选自《贝多芬传》，傅雷译，译林出版社2000年版)1.文章开篇写了贝多芬去世时天气的恶劣和“陌生的手替他阖上了眼睛”这一细节，有何作用？请分别说明。答：_______________________________________________答案①描写贝多芬去世时天气恶劣，象征贝多芬一生遭受的苦难(或：渲染沉痛悲伤的氛围)。②暗示贝多芬不认识的人也对他无比崇敬，表现贝多芬的伟大。2.这篇评传中，作者多处引用贝多芬书信中的原话和他人的评语，简要分析这样引用的作用。答：______________________________________________答案①引用传主的原话，直接展示传主的精神，增强了感染力，也为作者的评述提供了依据。②引用他人的话，使文章对人物的评述更加全面、客观、真实可信，也能从侧面塑造传主的性格。③二者与作者的评述相结合，有助于读者全面而深刻地了解传主的精神和影响(提升了传记的阅读价值)。BYFAITHIMEANAVISIONOFGOODONECHERISHESANDTHEENTHUSIASMTHATPUSHESONETOSEEKITSFULFILLMENTREGARDLESSOFOBSTACLES.BYFAITHIBYFAITH谢谢观看/欢迎下载肾上腺素受体激动药(adrenoceptoragonists)*又称为:拟肾上腺素药(adrenomimeticdrugs)拟交感胺类药物(sympathomimeticamines)一、构效关系*肾上腺素受体激动药的基本化学结构为-苯乙胺，-苯乙胺由三部分组成：苯环、碳链、氨基。2023/7/231.儿茶酚胺(catecholamines)属儿茶酚胺的药物有：肾上腺素、去甲上腺素、异丙肾上腺素、多巴胺。2.非儿茶酚胺属非儿茶酚胺的药物有：间羟胺、麻黄碱、甲氧明、苯肾上腺素(新福林）。1502023/7/233.儿茶酚胺的结构与药物作用强、弱及时间长、短有关。儿茶酚胺药物作用强，维持时间短，易被COMT灭活；非儿茶酚胺药物作用弱，维持时间长，不易被COMT灭活。COMT:儿茶酚氧位甲基转移酶4.碳原子上的氢被-CH3取代后，不被MAO灭活，作用时间长，易被神经末梢摄取，并促进递质释放。如间羟胺、麻黄碱。MAO：单胺氧化酶1512023/7/235.胺基上的氢被不同基团取代后，药物对、受体选择性产生改变。如H原子被-CH3取代后，为肾上腺素，对1受体有活性。H原子被异丙基取代后，为异丙肾上腺素，对1、2受体有活性，对受体无活性。152受体激动药肾上腺素受体激动药，受体激动药受体激动药2023/7/23二、分类1532023/7/23

受体激动药去甲肾上腺素(noradrenaline,NA;norepinephrine,NE)[体内过程]本品口服不吸收，在碱性肠液中易破坏；不宜皮下及肌肉注射；也不宜静脉注射，一般采用静脉滴注给药。1542023/7/23[药理作用]作用机制：对受体具有强大的激动作用对1受体激动作用较弱对2受体无作用激动突触前膜2受体，负反馈抑制NA的释放。1552023/7/231.血管激动血管1受体,使血管收缩,主要是小动脉、小静脉血管收缩。血管收缩强度顺序：皮肤、粘膜血管肾脏血管脑、肝、肠系膜血管骨骼肌血管1562023/7/23冠状血管舒张，血流量增加:(1)心脏兴奋，心肌代谢产物腺苷增加，腺苷具有很强的冠状血管舒张作用。这是由于心脏兴奋后，代谢加速，局部组织O2分压降低，心肌细胞内的ATP分解成ADP和AMP5`-核苷酸酶腺苷。(2)血压升高，提高了冠脉灌注压力。(3)激动突触前膜2受体。1572023/7/232.心脏激动心脏1受体，心肌收缩力加强，心率加快，传导加快，心输出量增加。大剂量可引起心率失常。3.血压小剂量NA兴奋心脏，收缩压升高，血管收缩不明显，舒张压不变，脉压差变大。大剂量收缩压和舒张压升高，脉压差变小。1582023/7/23[临床应用]1.休克2.药物中毒性低血压，如氯丙嗪引起的体位性低血压。3.上消化道出血[不良反应]1.局部组织缺血坏死2.急性肾功能衰竭1592023/7/23

间羟胺

(metaraminol;阿拉明,aramine)为人工合成品作用机制：1.直接作用于1受体和1受体。1受体作用较弱。2.间羟胺可被肾上腺素能神经末梢摄取，进入囊泡，置换囊泡中的NA，促进NA释放。1602023/7/23作用特点：1