红细胞血型检测

第二章红细胞血型检测江西医学高等专科学校11级检验班01

李金辉1红细胞血型检测目录第一节输血前免疫学检查第二节盐水介质试验技术第三节酶处理试验技术第四节抗球蛋白试验技术第五节聚凝胺介质试验技术第六节微柱凝集试验技术第七节吸收放散技术第八节凝集试验技术第九节红细胞血型分子生物学检测技术2红细胞血型检测学习要求：1.输血前主要包括哪些内容？2.受血标本接受时的注意事项有哪些？3.ABO血型和RhD血型鉴定时的注意事项有哪些？4.交叉配血试验的影响因素有哪些？5.抗球蛋白试验的临床应用有哪些方面？6.红细胞血型分子生物学检测技术主要有哪些？3红细胞血型检测第一节输血前免疫学检查目的：是输入的血液成分在受血者的体内发挥其有效作用.

在正常情况下，输入的红细胞在受血者体内不溶血，输入的的血浆成分不破坏受血者的红细胞。主要程序：患者的病史和标本等的检查、核对及处理;ABO血型和RhD血型定型；红细胞同种抗体筛查和坚定；交叉配血试验；血小板输注前的抗体检查和配合试验；不规则抗体的筛选和鉴定；交叉配血结果的报告和发血等。4红细胞血型检测一、受血者标本的处理（一）标本的采集输血除了需要达到预期的治疗效果外，必须确保输血安全。血样由临床护士完成，因严格遵守一次只能为一位受血抽取标本，标本不得从输液管或输液侧筋脉中抽取。（二）标本的接收

输血科技师接收血样标本时，应认真核对受血者的相关信息，尽可能了解受血者有无输血史、药物史、妊娠史等情况。如果有输血史，这有必要进一步了解最后一次输血的日期，若3个月内输过血，那么供血者的红细胞没有完全代谢消失，可能依然存在于血液循环中，导致血型定型试验中出现混合凝集的结果。5红细胞血型检测（三）标本的要求1.对输血前检查的血液标本应严格要求能代表受血者当前的免疫学状况，标本还需经鉴定和标记，保证其准确无误地来自受血者和供血者，应和血液申请单上的内容一致。2.防止受血者血液标本稀释和（或）溶血，若采集过程中发生溶血则不能使用。3.受血者配血试验对的血液标本必须是输血前3天采集的。4.若受血者使用右旋糖酐、PVP等治疗，应注意洗涤被检红细胞。5.每次输血后，受血者和供血者的标本必须保存于2~8℃至少7天。6红细胞血型检测二、受血者和供血者ABO和Rh定型

（一）、原理

根据红细胞膜表面上有无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型、O型4种。A型人血清中含有抗-B抗体，B型人血清中含有抗-A抗体，O型人血清中含有抗-A抗体和抗-B抗体，AB型人血清中不含ABO抗体。正定型：用抗-A及抗-B试剂与被检红细胞反应，检测红细胞表面是否存在A抗原或B抗原。反定型：用标准A细胞及B细胞与被检血清反应，检测血清中是否存在抗体。由于ABO血型系统抗体多数为IgM类，在室温盐水介质中就能出现明显的凝集反应。7红细胞血型检测二、受血者和供血者ABO和Rh定型8红细胞血型检测二、受血者和供血者ABO和Rh定型

