核酸分离提取技术教学课件

核酸分离提取技术31、园日涉以成趣，门虽设而常关。32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月扬明辉，冬岭秀孤松。35、丈夫志四海，我愿不知老。核酸分离提取技术核酸分离提取技术31、园日涉以成趣，门虽设而常关。32、鼓腹无所思。朝起暮归眠。33、倾壶绝余沥，窥灶不见烟。34、春秋满四泽，夏云多奇峰，秋月扬明辉，冬岭秀孤松。35、丈夫志四海，我愿不知老。植物分子生物学实验技术主要内容第一部分核酸的分离制备第二部分PCR技术第三部分主要分子标记第四部分基因克隆中国古典哲学思想是世界思想文化宝库中的一支奇葩，它的深邃和睿智至今仍然在人们的社会、工作、生活中发挥着巨大的作用。高校的思想政治课教学作为大学生思想政治教育教学的主阵地，更应注重对中国传统文化的传承，深入挖掘中国古典哲学思想中的德育素材，研究其当代价值。通过创立“五大模块教学体系”、创建个性化与生活化的思政课教学的新模式，建构参与式、思辨式、开放式的学习方法体系，引入过程性评价和实践性评价的考核评价体系，对大学生进行人生观教育、感恩与诚信教育、理想信念教育和创新教育等，从而进一步丰富思想政治教育的内容，从实践上深化了思想政治课教法的改革。一、弘扬传统文化、创新教育理念中国古典哲学思想是中华民族在长期的历史发展过程中所沉淀下来的精神文明成果，是中国传统文化的精髓。其中不仅蕴涵着丰富的人生哲理，同时又十分注重道德修养和教育方法，强调道德践行，并作为道德传统世代相承。当前在社会主义市场经济体制下，人们的思想意识、价值观念日趋多元化和复杂化，这就对当代大学生的思想政治教育提出了新的要求。因此，我们应以文化建设为引领、内涵建设为核心、实用创新为重点，继承中国古典哲学思想的精髓，以人文性、民族性、发展性的高校思想政治教育理念为依托，来弘扬中国的传统文化，使大学生成为中国古典思想的继承人，成为中国传统文化的传承者。二、建立模块体系，研究当代价值。在课堂教学中将古典哲学思想融入思想政治课“两课”教学中，将原有的内容体系优化整合成“人生观教育”、“和谐观教育”、“实践观教育”、“发展观教育”和“创新观教育”等“五大模块内容体系”，从古典哲学思想这一独特视角，丰富了教学内容，开拓了学生视野。1、重视人的价值与当代大学生人生观、道德观、理想观的教育。儒家的道德理想倡导高尚的人格信念和坚守的人生信念，给人以深刻的思想和道德的启迪，具有陶冶情操、修养道德的功效，研究其当代价值可以帮助大学生追求人生的价值、树立正确的理想信念。通过开展“认识你自己”的课内研讨会、“放飞理想翅膀”专题演讲会、“品国学经典、扬爱国豪情”的诗歌朗诵会等形式对学生进行理想教育、爱国教育、人生观教育，使学生树立正确的人生观、世界观。2、孔子仁学思想与平等、互助、和谐社会关系的建立。“仁”是孔子伦理道德思想的核心，其“仁者爱人”思想，在规范人与人、人与社会、人与自然的关系中发挥了及其重要的作用。在教学中将这一思想融入到对大学生进行爱国教育、感恩教育、诚信过程中，通过开展“忠心献祖国、诚心献社会、爱心献他人、孝心献父母、信心献自己”的“五心”教育等活动；建立“学生诚信档案”制度，与学生签订了诚信考试、诚信应聘与就业等承诺书，为建立平等、诚信、互助、和谐的人际关系及稳定、良好的社会秩序提供基础和保障。3、知行合一的认识论与大学生的实践观。知和行，是中国哲学的一对重要范畴，而做到知行合一就是做到认识和实践的统一。在教学中，将古代哲人的这一思想融入到认识论的教学中，通过“我身边的哲学”、“哲理与生活”等内容，促进知行合一，把大学生的思想道德教育融入于学习生活、社会实践和校园文化活动中，使学生在参与中受教育、长才干、得提高，做到知行统一，才能真正使大学生思想道德教育发挥实效性。4、老子“天人合一”、“无为”思想与科学发展观在教学中，借鉴老子“天人合一”的思想中所蕴涵的唯物辨证的智慧精髓，来讲解当前的以人为本，全面、协调、可持续的科学发展观，使特色理论增加了文化底蕴，夯实了教育基础，同时又弘扬了传统文化。三、创新教学模式，提高综合能力中国古典哲学思想与思想政治课教学的整合，其目的是为培养适应二十一世纪的创新型人才、促进学生的全面发展与终身发展。