自身免疫性肝病相关自身抗体谱PPT

风湿免疫科业务学习自身免疫性肝病相关自身抗体谱自身免疫性肝病相关自身抗体谱自身免疫性肝病（AILD）与自身免疫密切相关以肝、胆损伤为主三种疾病AIH

PBC

PSC其诊断和治疗完全不同于一般慢性病毒性肝炎AIH：西欧和

北美患病率

0.1-1.9

/

10

万人

占所有

慢性肝炎的

20%左右PBC：西方

国家患病率

为10-20/10万人自身免疫性肝病相关自身抗体谱AILD发病情况一般认为,

AILD好发于欧美白人，亚洲黄种人较少PSC：欧美地区患病率至少为2-7/

10万人，

其中70%左右合并有溃疡性结肠炎遗传背景：主要的易感基因与HLA

DR2、DR3、DR4

、DRw8、

DR8相关自身免疫性肝病相关自身抗体谱近年的调查结果抗体谱筛查的谱及在各个国家的诊断不断增加医生认识能力的提高环境因素的恶化自身免疫性肝病相关自身抗体谱AILD临床诊断存在的困难AILD患者发病隐匿?重叠综合征大量存在“金标准”

组织病理的局限性缺乏诊断特异性自身抗体对疾病的认识有限The

epidemiology

of

primary

biliary

cirrhosis.

Clin

Liver

Dis.

2003自身免疫性肝病相关自身抗体谱原发性硬化性胆管炎(Primary

sclerosing

cholangitis，PSC)自身免疫性肝病相关自身抗体谱原发性硬化性胆管炎,PSCPSC-病因不明的慢性综合征特征-是肝外和/或肝内胆管弥漫性炎症、纤维化所引起的慢性胆汁淤积症合并IBD、UC70%自身免疫性肝病相关自身抗体谱诊断影Text像学in诊here断pANCA80%ANA

SMA20%-50%自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）阳性主要靶抗原MPO、人白细胞弹性蛋白酶（HLE）、乳铁蛋白（LF）、组织蛋白酶G（CG）、溶菌酶（LYS）、天青杀素（AZU）、α-烯醇化酶、β-葡萄糖醛酸酶、BPI自身免疫性肝病相关自身抗体谱自身免疫性肝炎Autoimmune

hepatitis，AIH自身免疫性肝病相关自身抗体谱自身免疫性肝炎AIHAIH:伴循环自身抗体和高免疫球蛋白血症，病因未明，呈慢性炎性坏死的肝脏疾病Waldenstrom于1950年发现一种特殊类型的慢性肝炎

女性多见，伴有黄疸、丙种球蛋白明显升高和闭经后期常发展成肝硬化以往称之为“狼疮样肝炎”（lupoid

hepatitis）：常伴有ANA及

SMA阳性，特别是部分病人可见LE细胞慢性进行性发展，病理变化呈慢性活动性肝炎改变，伴有自身免疫现象自身免疫性肝病相关自身抗体谱肝脏病理活检肝内胆小管显示散在肝细胞坏死自身免疫性肝病相关自身抗体谱2010年AIH最新诊断指南Hepatology.

2010

Jun;51(6):2193-213自身免疫性肝病相关自身抗体谱AIH的自身抗体谱包括器官非特异性和器官（肝）特异性自身抗体：Ⅰ型AIH：即经典的AIH

最常见，约占80%可检出

ANA、ASMA

Ⅱ型AIH：少见，儿童多见仅抗-LKM

1阳性，而ANA及SMA均为阴性Ⅲ型AIH：仅见抗可溶性肝细胞浆抗原（SLA）自身抗体Ⅳ型AIH：自身抗体阴性

(~20%)自身免疫性肝病相关自身抗体谱AIH的自身抗体谱抗核抗体（ANA）抗组蛋白抗体

抗DNA抗体抗平滑肌抗体（SMA）抗肝-肾微粒体抗体（抗LKM1）

抗去唾液酸受体抗体（抗ASGPR）

抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA）

抗肝细胞质抗原I型（抗LC1）

抗肝膜抗原抗体（抗LMA抗体）

抗肝特异性蛋白抗体（抗LSP抗体）

抗胆管、胆小管抗体抗胃壁细胞抗体（PCA）抗线粒体抗体（AMA）：抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）