1.ABO定型最适的反应温度为4℃，但在室温反应良好，所以常规的ABO定型试验仅在室温进行。(1)定型方法：正、反定型的试管离心方法目前仍被认为是最可信赖的ABO定型方法。1)定型试剂：有些ABO血型诊断试剂是以人的血清汇聚而制成的，但必须具备以下条件：第一，高效价(1：128)的IgM抗A或抗B。第二，具较好的亲和性并不含冷凝集素。第三，必需具有检测A2，A2B血型的能力。第四，血清必须通过HIV，HCV，HBV等检查或经病毒灭活。另外一些ABO定型试剂是由来自培养细胞株的单克隆抗体所制成。9红细胞血型检测二、拳受血奇者和碰供血疲者AB茶O和Rh定型2)祖AB姜O亚型引的鉴况定：AB鞋O亚型盲的鉴孙定通贵常使斤用下洽列试击剂：舍抗A、抗B、抗A1、抗H、抗AI看A1红细降胞、A2红细然胞、B型红缩慧细胞碍和O型红奋细胞拣。有句些工没作者胸在定鹅型试幸验中沈，常窃规地叼选择昏应用奏抗AB抗血丑清，呀以避旁免错陕误地镜把弱恰反应泄性A或B型红廉细胞预分类雹为O型。泪一般见抗AB试剂成对Ax型红业细胞遗可增谦加凝垂集反辅应的轧强度搁。10红细领胞血昼型检敲测二、储受血光者和抖供血柄者AB崭O和Rh定型(一)A谊BO定型无试验世中的位常见暮问题阵：造兔成这糖种正择反定楼型不定一致垒的原填因主企要有牵：1)技术裕和管存理错京误：送这是AB特O定型卷中产惊生异擦常结滴果的贩主要秒原因滩，包山括：刷标本掉或试拒剂搞即错；强器材产不洁振；试眨剂污絮染或娘失效蔑；离茅心过史度或狼不足龄；阳碌性反牺应产歪生溶扯血现槽象未公能识饲别；除漏加疑试剂透；结熔果记循录或瓜判断屿错误胡；细仰胞与蔬血清哲间比因例不龄适当绒。2)血清算异常耕：血清盏蛋白监引起练缗钱般状形虏成，币影响誉反定锋型结俱果。3)红细屋胞致反敏：受少免疫锋球蛋幅白致铜敏的剖红细臭胞，即在含依高蛋须白介龟质的宵试剂齿中，膨可发仪生凝捷集。4)异常底基因洞型：AB签O亚型呢的检绣查中疯，A、B抗原与可能谈为弱雪抗原扮，难滥以检勾出。11红细开胞血骡型检钥测二、泡受血疏者和训供血仰者AB潮O和Rh定型5)近期通输血梅：试验裳前曾研输入罩过其筑它AB威O血型畏不一脑致的卷血液鹿，使鹊血液虎标本歌成为路混合清血型翅的红夹细胞扯悬液辱，定引型时分显示雄“混蝴合外虑观凝辱集”陵现象京。6)嵌合结体血凑型：怕这种别血型疲者体堆内有菠两类搏血型弹红细结胞群畏体，从定型袄时可密以出猫现“等混合竞外观蓬凝集父”现古象。7)疾病尘因素误导致泄抗原欧减弱俱：某渣些白楚血病群患者死和难绕治性躁贫血奔患者近中，AB沿O血型另系统每的抗史原性鸽可受打到抑剪制，棉检出型困难谁。8)红细骂胞多械凝集摸现象饼：红飞细胞圈因遗佩传或潮获得隐性的缘瑞表面比异常意，发阀生多蒜凝集叫现象丢。9)获得充性B：由烦于革症兰阴援性杆生菌的获作用统，红兴细胞突可获损得“停类B”的活青性。12红细联胞血丈型检柱测二、崇受血灿者和挺供血敲者AB仰O和Rh定型10赶)血型戚特异党性物央质过带高：圈一些污卵巢斩囊肿往病例冬，血铺型物附质的垄浓度辫很高拜，可适中和捕抗A和抗B定型鼓试剂泉，要略得到夕正确恐的正恶定型环结果劈燕，必坡须洗摊涤红途细胞顿多次瘦。11永)近期拍内进康行大若量的呼血浆刻置换因治疗盘：由于席使用悠大量考的非按同型绳的血虑浆作判置换咸治疗爱，标砖本血仰清中还含有筑所输欲供体蠢提供驳的抗A或抗B抗体滥，造晒成反算定型捷错误叨。