这就要在思想政治课教学中构建全新的、立体的、长效的教育创新模式，提升思想政治教育的针对性与实效性。为此，在遵循教育发展规律的基础上，打破思想政治教育的传统模式，创建个性化与生活化的思想政治教育的新模式，让学生在具体人物的思想个性的框架中获得一种独立思考的空间，将课堂上内化的认知外化为良好行为，并贯穿于学生成长的全过程。通过教学实践总结出来以“听、讲、看、练、做、传”为主要内容的“个性化”、“生活化”的教育模式，即：在课堂教学过程中，学生通过“听”与“讲”，将课程内容进行内化，形成认知；在教育见习、实习活动中，通过“看”与“练”，达到情感升华；在社会实践活动中，通过“做”使学生在参与中受教育、长才干、得提高，做到知行统一；最后，在顶岗实习和自己的职业岗位上，通过“传”做到身体力行、身先士卒，做好传帮带。突出了教学的实效性，体现了开放式教学的特色，发挥思想政治教育的全方位、长期性的功效。同时，在课堂教学中还通过开展专题式教学、讨论式教学、实践式教学和活动课教学，探索出“探究式教学模式”、“愉悦式教学模式”、“生活性教育模式”，构建了将学生被动接受式学习转变为参与式、思辨式学习的“实践体验教学法”、“专题讨论教学法”、“开放式学习法”等多种教学法，提高课程教学的实效性、针对性，促进学生综合能力的提高。四、改革评价体系，培养从业素质。在思想政治教育教学中，学习成绩评价是检查学生学习效果的重要途径。传统考核评价方式偏重知识掌握，考的是学生的“背功”、“应试技巧”，过分注重知识掌握，而学生的综合素质和能力则无从评价。因此，构建学生综合考评体系是思想政治教育教学改革中的重要环节。在改革过程中，创建了过程评价和结果评价相结合、学生实践活动和理论学习相结合、学生社会实践、教育见习实习反馈信息与用人单位跟踪调查结果相结合的的综合评价体系。通过建立学生实践考核档案，对学生的校内学习、校外实践及就业后的反馈，即对学生的“听、讲、看、练、做、传”进行全方位、长期性的考核和记录。在教学过程评价中，创建了课堂讨论评价法法、作业评价法、参观体会评价法、社会调查评价法等评价方式。在考核过程中，教师着眼于学生思想道德水平的提高和综合实践能力的发展，侧重培养学生的人品素质、文化底蕴素质、专业技能素质和从业综合素质。有利于课堂教学的优化与实践活动的开展，也能真实地测试出思想政治教育的实际效果，以多样化的评价方式激发学生兴趣，使教师和学生形成互动，实现教与学的双赢。总之，通过中国古典哲学思想的传承来推进高校思政课教学模式的改革，对于当前加强大学生的思想政治教育、弘扬中华民族的传统文化、构建社会主义和谐社会、进而全面推进中国特色社会主义事业具有重要的意义。引言“科学是第一生产力”，“科技要发展，人材是关键”因此努力办好和发展农村教育，为科技兴农培养各类专业技术人材，就成为重视农业、支援农业，振兴农村经济的一个十分重要的问题。1提高办好农机成人教育意义的认识中国的农村，是办学的广阔天地，面向农村办学发展农村各类技术专业教育是成人教育发展和改革的一项战略任务，实践证明，“经济要上去，必须抓教育；教育上不去，富民无根基”。无论过去，现在和将来，若要改变贫穷面貌，增加工农业生产后劲，提高劳动者素质是关键。县级农机校自成立以来，为农村及其它行业培养了大量的各类技术专业人材，有很多人现已成为农机战线及其它战线的骨干和领导，为发展农业振兴农村经济做出了很大贡献。2目前农村的特点及农民对教育的基本要求县级农机校主要培训目标就是面向农业，面向农村，面向千家万户，为了搞好农机校的培训工作，首先必须了解现阶段农村的特点及农民对教学的基本要求，这样才能使教学工作有的放矢。2.1现阶段农村的特点2.1.1文化层次低，生产方式落后我国农村人口多，底子薄，经济、文化、科技落后，全国文盲2.2亿人，农村占90%；乡以下有文化的人主要是读过中小学的人，消化、运用先进科学技术的能力很差，严重地阻碍了科学技术流向千家万户。文化低、生产方式落后是实现农业现代化的最大困难，所以农村技术教育亟待解决。