抗生素知识培训培训课件

抗生素知识培训提纲

一、抗生素定义及分类二、微生物试验相关知识三、抗生素微生物检定法2抗生素知识培训第一部分：抗生素定义与分类抗生素：抗生素（antibiotics）是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物。（事实上它不仅能杀灭细菌，而且对霉菌、支原体、衣原体其它致病微生物和癌细胞等也有良好的抑制和杀灭作用）初级代谢：指生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动所必需的物质和能量的过程，称为初级代谢。次级代谢：某些生物为了避免在初级代谢过程某种中间产物积累所造成的不利作用而产生的一类有利于生存的代谢类型。3抗生素知识培训第一部分：抗生素定义与分类着抗生素研究工作的发展，抗生素可以是某些微生物生长繁殖过程中产生的一种物质，用于治病的抗生素除由此直接提取外；还有完全用人工合成或部分人工合成的。现在通常把经过化学改造的天然来源抗生或微生物代谢的其他产物，以低微浓度能够抑制或影响它种生物机能的化学物质通称为抗生素。因此现代抗生素的定义应当为：由某些微生物产生的化学物质，能抑制微生物和其他细胞增殖的物质叫做抗生素。

4抗生素知识培训抗生素的分类抗微生物药：一、β-内酰胺类：

（一）青霉素类包括青霉素钠、青霉素钾、氨苄西林、氨苄西林钠、海他西林、阿莫西林、阿莫西林钠、苯唑西林钠、氯唑西林钠、苄星氯唑西林、普鲁卡因青霉素、苄星青霉素等

（二）头孢菌素类包括头孢噻呋、盐酸头孢噻呋、头孢噻呋钠、头孢氨苄、头孢维星钠、硫酸头孢喹肟等。5抗生素知识培训二、氨基糖苷类：包括：硫酸链霉素、硫酸双氢链霉素、硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素、硫酸新霉素、盐酸大观霉素、硫酸大观霉素、硫酸庆大小诺霉素、硫酸安普霉素等。6抗生素知识培训三、四环素类：包括土霉素、盐酸土霉素、四环素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素等。7抗生素知识培训四、大环内酯类：包括红霉素、乳糖酸红霉素、硫氰酸红霉素、吉他霉素、酒石酸吉他霉素、泰乐菌素、酒石酸泰乐菌素、磷酸泰乐菌素、酒石酸泰万菌素、替米考星、泰拉霉素等。8抗生素知识培训五、酰胺醇类包括甲砜霉素、氟苯尼考等。9抗生素知识培训六、林可胺类主要有盐酸林可霉素、盐酸吡利霉素等。10抗生素知识培训七、多肽类包括硫酸黏菌素、杆菌肽锌、亚甲基水杨酸杆菌肽、恩拉霉素、维吉尼霉素、那西肽等。11抗生素知识培训八、多糖类包括阿维拉霉素、黄霉素等。12抗生素知识培训九、其他：

包括延胡索酸泰妙菌素、泰妙菌素、盐酸沃尼妙林、赛地卡霉素等13抗生素知识培训抗寄生虫药：一、抗蠕虫药（抗线虫药）

包括伊维菌素、阿维菌素、乙酰氨基阿维菌素、多拉菌素、越霉素A、潮霉素B等。二、抗原虫药（抗球虫药）包括莫能菌素、莫能菌素钠、盐霉素钠、拉沙洛西钠、甲基盐霉素、马杜米星铵、海南霉素钠、赛杜霉素钠等。14抗生素知识培训第二部分：微生物试验相关知识一、名称解释1.消毒（disinfection）：杀死物体上或者环境中病原微生物并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。2.灭菌（sterilization）：杀死物体上所有微生物的方法（病原微生物，非病原微生物）。15抗生素知识培训3.抑菌（bacteriostasis）：抑制人体内部或外部细菌生长繁殖的。4.防腐（antisepsis）：体外防止或抑制细菌繁殖的方法。5.无菌（asepsis）：不存在任何活菌。16抗生素知识培训6.无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。7.清洁：能减少微生物附着在无机物体表面的数量的方法。8.净化：能显著减少或破坏一定空间中微生物数量和生物活性的方法。17抗生素知识培训二、消毒灭菌方法：