12季)异常雪的血旅浆蛋虚白：参受检引者血填浆中除异常回的白哗蛋白虏、球蚂蛋白筑比例寺和高茫浓度吼的纤捧维蛋奖白原宇等导耀致缗削钱状绑形成腾，造虾成假替凝集菜现象盾。13盼)不规法则抗摇体的段存在救：受拢检者伤血浆底中，司含有AB连O血型梁抗体写以外凡的不纺规则姑抗体行，与告试剂伴红细白胞上郑其他谈血型静抗原鞭系统锐的抗攻原起舱反应立。13红细翅胞血催型检乎测二、如受血甚者和领供血令者AB礼O和Rh定型14凡)低丙恒种球趋蛋白沫血症凳：低缺丙种淋球蛋确白血佣症(丙种炸球蛋鞠白量筹减低)病例泛，可渗能会玻因免踢疫球陕蛋白水水平侨下降期而使掉血清洲定型眼时不继凝集宇或弱敲凝集缝反应数。15民)药物君等因女素：维药物岭、右额旋糖怖醉及耐静脉尊注射冤某些月造影台剂可宪引起土红细骡胞凝察集或顷类似男凝集寇。16退)年龄夺因素钱：免题疫系俭统尚农未健险全的鸣婴儿听、由抗母亲她被动补获得哄抗体绝的婴用儿，陵或抗恰体水筐平下耳降的援老人拖，试博验时穴可出乎现异机常的昂结果喝。17塞)防腐形剂因泼素：牙患者充体内侮可能惕含有惯对防见腐剂兽中的篮成分瘦或对胁混悬事介质隆的抗莲体，况导致AB弱O定型腿差错宿。14红细苗胞血它型检汽测二、除受血枪者和器供血烟者AB级O和Rh定型（二季）Rh花(D慕)定型哈和定耳型试速验中逢应注刷意的悦问题闹：Rh定型干主要表鉴定D抗原恭（Ig壁G抗D和Ig往M抗D）。Rh系统滚是最享为复避杂得振多一轧个系插统，触涉及趴临床贴的主牢要有D、C、c、E、e五个督抗原斯，其托中D抗原面的免拼疫原亿性最米强，仅融次于A或B抗原盗。Rh血型耐鉴定吸方法限有：位玻片左法、车试管考法、孤微量菜板法绑、微砌柱凝音胶法姐等，惹试管拿法最依为经换典。瞧目前自大部割分医狱院都兄使用离微柱妖凝胶皂卡式锯血型葛鉴定盆，方齿法简妇便快佛捷，投准确症度较室高。15红细犹胞血产型检掘测二、裹受血袋者和谷供血鸡者AB执O和Rh定型16红细万胞血灭型检短测二、钩受血府者和杨供血圈者AB驾O和Rh定型(1裕)导致Rh血型节鉴定勾可能备出现掉假阳辱性的调原因骗：1)受检晚细胞派已被续免疫盒球蛋猪白致定敏，贩或标普本血摊清中江含有我引起店红细深胞凝泻集的咬因子绞。2)受检溉细胞无与抗护血清浩孵育摧的时疑间过裹长，盲含高疼蛋白毒的定所型试怠剂会宰引起片缗钱辨状形籍成。3)标本挑抗凝牵不当惊，受布检过存程中渣出现涝凝血远或小地的纤确维蛋掘白凝垄块，凑误判杠为阳咏性。4)定型悉血清跑中含茧有事诵先未念被检幻玉测的沫其它锅特异眨性抗慨体，超造成歇假阳况性定污型结坟果。5)多凝去集细败胞造阔成定香型的忠假阳膏性。6)鉴定嘱用器蚊材或皇抗血催清被同污染倦，造揭成假傻阳性痛。17红细影胞血权型检变测二、抗受血宋者和辰供血抄者AB宪O和Rh定型(2龙)可能蚁出现服假阴稿性的笼原因1)受检通细胞鸣悬液饮浓度离太高妥，与疗抗血蜻清比口例失购调。2)漏加狂或错原加定圈型血哨清。3)定型钱血清凯的使币用方荡法错夹误，将没有行按说榜明书遣进行施。4)离心鞠后重非悬细给胞扣赢时，扎摇动睛用力纪过度毫，摇阶散微课弱的创凝集义。5)抗血烧清保唱存不佣当，嫂导致千失效枯。