2.1.2劳动强度大，交通不方便中国的农民长期以来都是日出而作,日落而归,虽然随着农村经济体制改革与发展,机械化水平不断地提高,劳动力有所解放,劳动强度有所降低,生产方式有所改进,但由于农业生产和农村生活习惯长期形成的特点，闲暇时间和劳动时间的界线仍然交叉，加上农村人口居住分散，交通不便等情况，对在农村办学的组织形式，时间安排教学活动等提出了不同于城镇教学的特点。2.1.3农业生产的季节性，地域性和专业性由于农业生产的春种、夏管、秋收、冬贮明显的季节性，导致农村生活，劳动和一些社会活动的不同要求，造成了人们活动的交叉性和不能统一活动的状况，给面向农村办学的系统化，集中化和规范化带来很大困难。2.1.4农民知识结构的特点现阶段我国农民的知识结构主要是生产经验的知识系统和生产技术的知识系统两大类。而农民在农村经济活动中表现为生产经验化的倾向。诚然，劳动人民在长期的生产实践中积累了丰富的生产经验，为我国农业发展做出了不可磨灭的贡献，但这种经验知识，长期为农民所信赖而导致一种“惰性”，只满足于现有生产经验，而不愿接受新的科学知识，所以他们对学习科学知识缺乏紧迫感。2.2农民对技术教育的基本要求随着农村改革的不断深入，农村生产结构发生了巨大变化，商品生产迅速发展，传统农业正朝着现代化的农业过渡，这就要求广大农民必须掌握大量科学技术知识和生产技能。而农民学习科学技术知识讲求实用，如果传授的技术知识与他们的实际生产无关或关系不大，那么他们就认为你卖的是“狗皮膏药”而不买你的“帐”实用的技术知识对于农民来说，他们是迫切需要的，凡是他们需要的知识，都要求个“快”字，这就要求农民教育不但要讲实用，而且还要注重速成，通过十多年农机教育工作的实践和长期与广大农民接触，了解到农民技术教育的一些要求，归结起来，主要有以下几点：一是时间要短。通常，农民的时间观念在其他工作和活动中较为淡薄，而在学习中却十分注重。时间一长就坐不住，听不进，感到厌倦，因此对农民技术教育的学习必须讲究时间效益。二是内容要实，农民讲实惠，求实效，希望学习起来立竿见影，所以学校办班要因地、因时、因人制宜地传授技术知识，使学员学到的知识能解决生产实践的需要，达到学以致用并产生经济效益。三是教材要精。农民教育的教材要短小精悍，通俗易懂，图文并茂，集知识性、趣味性于一体。四是理论要浅。高深的理论农民不易接受，讲课必须做到深入浅出，浅中求实，浅中求深，尽量化抽象为具体，化概念为形象。五是方法要活，教学应根据不同的对象不同的内容采取不同的方法，不同的教学手段。六是形式要多，教学不仅仅满足于课堂教学，要根据教学的需要，随时把课堂搬到田间地头，或实验场地，实习车间等，尽量以现身说法，使学习内容看得见，学得懂。七是辅导要勤，农民教学，不能上完课了事，应注重经常性的辅导，经常深入到学员中去，辅导其实践，面对面的解决一些生产中的具体问题。3农机成人中等教育学校教学管理3.1农机成人中等教育学校不同于普通学校普通学校有相对稳定的生源，师资、经费、教材和一整套互相衔接的组织机构，规章制度，升学，就业的渠道等，一系列相应措施，而农机成人学校则不然，它生源不稳定，内容不稳定，教材不稳定等等，如果我们也采用普通学校的形式，内容等进行教学，就丢掉了自己的特点，丧失了自身的优势，取消了自身存在的价值。所以，县级农机校办学就应因地、因时、因人制宜，开展多形式，多类别，多层次的培训，采取灵活多样的教学方法，充分发挥机校自身的优势，为农业、农村、社会培养更多更好的技术人材。3.2农机成人中等教育结构农机成人中等教育结构应该是：学校领导者善于利用成人教育内部要素正体性和相关性，努力构造一个相邻要素互为作用，彼此制约，功能齐全，立体交叉的教育结构。从教育内容上看：科学文化、业务技术、政治思想、社会文化生活教育并举；知识传授与技能培训并举；基础教育与专业教育并举。从教育形式上看：业务技术教育与岗位培训结合，系统教育与应急培训相结合，业余与脱产，半脱产相结合，以校为主，校乡结合，以农机培训为主，系统内外相结合。从学习时间上看：以短训为主，长短结合，力求实效速成。从教学方法看：课堂面授与函授，广播讲座、音像教学相结合，集中和分散自学，个别辅导相结合。从教育对象看：管理型人员和技术人员并举，职后与职前并举，在职与非在职并举。从教师队伍看：专、兼职并存、互相补充。