抗板层素抗体（A/C）自身免疫性肝病相关自身抗体谱AIH中的抗核抗体（ANA）以抗组蛋白抗体、

抗DNA抗体多见—ANA均质型自身免疫性肝病相关自身抗体谱AIH中的抗核抗体（ANA）AIH最常见的自身抗体之一，Ⅰ型AIH

75%阳性不具有诊断特异性ANA常与ASMA同时出现（85%-90%）靶抗原：以DNA（单链和双链）和组蛋白（H3亚单位及核小体）为主抗单链DNA抗体在AIH中的阳性率为85%

抗双链DNA抗体在AIH中的阳性率为34%自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗双链DNA抗体常见于AIH与PBC的重叠征Am

J

Gastroenterol

2009自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗

平

滑

肌

抗

体

SMA自身免疫性肝病相关自身抗体谱与ARA鉴别自身免疫性肝病相关自身抗体谱SMA概况1965年Johnson等应用IIF法（底物：大鼠胃组

织），在慢性活动性肝炎（CAH

）中发现SMA无器官及种属特异性，主要为IgG和IgM高滴度的SMA为I型AIH高敏感性自身抗体，但非AIH特异性自身抗体抗F-

actin抗体对I型AIH有重要诊断意义自身免疫性肝病相关自身抗体谱SMA的靶抗原靶抗原种类丰富，主要为多种细胞骨架成分,可分为肌动蛋白（actin）和非肌动蛋白两大类Actin：单体/G及聚合体/F

微丝(mirofilaments)

抗F-actin（46KDa）F－actin与AIH关系密切G－actin与酒精性肝硬化有关

nonactin：

vimentin

结蛋白微管蛋白

原肌球蛋白肌球蛋白

肌钙蛋白—与感染性疾病、系统性自身免疫性疾病等有关检测方法：临床常规检测方法为IIF自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗平滑肌抗体（SMA）临床意义见于多种肝脏疾病及非肝脏疾病，无诊断特异性对I型AIH诊断有重要意义高滴度SMA（1:160）诊断敏感性高达90％以F－肌动蛋白为靶抗原的SMA为AIH特异性抗体，在AIH中阳性率高达97％低滴度的靶抗原为非肌动蛋白的SMA（以IgM为主）可非特异性出现于多种疾病中（1:80）自身免疫性肝病相关自身抗体谱SMA疾病谱及靶抗原、抗体特点相关疾病靶抗原抗体种类抗体滴度AIHF-actinIgG为主高滴度AIH-PBC重叠症

F-actinIgG和IgM为主高滴度酒精性肝硬化

G-actinIgM低滴度病毒性肝炎

vimentinIgM低滴度药物性肝炎

troponinIgM低滴度SLE，RA，SS

vimentinIgM低滴度炎症性肠病

vimentinIgM低滴度白塞氏综合征

vimentinIgM低滴度心肌炎desminIgM低滴度传染性单核细胞增多症

tubulinIgM低滴度自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗F-actin抗体检测

IB法－46KDaANA检测HEp-2细胞底物－敏感性？

抗F-actin抗体ELISA试剂盒自身免疫性肝病相关自身抗体谱Actin自身免疫性肝病相关自身抗体谱TropomyosinVimentin自身免疫性肝病相关自身抗体谱Vinculin自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗肝/肾微粒体抗体（抗LKM1抗体）自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗肝/肾微粒体抗体（抗LKM1抗体）靶抗原：细胞色素P450IID6，为50KD蛋白主要为IgG1

型抗体检测方法：筛选→

IIF

确认→ELISA、IB

临床意义:

II型AIH血清特异性抗体HCV患者中约2-10%阳性

HCV感染的PBC中高达21.4%

检测LKM-1抗体ELISA为主自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗LKM抗体与HCV感染的PBC相关Am

J

Gastroenterol.