18红细艰胞血蛮型检做测二、灿受血糕者和气供血蜻者AB吗O和Rh定型(三)弱D型(D怠u型)血型氏及其助鉴定沾：Du型抗沉原是Rh跨O(舌D)的弱讲抗原捞，这国种抗饶原通迫常与币大部挣分盐接水抗D试剂掘不产稍生直贺接凝啄集反耗应，瓶而与哪部分舅的Ig梯G抗D血型熔用间青接抗稀球蛋卫白试外验反仁应阳轰性。这因此眯当我缴们初侦次得随到Rh阴性捷结果骑时，薄必须影进行鸭作Rh阴性患确认色试验范，即巴用三户种不仙同批铅号的Ig驾G抗D定型驶，如摘果全滔部阴狡性方耗可认撑为该袖被检麻者为Rh阴性帮，否央则，月只要绒有一挡批为驼阳性纱，则苏可认慈为是Du型。若D人群数作为霸献血盐者按玩照Rh标D阳性索对待杂，其城血液吩只能掠给Rh阳性缘瑞受血察者输抢注；叮作为先受血互者按姑照Rh答D阴性总对待选，只凭能接地受Rh浴D阴性伴血液熄。19红细然胞血胜型检搜测三、叉不规他则抗培体筛滴选和口鉴定一、概念誓：不废规则煤抗体撕是指驻血清比中抗-A、抗-B以外柜的其大他血歼型抗网体，续也称梳意外垄抗体廉。不规委则抗胀体包贯括同附种抗砍体和控自身胶抗体桂。自身献抗体胀：受晚血者散体内尤产生历的抗低体，胖针对湾自己德本身值的红帽细疏胞抗即原。同种铸抗体怪：不术只针蒸对自取身抗虹原，宽也会伞同种敬异型棍抗原峡发生唉反紫应爆。20红细叛胞血台型检些测三、凡不规迹则抗饮体筛致选和傍鉴定二、坐不规备则抗单体的唱筛查寒方法抗体充筛选称试验余的原毫则是背让受顽检的趋血清遇与已削知血灾型的遗试剂沟红徒细胞仙即筛些选红庸细胞处起反铃应，锄以发经现在37拍℃中有读反应影的抗码体1.盐水陷介质朗法：岸主要锯用于Ig发M类抗盛体的罚筛查拘。座优篮点是附：方仅法简希单、丑操作芒简单深、成轧本低仰廉。缺点讲是：卖灵敏船度低2.聚凝如胺法智优点鼻：与化水盐榜介质色法比升灵敏豆度有楚所提色高。3.抗球举蛋白所试验怕：缺堆点：糟操作恋繁琐摊、工伶作量济大、畏耗时腐等。4.酶法男：能宅暴露绝隐蔽京抗原鲁，增师强一振些稀既有抗敬原检灰测。玩但可倘能情会逗破坏执有些仙抗原班，影卫响检像测。挤目前顾临床奸是已冒不用例。21红细饼胞血长型检蜜测三、画不规侨则抗晨体筛昼选和撇鉴定5.微柱浪凝胶阳卡式僻检测躲法三、除不规垄则抗亡体的乎鉴定抗体酱筛选笨试验邮用的河试剂候筛选玩红细命胞，这通常私是2或3个人馒份的O型红播细胞菜成为歼一套堪试剂训，每死套试铅剂筛螺选红另细胞跟中至能少有脱以下业常见蕉的抗姓原：D、C、E、c、e、M、N，条哑件不当足的饥实验圣室不龙一定帖具备Lu鼓a、V、Cw、Kp托a、Js月a类的仓抗原法。一旦城抗体雅被检傻出，蔑应作刑抗体匆鉴定躺试验纲，以跃确定敢其特的异性壤。抗骑体鉴转定实位验包究含以尤下主矮要内捐容：(1料)自身马细胞仆检查：观浸察患净者(受者)的血会清与纳患者(受者)自身平细胞折的反订应情依况，鹊确定跨血清夺内是翻否有卷自身淹抗体慕或自饰身抗纹体和牛同种胞抗体壶二者娇同时戴存在跌。(2禁)普红韵细胞：使谢用试衬剂细可胞中毫的谱哀细胞辽，应述用各理种抗炼体检男查技菠术，堂检测秤患者启的血辩清，喊确定否其抗危体的费特异漏性。22红细嚼胞血尝型检歼测三、触不规区则抗和体筛巾选和肾鉴定抗体起鉴定术试验该结果煎的解小释及旨处理控：1.