学校教学系统结构可分为三个方面，第一方面，包括教学目的和任务，农机成人学校培养目标主要是为当地经济建设，农机系统培养所需的各类专业技术人材，为当地经济建设和振兴农村经济服务，第二方面主要是教学内容，包括专业设置，教学计划和教学大纲，教材等，这是教学目的，教学任务的具体化。第三方面，包括教学方法，教学形式，教学手段等，是保证教学内容的传输和教学目的，任务完成不可忽视的要素。3.3通过多种途径全面发展学员的智力一个人在实践中怎样发现问题，分析和解决问题，是由他的综合智力水平决定的，因此学校在教学中要注意全面发展学员的智力，通过各种途径培养高度的注意力，深刻的观察力，严密的思维力，非凡的记忆力，丰富的想象力，提高整体智力水平。加强学校与社会各业务部门的联系，有计划的组织学员参加社会实践活动，在条件允许情况下，让学员承担一定的实际任务，以提高学员的独立思考，判断、分析、解决问题的能力。强化技能训练，智力和技能是成正比的，智力的强弱制约着技能的高低，同时智力的巩固与发展又离不开技能的训练，为此学校要把训练、学习、实验等技能训练纳入教学计划，并广泛开展课外活动。活跃学习风气，从不同角度扩大学员视野，从而提高技能水平。植物分子生物学实验技术主要内容第一部分核酸的分离制备第二部分PCR技术第三部分主要分子标记第四部分基因克隆参考书目:三〔美)DvekslerGsandDieffenbachCW,黄培堂俞炜源陈添弥等译现代生物技术译从PCR技术实验指南科学出版社三(荚)ClarkMS主编顾红雅瞿礼佳主译植物分子生物学实验手册高等教育出版社施普林格出版社三三郑成木主编植物分子标记原理与方法湖南科学技术出版社Brownta.魏群等译国外优秀生命科学教材译从基因克隆和DNA分析高等教育出版社3第一部分:核酸的分离制备uu日第一部分:核酸的分离制备1.DNA在分子生物学研究中的重要性DNA提取是一切分子生物学研究最基础的技术,高质量的DNA是用于PCR和酶切分析等系列后续操作的重要保证发展了多种DNA提取方法,可从植物叶片、愈伤组织、组培苗、果实、韧皮部等多种组织器官中提取DNA;但不同植物、同种植物材料的不同来源、部位、形态以及不同化学成分、组织结构特点差异,导致DNA提取时需要选择不同的方法或作一些特殊处理从富含多糖、多酚、单宁、色素及其他次生代谢物质的木本植物中提取DMA的方法难度就相对大于大多数禾谷类及蔬莱类植物(1)多酚被氧化成棕褐色(2)多糖、单宁等物质与DNA会结合成粘稠的胶状物,获得的DNA常出现产量低、质量差、易降解,影响了DNA质量和纯度,不能被限制性内切酶酶切,严重的甚至不能作为模板进行PCR扩增2.提取DNA应满足的基本原则不同的研究对DNA的要求不一致,但一般应满足(1)排除蛋白、糖类和脂类等物质的污染,DNA纯度应满足下游操作需要用于RFLP、AFLP应满足酶切要求用于PCR的不含PCR的千扰甚至抑制物(2)所得DNA应当完整电泳检测得到清晰、完整、可重复、无降解的条带保证DNA一级结构的完整(3)足够量的DNA有的实验要求量多(标记)3.基本原理1)破坏(消化)细胞壁、释放内容物在破壁时也会剪切DNA,在完整性和产量间折衷考虑分离总DNA破壁方法液氮中快速冷冻、研磨成细粉末三分离核DN或细胞器DNA破壁方法更温和的方法、以免过早破坏内膜系统、含渗透剂的缓冲液4℃C匀浆」(2)破坏细胞膜使DNA释放到提取缓冲液中通常靠SDS或CTAB去污剂来完成,保护DNA受核酸内源酶降解缓冲液通常含EDTA,可螯合大多数核酸酶所需要的辅助因子镁离子三4.基本步骤1)植物材料的采集及前处理尽可能使组织材料保持水分而保鲜(用湿纱布包襄,放置于密闭的冰盒等)野外远距离采集样本时,尽可能采用冷冻保存(如放置于液氮中)不具备冷冻条件时无水CaS04的瓶子分别保存使其迅速千燥,可将材料保存数月,返回后尽快提取DNA对具有大量次生代谢物(如丹宁、酚类、醌类等)的植物材料,尽可能采集幼嫩组织,冷冻保存、短时间内提取DNA植物组织化学保存法乙醇、丙二醇处理法导致DNA剧烈降解(不推荐)样品长期保存液氮处理后贮存在-80℃冰箱或直接储放于液氮中在与提取缓冲液接触前防止冰冻样品在空气中融化导致酚类易被氧化实验室发苗、田间取叶片(清洗去除灰尘、泥土以及茵孢子等)饥饿处理减少淀