输血前传染性疾病指标的临床运用

输血前传染性疾病指标的临床运用第1页，课件共39页，创作于2023年2月按照卫生部《临床输血技术规范》相关规定,要求对输血前和手术前(包括产前)患者进行血液传播性疾病的血清指标检测，即乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)、人类免疫缺陷病毒(Ⅰ型,Ⅱ型)抗体(抗HIVl/2)、梅毒抗体（TP）四项传染性指标。我国2012年发布的《中国丙型病毒性肝炎医院感染防控指南》中要求：进行外科手术及侵入性诊疗操作(所有涉及外科操作的内科、内镜以及妇科、产科、牙科等的常规医疗操作)患者在进行操作前筛查丙肝病毒抗体；血液透析患者首次血液透析前应进行丙肝病毒抗体检测，丙肝病毒抗体阴性者在血透中建议定期(半年)进行丙型病毒性肝炎的筛查这对于避免医源性感染、预防医务人员的职业感染，防止出现医疗纠纷有积极意义。第2页，课件共39页，创作于2023年2月为保障广大人民群众的身体健康，提高人口素质，有效控制病毒性肝炎（HBV、HCV）艾滋病和梅毒等传染性疾病的传播，加强肝炎、艾滋和梅毒等传染病的预防与控制工作，国家制定了《中华人民共和国传染病防治法》、《艾滋病防治条例》及最新的《中国预防与控制梅毒规划（2010-2020年）》。第3页，课件共39页，创作于2023年2月主要内容HBV感染与检测HCV感染与检测HIV感染与检测TP感染与检测第4页，课件共39页，创作于2023年2月HBsAgPrevalence>8%-High2-7%-Intermediate<2%-LowHBV是全球卫生问题，约有20亿人曾感染过乙肝慢性HBV感染者约有3.5亿,感染率最高的区域在亚洲,非洲.乙肝全球流行分布图第5页，课件共39页，创作于2023年2月HBV感染的转归慢性HBV感染

成年期感染5%-10%%

肝硬化肝功能衰竭肝细胞癌

慢性乙型肝炎5年发生率12%-25%5年发生率5%-15%5年发生率20%-23%肝移植婴儿期感染85%-95%急性HBV三部曲第6页，课件共39页，创作于2023年2月《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）血清学检测HBsAg/HBsAbHBeAg/HBeAbHBcAb/HBcAb-IgM病原学检测HBV-DNAHBV基因型和变异指南推荐HBsAg作为HBV感染的标志物，阳性表示HBV感染，同时明确指出，血清HBsAg定量检测可用于预测疾病进展，抗病毒疗效和预后第7页，课件共39页，创作于2023年2月慢性乙型肝炎治疗终点——《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）第8页，课件共39页，创作于2023年2月ELISA检测HBsAg的问题定量及溯源性：国产ELISA试剂为定性检测，无法溯源到WHO国际标准，不能对病人进行动态定量监测精密度：ELISA试剂通过批批检的精密度要求为CV＜15%。实验室实际HBsAg测定结果的批间CV一般为25%左右敏感性：目前发现献血员中所发现的HBsAg携带者最低含量为0.2ng/ml。国产ELISA试剂的敏感性水平多为0.5ng/ml左右，对极低含量的HBsAg携带者可能出现漏检第9页，课件共39页，创作于2023年2月

ELISA检测HBsAg的问题突变株：S基因发生突变可导致HBsAg的抗原决定簇发生改变。可影响与相应抗体的结合，从而出现HBsAg假阴性结果特异性：ELISA影响因素多，采用400nm波长比色，出现假阳性结果的可能性较大，在弱反应性的标本中更为常见第10页，课件共39页，创作于2023年2月HBsAg化学发光定量检测优秀的突变检测能力（混合单克隆抗体，小分子标记物）仪器自动化检测，发光物质稳定，精密度高（<10%）敏感性高（0.03~0.05IU/ml）表面抗原的定量检测是评定乙肝治疗效果的显著预测因素血清HBsAg定量与cccDNA水平有较好的相关性，判断理想的治疗终点第11页，课件共39页，创作于2023年2月HBVcccDNA与HBsAg相关性cccDNA是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗病毒治疗的目标慢乙肝患者外周血中几乎检测不到cccDNA血清HBsAg浓度与cccDNA相关NewinsightonhepatitisBviruspersistencefromthestudyofintrahepaticviralcccDNA，JournalofHepatology,Volume42,Issue3,March2005,Pages302-308第12页，课件共39页，创作于2023年2月最常见的HBsAg突变位点第13页，课件共39页，创作于2023年2月评估13种常见变异株,ELISA只能检测其中的3种.

