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文档简介
项目一植物组织培养的认知主要教学参考书(名称、编者)
园艺植物组织培养王永平植物组织培养王清连观赏植物组织培养谭文澄植物组织培养曹春英植物细胞工程原理与技术周维燕
项目一植物组织培养的认知项目二植物组织培养实验室的设计与设备配置项目三培养基配制项目四甘蓝下胚轴培养快速繁殖无性系项目五草莓花药培养项目六马铃薯脱毒种薯生产课程主要内容:项目七
菊花的组织培养与快繁技术项目八蝴蝶兰的组织培养与快繁技术项目九红叶石楠的组织培养与快繁技术项目十细胞培养、原生质体培养与体细胞杂交、种质资源的离体保存项目十一组培苗工厂化生产的经营与管理本课程学习要求掌握基本原理掌握基本概念了解开展组织培养工作的基本设施掌握植物组织培养基本的操作技术掌握植物组织培养在植物快繁脱毒等方面的应用《植物组织培养》考试课程:按334原则确定平时成绩30%期中考试成绩30%
期末成绩占40%(实践成绩中优秀取90分,良取75分,及格取60分)出勤及学习态度(10分);实验操作的规范性(10分);实验报告完成情况,包括结果观察、分析、讨论深入程度(10分)。成绩考试暂定办法X50%+实践成绩50%=总成绩项目一、植物组织培养的认知了解植物组织培养的目的和意义。学会检索植物组织培养的相关信息。掌握植物组织培养的概念和分类方法。会用细胞全能性和实现途径的理论阐述植物组织培养技术。了解植物组织培养的应用现状。学习目标主要内容:植物组织培养组织培养的类型植物组织培养的理论基础植物组织培养的发展简史植物组织培养在农业上的应用植物组织培养是现代农业生物技术的一个重要组成部分和基本研究手段之一。它是通过无菌操作,把植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养并使其发育成完整植株的科学技术。
项目介绍 通过本课程的学习,旨在使有关专业的学生在了解和掌握有关基础理论知识的前提下,加强实验设计、技术操作和实际动手能力的培养,培养学生的动手能力和创新能力,扩大学生的知识面,增加毕业生就业机会和职业能力,使学生能够在生物技术产业和农林生产中解决实际问题,直接服务于生产。
让学生将检索得到的相关信息制作成幻灯片,以PPT为辅助呈现其所收集的植物组培的相关内容,然后在教师的辅导下开展讨论,有条件的可进行植物组织培养的实地参观考察,从而使加深对植物组织培养基本概念和知识的理解。植物组织培养基本知识收集、整理。探究植物组织培养的类型、特点和理论基础。查阅植物组织培养的发展历史和应用现状。工作任务植物组织发展史期刊杂志:《植物生理学通讯》、《Plantcellreports》、《plantcell,tissueandorganculture》、《Handbookofplantcellculture》、《InVitroCellularandDevelopmentBiology》、《Plantbiotechnology》。图书:《植物组织培养》,王清连;《观赏植物组织培养》,谭文澄;《植物细胞工程原理与技术》,周维燕;《植物组织培养教程》,李浚明;《植物组织培养与工厂化育苗》,崔德才等。网络:中国植物组织培养网,“google”网站检索。实践知识植物组织培养相关信息的检索一、什么是植物组织培养?什么是组织培养或离体培养或试管培养?问题探究分株繁殖压条繁殖播种繁殖嫁接繁殖扦插繁殖组织培养繁殖器官(organ):根、茎、叶、花、果实、种子等组织(tissue):花药、胚珠、胚、胚乳、形成层、皮层等细胞(cell):体细胞、生殖细胞、花粉等植物组织培养(tissueculture)是指在无菌条件下将离体的植物器官、组织、细胞以及除去细胞壁的原生质体放在(培养在)人工配置的培养基上,给予适当的培养条件,使其长成完整的植株。
一、概念1、狭义概念:
指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。2、广义概念:
无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。广义和狭义概念有何区别?
组培范围不同,即外植体范围不同。广义组培狭义组培无菌离体材料:
①器官:根、茎、叶、花、果实②组织:花药组织、胚乳、皮层③细胞:体细胞(2n)、生殖细胞(n)④原生质体培养基(人工)培养条件:温度、光照、湿度植物组织培养的四要素1.根据被切除的植物体来源不同和对象不同分为:植株培养愈伤组织培养器官培养细胞培养原生质体培养是对植物体的各部分组织进行培养;或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养,二者均通过再分化诱导形成植株。
离体器官的培养植物组织培养的类型对完整植株材料的培养,如幼苗、较大植株。对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养。用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养2.根据培养方式:固体培养、液体培养
固体培养液体培养固体培养:将培养物放在含有琼脂等固化剂的培养基表面进行培养。液体培养:将培养物放在未加固化剂的培养基内培养,一般需进行震荡,又称液体震荡培养。(1)固体培养法
是最常用的方法。该方法简单,易行,
但养分分布不均,生长速度不均衡,并常有
褐化中毒现象发生。(2)液体培养法
由于液体中氧气含量较少,常用振动培养的方法以确
保氧气的供给,往复式摇床或旋转式摇床进行培养,速度一般为50-200r/min,这种定期浸没的方法,既能使培养基均一,又能保证氧气的供给。
固体培养、液体培养的特点:褐化3.根据培养器官的不同:
烟草(叶培养)可分为:叶培养、根培养、花药培养、胚珠培养、茎尖培养等松树茎尖培养植物克隆的技术基础是------------------,理论基础是-----------------------------
植物组织培养植物细胞的全能性植物的克隆离体、消毒的植物器官、组织或细胞植物体根、芽脱分化再分化植物组织培养愈伤组织脱分化胚状体再分化1、概念受精卵生殖细胞体细胞>>植物体的每个活细胞具有遗传上的全能性,都具有发育为完整植株的潜能,叫做植物细胞全能性。2、原因3、全能性的体现:一、植物细胞的全能性植物细胞>
动物细胞不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间因遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同.生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质.
思考讨论:为什么体内细胞没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织、器官?
基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期,生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的,合成的蛋白质也不一样,从而形成了不同的组织和器官。
离体状态有一定营养物质、激素和其他外界条件(如无菌、温度、PH)细胞表现出全能性的条件二、植物组织培养程序1、配制半固体培养基2、无菌操作切取一些小块组织3、获得愈伤组织4、诱导愈伤组织5、再生新植株出现脱分化通过调节营养物质和植物生长调节剂的适当配比植物组织培养的培养基无机营养物质:植物所必需的大量元素及微量元素有机营养物质①含N物质:包括维生素和氨基酸②碳源:2%—5%的蔗糖③琼脂:起凝固支持作用植物生长调节剂:(生长素,细胞分裂素)PH值:5.0-6.0上海和呈仪器制造有限公司CO2培养箱愈伤组织强调几个概念:愈伤组织:植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化,继续分裂增殖,形成一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。植物细胞的脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。获取外植体无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成扩大培养移栽脱分化再分化三、植物细胞培养主要几种技术:1、组织培养2、悬浮细胞培养3、原生质体培养4、单倍体培养
通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比,诱导愈伤组织分化出芽和根的分生组织而形成再生新的植株。通过液体悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞,经适宜培养基中成分的诱导,可发育成胚状体,从而形成新株。原生质体:去除细胞壁后的植物细胞。用适当方法进行原生质体培养,也可以获得新植株。用花药离体培养方法获得单倍体植株。植物细胞愈伤组织芽、根单细胞胚状体植株植株植物激素的不同配比
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