与谱厕细胞惑反应廊明显敏，确农定为创单一主抗体绝或无映法确西定为败单一湿抗体读，应择加以幼鉴别宵。2.与谱鸣细胞抱呈弱亿反应务，结建果不志明确（1）分毅析结册果：①悼是否片符合记剂量德效应②勤谱细寄胞是逼否新家鲜（2）改捆变试只验方救法：①使帝用高却灵敏弯度的西方法鲜重复柳试验②添仍加试泳剂后波重复窑实验③带头抗体裹增强势后重驾复试约验23红细抬胞血阔型检溉测三、傻不规桥则抗膀体筛竟选和币鉴定3.与所总有谱婆细胞辜反应宗，自忧身细率胞阴阅性（1）强种度不坛一致启：可板能存坚在混抵合抗码体（2）强松度一落致：抗海体可撤能为棵专于O细胞恶反应品的抗栋体（如录：哄抗-I、抗-H、抗-H恢I）可为能针孙对高较频抗得原的邀抗体可益能针苗对谱怎细胞业的抗幻玉体4.与所荒有谱黄细胞剃反应光，自吐身细锯胞阳跪性（1）存泉在自舰身抗例体（2）同经种和安自身幕抗体众同时弯存在（3）冷缎凝集烟：在赢冷凝郑集素呈的作斗用下击存在强凝集别红细届胞24红细耽胞血锁型检尿测三、屠不规走则抗低体筛亏选和础鉴定（4）假会凝剂独：在荷干扰楼因子践的作创用下享一可伍造成治红细摔胞假驶凝集（5）酶响引起册的多回凝集（6）补呀体的饼影响6.与谱蜂细胞计不反耍应，序自身伶细胞心阳性可能膀是自拘身抗播体或C₃阳性25红细嗓胞血围型检刚测三、苦不规任则抗悼体筛倦选和赢鉴定四、溉抗体双筛查植和鉴轮定的点影响帮因素1.抗体兼筛查呆和鉴吊定细黎胞的且质量筛跃查细请胞不观包括懒低频津率抗些原，盾不能腔检出跪低频验率抗脚原。谱采细胞景：用挖于抗持体鉴译定的跨试剂献红细鞭胞。在接选择侵不规卵则抗跌体筛仓查或竿鉴定墓细胞村时，桑应符欧合本赢地堡区来不规镇则抗植体分应布的蚕特点貌。2.试验冠方法划法Ig解M抗体两在4℃，凝拿集强誓度明代显大静于室治温，37养℃会有伏减弱3.抗体释的特握异性饱抗体柔筛查玩试验轿为阴蚕性，祸并不政意味问着被练检血悠清中李一定招没有扫抗体筛至查细肝胞漏喷检AB蚁O亚型浴抗体狼（如旋抗-A₁）26红细输胞血忽型检吗测三、殃不规剪则抗讲体筛思选和锯鉴定五帜不规好则抗携体鉴属定时眉遇见该的的瓣问题1.不规范则抗猜体筛娘查阴超性，攀输血绳后发蚂现溶容血（1）交麦叉配伯血假聚阴性（2）抗榴球蛋际白试象验不欣规则撕抗体村筛查凑假阴拜性试政剂保扮存不天当勤洗膏涤不男充分实榨验操肝作④红墓细胞络浓度雾过高蝇造成逃凝集己减弱唯或红细胞犁浓度党过低阀造成撑凝集井不易睛被观晌察到2.不规戏则抗席体筛预查阳子性，宗抗体圈特异伟性难招以鉴避定（1）抗拿体筛愧查假嫌阳性液：①离糕心不嫌当②征试管拆污染③硅捕胶管观引起巩的凝罗集（2）谱荐细胞亿单一皆：应肺采用3个以枯上不浆同供土应商浙的谱醉细胞螺系，庆排查寸抗体惠的特粘异性席。27红细疲胞血镜型检疾测四、销交叉耻配血举试验（一涛）要林求和梦内容交叉货配血宜的要避求：主侧慨配血谷要求击：绝对爸不可呆以有火凝集脊或溶桶血现滴象。次测己配血热要求贷：供血妈者血浴清加快受血眯者红茧细胞宏在允泊许范找围内狱，可匹以有当凝集曾现象澡，但户不可宜以有昂溶血。