第14页，课件共39页，创作于2023年2月高敏发光：常见突变位点全部检出第15页，课件共39页，创作于2023年2月HBsAg定量检测：优势和价值优势价值两步法检测，避免HOOK效应结果可靠，减少纠纷定量检测，单位IU/mL抗病毒疗效监测及预测，改善患者预后W.H.O标准品溯源结果可比，减少重复检查，减轻患者负担

高灵敏度，0.03-0.05IU/mL缩短窗口期，改善患者预后及临床满意度优异的突变检测能力避免漏检，减少纠纷多基因型检测能力防止漏检，减少纠纷第16页，课件共39页，创作于2023年2月抗-HBs定性检测（有无应答标志）机体对乙肝病毒产生抵抗力的标志疫苗注射后免疫成功的标志抗-HBs定量检测第17页，课件共39页，创作于2023年2月疫苗接种完成后1个月抗体浓度达到高峰第18页，课件共39页，创作于2023年2月无应答者:无抗体产生(5%)加强剂量复种低应答者:<10IU/L(10%)加强剂量复种中应答者:10-100IU/L(65%)无须复种高应答者:>100IU/L(20%)无须复种乙肝疫苗注射效果评价

定量是应答水平评价标准血清HBsAb定量可用于评价乙肝疫苗接种的效果第19页，课件共39页，创作于2023年2月主要内容HBV感染与检测HCV感染与检测HIV感染与检测TP感染与检测第20页，课件共39页，创作于2023年2月HCV-沉默的杀手全球感染率2.8%，中国感染率0.43%慢性化比例高达70%第21页，课件共39页，创作于2023年2月2004HCVaudiowebconference,Dr.ERSchiff,MiamiUniversity,FloridaSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormal01234561234YearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgSymptoms+/-TimeafterExposureTiteranti-HCVALTNormal01234561234YearsMonthsHCV-RNAHCVCoreAgPersistentCase:70%CuredCase:30%HCV

感染的典型血清学模式急性HCV感染被完全治愈急性HCV感染转为慢性感染急性HCV感染的两种临床结果（血清学模式）：2015年版中国丙型肝炎防治指南推荐以抗-HCV作为HCV感染者的筛查第22页，课件共39页，创作于2023年2月抗-HCV检测的窗口期3rdgenerationHCVantibodytestsHCV感染3rdgen二代试剂82天一代试剂140-150天3代试剂70天强生第三代，Roche、Sysmex、Abbott、Siemens等均为第二代第23页，课件共39页，创作于2023年2月化学发光与ELISA检测敏感度比较几种丙肝抗体检测的临床应用评价，现代检验医学杂志，2012本试验中所有初筛阳性及三种方法检测不一致标本均以HCV-RNA进行确认，结果仅有1例HCV-RNA为阴性，其余均为阳性，可能是由于窗口期导致发光法漏检，无误诊，而两种ELISA方法漏检隶属分别为14例和12例，两例误诊（RF强阳性/较严重溶血）第24页，课件共39页，创作于2023年2月高危人群筛查：血透患者血透患者感染丙肝屡见报道第25页，课件共39页，创作于2023年2月为什么血透患者为丙肝高危人群？长期血液透析病人多为慢性肾功能衰竭病人，机体免疫力低下，免疫系统较难发生免疫应答产生抗体，导致HCV抗体检测的窗口期延长。对于血透人群只用HCV抗体筛查，会导致大量漏检，增加血透病人感染风险！第26页，课件共39页，创作于2023年2月丙肝血清学图谱核心抗原检测:12-15天抗体检测：70天明显缩短窗口期！有条件建议对高风险人群开展HCV核心抗原检测第27页，课件共39页，创作于2023年2月主要内容HBV感染与检测HCV感染与检测HIV感染与检测TP感染与检测第28页，课件共39页，创作于2023年2月中国HIV的流行分布截至2013年9月，联合国艾滋病规划署（UNAIDS）公布中国HIV感染人数850，000中国艾滋病每天死8000人，每天新患1.5万第29页，课件共39页，创作于2023年2月02030405060708090100IgGHIV1病毒裂解产物敏感性特异性无IgM无

