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文档简介

中间层(目的蛋白中间层(目的蛋白的液体可分3上层(絮状物,油脂、核酸A液=200㎕*(8+样品数*2*3+1)“3”指的是10X、50X、100X三个稀释倍数,如果只有1个96“3”指的是10X、50X、100X三个稀释倍数,如果只有1个96孔板第一列为蛋白标准品一共8个

多配1个孔的液体,“1④37℃恒温箱放置30min,类型”选“未知”,点“未知样点击“操作点击“运行”点击“自定义区域”选择所有加样点“光度测量”,改波长为562”,类型”选“未知”,点“未知样点击“操作点击“运行”点击“自定义区域”选择所有加样点“光度测量”,改波长为562”所以原样本的浓度为51700μg/ml,换算单位为μg/㎕所以原样本的浓度为51700μg/ml,换算单位为μg/㎕凝胶百分百凝胶百分百8后再倒入槽中(尽量把也倒入,里面含有上样(小枪头)上样前准备好最大量程为2㎕、10㎕、㎕的移液枪。蛋白标准品(Marker)和5Xbuffer,蛋白样2㎕1212121212121212预电泳:70V,30min 染了两片蓝色保护纸中间的膜。将膜放在甲醇溶液中,泡④做转膜三明治,顺序是:7层与膜等大的滤纸(用电转液浸湿)→(大分子量在上在上放到转膜托盘中→盘上多余的电转液→”” 2个,海绵4块)、甲醇、滤纸、NC膜或PVDF膜(前者便宜,1×transBuffer(10×transBuffer80ml+甲醇160ml+dH2O剪8用镊子将做好标记的膜浸泡在1×transBuffer中(PVDF膜需要先用甲醇浸泡 放在盛有1×transBuffer的托盘中,黑色朝下(负极),放上 海绵→4层滤纸→胶→PVDF膜→4层滤纸→海绵;依次放入后边浇水边用离心管赶走气泡,夹好转膜夹,放入转膜槽(注意 朝上,黑对黑),倒入1×transBuffer,时间由蛋白大小决定,需要摸索条件(一般95KD以②4℃冰箱中取出显影液,A、B各取“AVFluorChemQ”点击左上角“Acquire“AVFluorChemQ”点击左上角“Acquire吸取少量混合好的显影液加在显影点击红色的“Acquire将膜放置

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