凝集不凝集28红细旅胞血颠型检激测四、炮交叉串配血抢试验交叉待配血缺试验茄的内拢容患者献血者主侧次侧主侧虎配血用患混者血谨清与幅供者红醋细胞幕进行愉试验次测虫配血供血亮者血贫清与元患者红热细胞成进行模试验29红细货胞血咽型检闷测四、导交叉王配血驱试验交叉孔配血肚的目互的交叉艘配血兄试验烟是输躁血前圆必要缩慧的步裙骤，卫主要句是检妄查受硬血者芦血清奖中有角无能饱破坏夕供血每者红似细胞乞的抗笼体。丈主要廉目的却是为腊了防存止输庄血后爆产生驱溶血例性反晕应。尽可暂能确勤保对知人和烛一个蚁病人追来说惧，输嘱了供好血者垒的血闲不会陵引起呆有害爽反应面，并荐且使哗红细仆胞在带输注用后能舟保持剪最长披的存厅活时四间。30红细锣胞血怪型检宰测四、郊交叉蹦配血轮试验（二修）结宗果的俗解释决及处暴理1.抗体描筛查发阴性数，交抢叉配柳血相明容：绝大巨部分喝标本爪抗体退筛查贷阴性碰，交猫叉配脖血也哑是相裂容的灭。2.抗体填筛查调阴性稿，主缸侧交厘叉配雨合试螺验阳耗性（1）复贷查血谅型（2）主樱侧凝港集类B抗原（3）血蜓清中京可能傻含有泪一种AB乓O抗体花，必广要时险可以役做AB谦O亚型稿鉴定31红细练胞血鼻型检艘测四、值交叉嚼配血寨试验3.抗体止筛查部试验伞阳性灵，主捐侧交蔑叉配吗合试骨验阳疮性（1）自旅身对弱照试宜验阴伐性：钟受血净者体钱内有缝同种许不规板则抗壁体。（2）自隶身对谣照试绍验阳储性：桌受血扛者血最清内领可能福有自店身抗唤体或同时化存在浅不规辅则抗视体。（三盟）影滋响因市素①离子荐干扰②温唇度③操耐作不神规范④离心枣不当32红细皇胞血蔬型检渗测第二骂节宣盐水匆介质站实验头技术盐水沸介质兔试验奇技术内常用会于血议型鉴让定、秒血清司中Ig豪M类抗狡体的萝筛查盒和鉴提定、备盐水采介质夹的交逃叉配貌血等派。基本箩方法1.平板连法激用率于AB钻O血型克和Rh厕D抗原偷的定杏型特点镇：简惰单、睁快速执，但孟易污上染环筛境。2.试管妹法支为唱定型葵试验恩方法校，也键可于很半定李量试纱验。豪是输舱血前检摄验最皇常用虾的试负验方宏法。特点烤：简搏单、踏快速勺、易菌学，家结果淘准确虫、可造靠。3.微孔插板法肉为定诞性试楼验方韵法。33红细油胞血玻型检架测第二丝式节刮盐水园介质意实验境技术盐水讨介质记配血锣方法患者献血者主侧次侧离心看结妈果阳性阴性34红细瓣胞血晌型检俩测第二属节铜盐水鸽介质歼实验牛技术35红细交胞血护型检浓测第三柿节丸酶津处理枣实验孩技术原理搏：在罗酶的醋作用秆下切焰断带裹有负务电荷蛙的羧知基基太团的细唾液基酸，胁降低Ze每ta电位睁，缩泡短红故细胞魔之间纹的距巴离。果增强Ig戏G抗体某对红争细胞耀的凝如集。常用奏对的若酶：灰菠萝差酶，纽奉无花絮果酶拿，木某瓜酶36红细醉胞血骄型检携测第三泉节庙酶竖处理坟实验可技术酶介去质配丈血方先法患者献血者主侧次侧主次减侧均加岁酶酶上海市血液中心血37红细追胞血坊型检摘测第三券节典酶生处理棵实验膀技术37北℃水浴忍30洲分钟37钞℃离心看结佳果阳性阴性38红细吓胞血拢型检转测第三齿节随酶构处理仆实验栗技术结果甜的判锐断（1）阳通性对桃照管纺凝集绘，阴跌性对铃照管呈凝集哑，被浅检管佛凝集婶为阳性，避不出旷现凝潮集判牛定为皱阴性旺。（2）阳乡丰性对括照管摆不凝欺集和架（或威）阴蚊性对辟照管拐凝集押，实籍验失败分现析原印因，居重新便实验略。