1.物理消毒灭菌法

2.化学消毒灭菌法

3.生物学消毒灭菌法18抗生素知识培训1.物理消毒灭菌法

1）热力灭菌法①干热灭菌法②湿热灭菌法焚烧巴氏消毒法烧灼煮沸法干烤高压蒸气灭菌法红外线19抗生素知识培训湿热灭菌效果好于干热灭菌，原因如下：

①湿热情况下菌体蛋白容易凝固;②湿热穿透力比干热大；③湿热的蒸汽具有潜热。20抗生素知识培训2）紫外线原理：作用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个T共价结合形成二聚体，干扰DNA的复制和转录，导致细菌的变异和死亡。特点：①穿透力比较差。普通玻璃、纸张、尘埃等均可阻挡紫外线，因此它只适用于空气消毒或物体表面的消毒。②紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。21抗生素知识培训3）滤过除菌法4）超声波杀菌法5）干燥与低温抑菌法22抗生素知识培训2.化学消毒灭菌法

化学消毒剂：迅速杀灭病原微生物的化学药物。如：二氧化氯、戊二醛等。防腐剂：抑制病原微生物生长繁殖的化学药物。如：苯甲酸钠、山梨酸钾、脱氢乙酸钠等。化学治疗剂：用于治疗传染病的化学药物，可选择性地作用于细菌代谢不同环节，杀灭或抑制病原菌，对宿主无毒或很低，如异烟肼、无环鸟苷等。23抗生素知识培训3.生物学消毒灭菌法1）抗生素临床治疗2）细菌素为微生物代谢产物，破坏同源性细菌。3）噬菌体感染细菌、真菌、放线菌、螺旋体等微生物的病毒。4）中草药24抗生素知识培训三、影响消毒灭菌效果的因素

1.消毒剂的性质、浓度与作用时间

2.微生物的种类与数量

3.温度

4.酸碱度

5.有机物有机物可消耗消毒剂，降低消毒剂浓度25抗生素知识培训第三部分：抗生素微生物检定法一、概述：抗生素微生物检定法是利用抗生素在低微浓度下有选择地抑制或杀死微生物的特点，以抗生素的抗菌活性为指标，来衡量抗生素中的有效成分效力的方法。该方法是与临床要求相符，更能确定抗生素的临床医疗价值。26抗生素知识培训

抗生素微生物检定法分为稀释法、浊度法和琼脂扩散法（管碟法），每种方法的试验操作差别较大，但相同之处都是将标准和供试品两者的抗菌效力比较。稀释法：通过观察不同浓度的抗生素抑制试验菌的生长情况，从而测定抗生素最低抑菌浓度。常用于新药研制及临床药敏试验。27抗生素知识培训

浊度法：采用分光光度法测定不同浓度的抗生素抑制试验菌的生长情况（混浊程度），从而测定抗生素抑菌效力的方法。该方法国外使用较为普遍，而且快速（3-4小时），《中国兽药典》（2010年版）收载了方法，如庆大霉素、链霉素、红霉素、大观霉素、安普霉素、泰乐菌素。28抗生素知识培训

琼脂扩散法(管碟法）：

是使用固体培养基，在培养基凝固前，将试验菌混进去，采用一定的方法，将含有抗生素的物质与含菌的培养基表面接触。目前，国际上采用将抗生素加入到特定的小钢管中，使小钢管中的抗生素与培养基表面接触，此方法称为“管碟法”。经过培养后，由于抗生素不断向培养基中扩散，凡抑菌浓度能到达之处，试验菌不能生长，从而形成透明的抑菌范围，此范围一般都呈圆形，称为“抑菌圈”。29抗生素知识培训30抗生素知识培训二、管碟法材料、仪器及试剂的准备及基本要求

1、操作间：要求净化级别达到万级，安装紫外线杀菌灯，安装空调设备，能控制室温在20-25度之间。31抗生素知识培训2、双碟为硬质玻璃或塑料培养平皿，内径约90mm，高16-17mm，碟底厚度均匀一致。使用前应清洗干净后置150℃-160℃干热灭菌2小时或者121℃高压蒸汽灭菌30分钟。32抗生素知识培训3、陶瓦盖内径约103mm，外径108mm，平坦，吸水性强，应定期清洗、干燥。33抗生素知识培训4、钢管（牛津杯）每次使用后应置1：1000新洁尔灭溶液内浸泡2个小时以上，进行灭菌后再进行洗涤，在150℃-160℃干热灭菌2小时备用。使用同一批次的钢管。钢管内外壁要求清洁光滑，两端面应平坦光洁，管壁应厚薄一致，重量差异不超过0.05g34抗生素知识培训35抗生素知识培训5、钢管放置器：有全自动和半自动之分，一般为四孔，要求钢管下落时应垂直平稳、位置正确。应定期用75%酒精擦拭。如果没有钢管放置器，也可用干热灭菌过的镊子放置钢管。36抗生素知识培训37抗生素知识培训38抗生素知识培训39抗生素知识培训6、恒温培养箱：有隔水式、电热式。要求温度控制在35℃-37℃，隔板要求水平，用于细菌培养。40抗生素知识培训41抗生素知识培训42抗生素知识培训7、抑菌圈测定仪：