HIV21983-85Sensitivity%2002P24+IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原合成多肽敏感性>99.9%特异性>99.9%第4代IgG+IgMHIV1&HIV2重组抗原合成多肽

1994P24抗原IgGHIV1+HIV2重组抗原敏感性特异性无IgM1987-90第3代第2代第1代敏感性特异性HIV-1O组血清学检测HIV技术的进展第30页，课件共39页，创作于2023年2月01020405060708090100365301代抗体检测3代抗体检测P24抗原检测4代Ag+Ab检测172231窗口期:3-5天‘灵敏的’联检3代HIV抗体EIAHIVp24Agp24AgEIA抗HIV抗体1代HIV抗体EIA

HIVAg+Ab联合检测缩短窗口期Adaptedfrom:FiebigetalAIDS,17:1871-1879(2003)感染早期，在HIV抗体产生之前就可以检出HIVp24抗原。HIV抗原抗体(Ag+Ab)联检检出HIV感染的时间比HIV抗体检测早3-5天第31页，课件共39页，创作于2023年2月化学发光与ELISA检测敏感度比较CLIA>ECLIA>ELISA三种不同技术原理的第4代HIV诊断试剂的临床检测性能比较研究中华检验医学杂志2013年雅培罗氏佰乐注：血清转换盘来源于已经确诊HIV感染，且已知感染HIV的时间第32页，课件共39页，创作于2023年2月编号血清盘结果ABBOTT结果ROCHE结果Sysmex结果SIMENS结果2R702.25R374.9R361.157R>50R3R887.257R1834R>500.000R>50R5R35.387R44.17R49.821R>50R6R100.847R78.74R59.879R3.96R8R57.587R35.69R69.446R>50R9R435.559R247.1R>500.000R0.08N10N0.101N0.264N0.019N0.08N11R57.321R18.07R61.642R<0.05N12R20589R10.08R64.298R0.08N14R849.715R61.74R>500.000R0.27N15R36.643R18.76R104.201R0.11N17R160.909R89.34R419.387R14.71R19R87.388R37.41R166.591R0.09N20N0.107N0.282N0.043N0.15N21R27.169R9.42R61.493R>50R22R7.243R3.52R16.17R1.23R23R3.329R2.3R6.998R<0.05N25R2.569R1.35R7.094R0.07N血清转换盘检测结果第33页，课件共39页，创作于2023年2月主要内容HBV感染与检测HCV感染与检测HIV感染与检测TP感染与检测第34页，课件共39页，创作于2023年2月

诊察临床症状初期硬结、硬性下疳、扁平湿疣等病原学检查原理：一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而根据其特殊形态和运动方式进行检测。方法：（1）暗视显微镜检查（2）镀银染色法（3）核酸检测血清学检查梅毒螺旋体抗体（TP）检测法脂质抗体检测法梅毒诊断方法第35页，课件共39页，创作于2023年2月

感染梅毒4周左右产生IgG型抗梅毒螺旋体抗体，即使经足量抗梅治疗，梅毒螺旋体抗原消失后很长时间，IgG抗体仍可通过记忆细胞的作用继续产生，甚至终生在血清中可测出另一种具有抗体性质的物质叫反应素(reagin)，是梅毒螺旋体破坏人体组织过程中释放出的一种抗原性心磷脂刺激机体所产生的抗体。反应素一般在感染后5～7周（或下疳出现后2～3周）产生，经正规治疗后可逐渐消失。感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出