2003

Dec;98(12):2757-62.自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗可溶性肝抗原抗体（抗SLA抗体）靶抗原：肝细胞角蛋白（cytokeratins）8，18谷胱甘肽巯基转移酶.分子量55

KD、45

KD，可能是肝细胞溶质成分，肝脏、肾脏浓度最高检测方法：IB、ELISA，IIF检测效果不佳临床意义：3型AIH的血清学标志（约11-25%），原因不明肝炎约14%13230n10814928403932181424自身免疫性肝炎,

巴西自身免疫性肝炎,

日本自身免疫性肝炎,

德国血清自身免疫性肝炎,

美国AIH

(竞争抑制性实验阳性)AIH

(抗

LKM-1

抗体阳性)原发性胆汁性肝硬化(PBC)乙型肝炎病毒感染丙型肝炎病毒感染肝中毒损伤非酒精性脂肪肝自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗SLA/LP抗体的阳性率抗

SLA/LP

抗体阳性23

(17.4%)2

(

6.7%)21

(19.4%)23

(15.4%)23

(82.1%)01

(

3.1%)0000健康的献血者2000自身免疫性肝病相关自身抗体谱临床中存在的问题抗SLA抗体的阳性率极低即使AIH患者中抗SLA抗体的阳性率也极低抗SLA抗体阳性的患者很多并不是AIH抗SLA阳性率？AIH患者抗SLA阳性率？

抗SLA阳性患者疾病分布？

抗SLA抗体的临床意义？自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗SLA/LP抗体在中国AIH人群中阳性率低自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗SLA抗体检测的临床意义SLA总体阳性率(0.4%

)

M2(8%)

SLA

在中国人群AIH中的阳性率5%。

SLA对中国人群AIH的特异性极差抗SLA检测在中国人群中的临床意义较小49例SLA阳性患者疾病分布自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗SLA/LP抗体在亚洲人群中阳性率低Journal

of

Autoimmunity

21

(2003)

77–82自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗肝细胞胞浆抗原1型抗体（抗LC1抗体）自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗肝细胞胞浆抗原1型抗体（抗LC1抗体）抗原特征：为58-62KD的肝细胞胞液多肽蛋白，为肝脏特异性细胞溶质，亚胺（代）甲基转移酶－环化脱氨酶(1999)检测方法：

IIF、ID、IB（62KD）等临床意义：为2型AIH的血清特异性抗（56-72%），常与抗LKM-1抗体同时存在（73%），与疾病活动性具有相关性自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗去非唾液糖蛋白受体（抗ASGP-R抗体）抗原特征：位于肝细胞膜表面肝特异性蛋白成分一种跨膜蛋白，每个肝细胞膜表面大约有50万个ASGP-R分子检测方法：ELISA、RIA临床意义：AIH（50-88%），但也见于慢性乙型和丙型肝炎，酒精性肝病，PBC等，阳性率10%左右。抗体与炎症活动性密切相关，可用于疗效观察自身免疫性肝病相关自身抗体谱原发性胆汁性肝硬化(Primary

biliary

cirrhosis，PBC)自身免疫性肝病相关自身抗体谱研究概况

发病人数不断增加1851描述环境因医生认抗体筛素恶化识提高查普及遗传因素作用明显同卵双生PBC共发率为60％（第二位）病因不清环境因素作用于具有遗传易感性个体病原体感染和化学物质等自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC发病机制通过分子模拟机制

，使机体免疫耐受瓦解产生针对正常肝脏细胞蛋白成分的自身抗体Minocycline-Induced

Autoimmune

Hepatitis

with

Subsequent

Cirrhosis.J

Pediatr

Gastroenterol

Nutr，2006.Primary

biliary

cirrhosis

in

monozygotic

and

dizygotic

twins:

genetics,

epigenetics,

and

environment.