39红细村胞血裕型检共测第四击节抗沈球蛋什白实圾验技臣术一、豪基本唤原理抗球梨蛋白谨试验轻（Co腐om苏bs实验帅）主蠢要用绪于检布测血围清中传的不窗完全危抗体东如：扑Ig杰G、宣Ig昨A和其（或界）补毕体如鸟：C撒3、谈C4崇。在盐俘水介柜质中婶，不呀完全店抗体贪只能顷致敏芽红细绵胞，坡而不灰能使泉红细摄胞出摸现可顽见的替凝集些反应鸡，加闪入抗践球蛋绪白试颤剂后睁，抗桌球蛋馒白分丝式子的Fa血b片段灿与红骨细胞婆表面难的受贝体结变合，花而产铅生红背细胞出凝集债，因犹此采称用此座方法受可以梢检测依出血图清中普是否贤存在剩不完阅全抗牢体。40红细弄胞血植型检披测第四奋节抗弦球蛋陡白实毙验技稍术抗球斤蛋白堂试验南原理息图41红细扣胞血筑型检喷测第四术节抗魄球蛋搏白实锋验技单术二、择分类撑及应齿用抗球蛋白试验直接间接致敏红细胞的不完全抗体、补体血清中的不完全抗体应用HDN的诊断、AIHADE的诊断、药物诱发型溶血病的诊断交叉配血及血型鉴定、器官移植、等42红细系胞血艘型检前测第四俯节抗发球蛋竟白实滴验技肚术抗球漠蛋白权配血丘方法患者献血者主侧次侧37℃37℃水浴30分钟三洗43红细运胞血公型检织测第四酬节抗夸球蛋罢白实僚验技笛术抗球职蛋白洲方法特配血细方法加抗球蛋白抗球蛋白试剂上海市血液中心血离心看结衡果阳性阴性44红细迹胞血险型检扮测第四池节抗怠球蛋南白实烟验技讲术三、结果呀的判军断直接丈抗球被蛋白肚试验田：（1东）阳捕性对侄照管数凝集附，阴呼性对钟照管哄不凝租集，柳被检铃管凝言集，判定泉为阳邻性。（2舍）阳蓬性对肢照管糠凝集遮，阴转性对签照管捉不凝步集，柔被检粗管不顾凝集，聪须做卧阴性死确认吗后判兵定结榆果。（3朗）阳庸性对最照管姨不凝假集和乱（或般）阴爬性对保照管辜凝集钥，结听果不可信腔不能沙发出啊报告枣，分顾析原染因后特重做禽试验桑。45红细资胞血筹型检扯测第四把节抗悄球蛋谜白实固验技悲术间接杆抗球湖蛋白智试验燃：（1证）阳布性对胖照管竿呈现狐凝集霜反应布，阴渣性对益照管桥不呈布现凝坦集反再应，踪蝶被检艳管呈征现凝毫集反逃应为凡阳性怜结果预，表学示被汽检者营血清中筑含有牛抗体辱。（2袍）阳伙性对能照管烂不凝偿集和喊（或谁）阴芹性对虽照管呈出现比凝集薄，实华验失添败，稳分析搭原因肾重做才试验尽。46红细蛇胞血啄型检动测第四勉节抗遍球蛋弄白实索验技略术四、注意剂事项（一疗）直泥接抗蚁球蛋盼白试始验1.妥抗童球蛋破白血加清应港按说绕明书梯使用话最适枯稀释棒度，担避免摩出现对前带掠现象透而误宜判为域阴性寄。2.喝结僚果判晴读时婚应转闻动拖果拉，裕细胞洒扣摇争散后围，如守肉眼谎未见混凝集菠，应骂将反醋应物另涂于调玻片咏上，牛在在怠显微烂镜下帝观察挺确认复阴性够。3.廊被讲检标弟本需梁用E酱DT眼A抗灶凝，旧避免户出现劣假阳李性；挺标本倒不宜夺久置抬，防希止红旨细胞朋上已再致敏厨的抗敬体游凳离到乳血浆呆中，责造成碌假阴示性或浆阳性态程度飞降低栏。4.捏红劫细胞省表面西存在针蛋白滑质就顽会与童抗球哲蛋白幻玉结合技。因达此受枕检红棋细胞香一定草要充艰分洗真涤，欣除去李血清歉蛋白杀，避成免假也阴性个的产暑生。5.绍如双需进窗一步汁分析拌体内蜘致敏倘红细寺胞的惧免疫椅球蛋姻白的阅类型刷，可覆以分鸽别以鸡抗I各gG桥、抗段C3券单价筒抗球蜜蛋白捆血清丢进行械试验识。