用于测定细菌所致抑菌圈直径，也可以用游标卡尺进行测量直径。43抗生素知识培训44抗生素知识培训45抗生素知识培训46抗生素知识培训8、超净工作台：用于菌种的接种、传代和菌悬液的制备。超净台应放在洁净工作间或半无菌室内。47抗生素知识培训9、磷酸盐缓冲液：根据兽药典附录或者品种项下要求的配方进行配制、分装、灭菌后备用。常用的缓冲液pH值有6.0、7.0、7.8等。缓冲液的pH值对样品液的稳定性、细菌生长速度和抑菌圈边缘清晰等有影响。

49抗生素知识培训10、培养基：尽量购置质量稳定的干粉培养基（如中国兽药药品监察所、中国药品生物制品监察所等生产的培养基）。常用的培养基有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ号等培养基，用前应按使用说明书进行配制，注意调节培养基pH值。50抗生素知识培训11、菌种：菌种应由中国兽医药品监察所和中国药品生物制品检定所等国家法定的菌种保藏中心提供。常用的菌种包括：枯草芽孢杆菌（CMCC63501)、短小芽孢杆菌（CMCC63202）、藤黄微球菌（CMCC28001)、金黄色葡萄球菌（CMCC26003）等。

51抗生素知识培训12、标准品标准品是指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或者效价测定的标准物质，一般以效价单位标示，标准品应由国家法定的单位制备、标定和供应，一般常用的标准品来源于中国兽医药品监察所和中国药品生物制品检定所。52抗生素知识培训三、管碟法操作步骤

1、称量：标准品从冰箱内取出后，应放置至室温后称取。标准品的称取量往往少于100mg，需选用十万分之一的分析天平精密称量，称取量应大于10mg，并且为了减少实验误差，应使用小烧杯或特制的称量壶作为称量容器。

53抗生素知识培训供试品称取量若少于100mg，称取方法同标准品；供试品取量若多于100mg，可直接使用称量纸在万分之一的分析天平上精密称量。称量过程中，不能裸手接触称量纸或称量容器。液体制剂量取供试品体积的方法，粘稠的液体不便量取时，可采取称重，然后测定相对密度，折算称体积。54抗生素知识培训2.稀释

稀释标准品和供试品所用的缓冲液应用同一瓶内或同一次制备和缓冲液几瓶混匀后使用。为避免抗生素被玻璃吸附，在量取溶液时，要用被量取的溶液流洗3次。55抗生素知识培训3.制备底层

用灭菌的吸管吸取已融化的培养20ml注入培养皿中，稍后盖上陶瓦盖吸收水蒸汽，以免培养基温度过高，加盖陶瓦盖后冷凝水影响菌层的表面平整性（由于冷凝水的局部冷却和稀释作用，可使菌层培养基凝固后表面不平）。56抗生素知识培训4.制备菌层取出试验菌悬液，吸取已试验妥的菌量加入已融化并保温在水浴中（一般细菌48℃，芽孢60℃），摇匀作为菌层培养基。然后吸取菌层培养基5ml，使其均匀摊在底层培养基上，置水平台上，用陶瓦盖覆盖，放置20-30分钟，备用。

57抗生素知识培训5.滴加抗生素溶液至小钢管

采用胶头滴管或者定量加液器向钢管中加溶液。由于滴加先后顺序及时间的不同，抗生素在培养基内扩散有差异。在滴加抗生素溶液时采用S2→T2→S1→T1（标准品高浓度、样品高浓度、标准品低浓度、样品低浓度）的顺序滴加，以减少试验误差。

58抗生素知识培训6.培养加液完毕后，用陶瓦盖覆盖，平稳地移入培养箱中，至35-37℃培养至所需的时间。双碟在培养时，不易使双碟靠近培养箱热源较近处，以免造成培养温度不均匀，使同一双碟上细菌生长速度不一致，造成抑菌圈变小或抑菌圈不圆。

59抗生素知识培训7、抑菌圈测量

从培养箱中取出培养皿，将钢管倒入盛有1：1000新洁尔灭或其他消毒液内，盖上玻璃盖。用抑菌圈测量仪或者游标卡尺测量，然后按生物统计法测定其效价。