Gastroenterology,

2004.自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC分期胆管炎期胆管增生期瘢痕期肝硬化期以往多采用LUDWIG

和

SCHEUER提出病理分期自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC分期－目前失代临床偿期亚临期临床前期6年发展为PBC床期无症状，但有肝功

能异常患者5年内5%

出

现症状，20年内

95%出现症状，中

位生存年龄15年自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC诊断现状

诊断仍不完美胆汁淤积性疾病在人群中的发生率非常高?37%现有的手段对于PBC的诊治有很多局限性完全准确把PBC区分出来非常重要但又困难依靠病理、血清抗体检查仅能诊断部分患者The

epidemiology

of

primary

biliary

cirrhosis.

Clin

Liver

Dis.

2003自身免疫性肝病相关自身抗体谱原发性胆汁性肝硬化的自身抗体谱AMA：M2M4M8M9抗GP210抗体抗SP100抗体抗板层素抗体目前在PBC患者已经发现60多种抗体自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC自身抗体非常复杂PBC患者中存在60多种自身抗体World

J

Gastroenterol,

2010.

16(29):

p.

3616-29.自身免疫性肝病相关自身抗体谱AMA是PBC最常用的抗体AMA的发现诊断里程碑1965年Walker应用IIF法发AMA是PBC诊断的里程碑现PBC血清中存在AMAPBC敏感性

>90%

AMA亚型AMA亚型的意义80年代后期研究:

AMA存在

若干亚型（M1—M9）PBC相关（M2、M4、M8、M9）

梅毒

(M1),

心血管病

(M7).药物性紊乱：药物性狼疮

(M3)，异丙异烟肼

性肝炎(M6)M2并不是PBC特异性的抗体(SS,PM/DM,HCV)

有10-20％M2出现常规检测中M2强阳性者仅1/3能诊断为PBC自身免疫性肝病相关自身抗体谱AMA在PBC中的意义AMA可在临床症状出现前10年出现于PBC患者YouMetcalf等对M2阳性,无临床表现的患者进行肝脏穿研究，93%患者提示或符合PBC，经随访76%患者在两年内出现PBC临床表现，发展成典型PBC患者Natural

history

of

early

primary

biliary

cirrhosis.

Lancet自身免疫性肝病相关自身抗体谱自身抗体可以在AID临床发病前检测到PBC患者任何临床症状前10年可检测到AMA自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗线粒体抗体（AMA）阳性自身免疫性肝病相关自身抗体谱AMA-M2靶抗原:线粒体呼吸链上2-酮酸脱氢酶(2-OADH)复合物5个不同的抗原决定簇76KD、56KD、51KD、45KD、

36KD,包括：支链2-酮酸脱氢酶E2亚基（BCOADH-E2）酮酸脱氢酶E2亚基（PDH-E2）2-酮戊二酸脱氢酶E2亚基（OGDH-E2）PDH-E1t亚基E3结合蛋白检测方法：ELISA、IB临床意义：PBC敏感的抗体，阳性率>90%，AMA滴度与PBC疾病分期无关CD8+

T

159–167B

167–186CD4+

T

163-176自身免疫性肝病相关自身抗体谱目前PBC患者AMA相关的研究进展AMA自身免疫性肝病相关自身抗体谱AMA阴性PBC临床表现治疗反应AMA阴性PBC？肝功能指标疾病过程肝脏病理现有检测技术-AMA阴性PBC?自身免疫性肝病相关自身抗体谱Clin

Exp

Immunol

2004;135:154–158C

hip

Q

C自身免疫性肝病相关自身抗体谱12×4×25×32＝38400点97.6

%

of

the

proteins

detectableCorrelation

coefficient

of

(B

arcode:

2000114461)duplicate

spots:

0.978A

芯片实物照B芯片杂交图全貌自身免疫性肝病相关自身抗体谱15M2+/6M2‐P<0.011

proteinsP<0.0544

proteinsM2？自身免疫性肝病相关自身抗体谱AMA并不特异SS,SLE,HCV,

10-20%

M2阳性AMA的产生并不是PBC特有PBC中的AMA不同于HCV和急性肝损伤自身免疫性肝病相关自身抗体谱发现临床问题

病

例X某，女，36，08年7月感染HCV

ALF患者AMA阳性率40.3%自身免疫性肝病相关自身抗体谱急性肝功能损伤的患者存在高比例的AMAHEPATOLOGY,

Vol.

46,

No.

5,

2007自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC患者线粒体水平与治疗无关Clin

Dev

Immunol

2004

Jun自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗Sp100抗体两种核点（nuclear

dots,ND）型荧光染色模型：a

few

nuclear

dots：抗p80螺旋蛋白抗体multiple

nuclear

dots，MND：抗Sp100抗体抗Sp100抗体:靶抗原为53KD的可溶性酸性磷酸化核蛋白（Sp100）PBC特异性抗体PBC中阳性率为10-30%，其他肝病患者均为阴性对AMA阴性的PBC患者的诊断具有重要意义AMA阴性PBC中阳性率（50%）显著高于AMA阳性者

（20%）该抗体可见于反复尿路感染的妇女自身免疫性肝病相关自身抗体谱HEp-2

细胞

/

灵长类肝脏:

核点型核少点核多点自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗Sp100抗体对PBC并不特异Hepatology.

1992

Jul;16(1):127-31.自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗Sp100抗体对PBC并不特异Scand

J

Gastroenterol

2003自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗Sp100抗体可见于反复尿路感染的妇女Dig

Liver

Dis

2003

Nov自身免疫性肝病相关自身抗体谱临床问题病例赵某，女，37，2009年入院。临床诊断PBC。自身免疫性肝病相关自身抗体谱临床问题重新认识ASCA的临床意义ASCA并不是IBD特异性自身抗体，在PBC患者有较高的阳性率，且以IgA亚型为主ASCA-IgA与PBC患者肝功能损伤指标和免疫活动指标改变有关。自身免疫性肝病相关自身抗体谱PBC患者与HIV自身免疫性肝病相关自身抗体谱Scand.

J.

Immunol.

36,

555-564,

1992自身免疫性肝病相关自身抗体谱核包膜蛋白自身抗体抗板层素抗体（

anti-lamin

antibody）anti

-lamin

A/C：（PBC

/AIH）CAHanti

-lamin

B：

SLE（2.2-8.5%）与APS相关抗核孔复合物抗体（anti-nuclear

pore

complex

antibody）抗Gp210抗体：诊断PBC特异性为88%，敏感性25%抗p62抗体：PBC高特异性自身抗体，敏感性为32%抗板层相关多肽（LAPs）抗体：10-30%伴anti

-lamin抗核板素受体（LBR）抗体：

PBC

（1%）自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗gp210抗体靶抗原：位于核孔复合物上的210KD跨膜糖蛋白

gp210羧基末端上的15个氨基酸残基PBC特异性抗体（88

%

），敏感性为25%约1/4与AMA同时出现，也存在于20%~47%

AMA阴性

PBC中对于临床、生化和组织学表现疑诊PBC而AMA阴性的患

者，抗gp210抗体检测有重要价值可作为PBC患者预后指标，抗体阳性提示预后不良自身免疫性肝病相关自身抗体谱抗板层素抗体抗原特征：核板是一中间丝状结构，与核内膜的内面连结，组成板层结构的蛋白，分子量60KD、68KD、74

KD检测方法：IIF、IB

、

ELISA临床意义：多见于PBC、CHA（慢活肝）、慢性疲劳综合征（c