47红细快胞血驴型检胃测第四态节抗朽球蛋屈白实旱验技拢术（二锈）间接抗抬球蛋给白试杯验1.蒜红净细胞失洗涤主过程炒中不任宜中拐途停誉止，值每次访加生拒理盐萍水前旺要是夺红细槽胞完沾全悬鞭浮；潜洗涤抬过程析中防塔止交吉叉污庆染；至应充井分洗耻涤，戴避免笋残留昼抗体犁部分察中和及抗球师蛋白粥试剂混而产瓣生假桨阴性范。2.榨振竖摇试班管不消宜用山力过搂大，探避免帐将松今散红涂细胞努凝块际摇散筒，使树强阳谷性结佣果误愉判为温弱阳坦性结贷果，仙弱阳蝇性结仍果误吩判为兄阴性杰，对密于弱言阳性鉴结果破观察宗细胞岩扣是龙否出歉现缺茄口来馅判读蹈。3.蝇离妇心后怎应立述即看沈结果书，不或宜久附置。4.侧致异敏时扬间：杜30付-6社0分酿钟，岛不超室过9栋0分利钟48红细腾胞血丛型检病测第四举节抗形球蛋研白实猛验技伍术三、白抗球汪蛋白洋实验辛的影抱响因咏素一、赢亲和棉力亲和供力常按数越倦高，淡抗原拿抗体走反应船致敏凭阶段坡的抗日体水峰平越已高二、枕孵育饺时间堵和温萝度概3抹7℃孵汁育3美0-念60启分钟三、侨离子姜强度在单训纯的济离子花强度胞溶液粘中，害可增威强抗扩体的奏结合旷作用麻，孵欺育时间别将缩宴短到15～30分钟四、欧抗原托、抗简体的犹比例2滴哭血清跃对1损滴2典％～5施％的红竹细胞镜悬液五、丸洗涤应尽碧量去陡除上稠清液学，降昨低未抖结合送的免混球蛋杏白。六、炭体外舱补体肿致敏七、祥红细慈胞自丢身凝欲集49红细富胞血烟型检桂测第五男节拒聚宇凝胺棵介质修实验轿技术聚凝量胺实过验技缸术是切一种梢快速箱、简势便检础测红逃细胞喂不完旨全抗吩体的剑方法愚，可浆用来吸检测议Ig倦G抗发体，走但I寻gG苏抗体毯的抗厦-K罚抗体均除外椒。一、海实验摩原理凝聚舰胺（姜po飘ly除ma爽tc嫂hi躺ng读）法夸首先锯利用琴低离魔子介弄质降拦低溶药液的巩离子助强度迅，减鸦少红愿细胞榆周围披的阳湾离子桨云，毅促进践血清杀（浆森）中场的抗散体与州红细慢胞相联应抗虽原结摄合，涂再加材入带右亚电震荷的丝式高价凝阳离毁子多存聚物举-凝惑聚胺草溶液岁，中段和红历细胞棕表面叨的负宅电荷璃，缩下短细约胞间即距，掘形成押可逆桥的非源特异捷性聚充集，宣并使昂Ig聋G型禽抗体壳直接彩凝集眨红细遗胞。遥加入朵中和坚液后非，仅寨由凝邀聚胺尽引起词的非粥特异迹性聚递集，剧会因谜电荷丧中和菜而分爆散，屯而由搁抗体言介导娇的特膝异性截凝集钩则不斗会分珍散50红细蚂胞血谦型检从测第五肝节堪聚焦凝胺隆介质更实验奇技术聚凝耐胺(Po窄ly站br矿en服e)配血卖方法患者献血者主侧次侧室温放置1分钟主次侧均加聚凝胺Polybrene上海市血液中心血51红细眨胞血窜型检改测第五帖节正聚膝凝胺便介质挑实验块技术聚凝喝胺(Po姻ly诉br末en央e)配血境方法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集重悬液上海市血液中心血主次侧均加重悬液看结果阳性阴性52红细蜘胞血侧型检咳测第五序节族聚泪凝胺珠介质床实验驻技术二、仁应乞用范级围血型辣鉴定马、抗舟体筛堆查及征交叉谈配血逼试验三、斗特点锦灵傍敏、杏速度帽快、啄准确按、操尼作要凡求高唤。四、夜注意什事项1.长不疼能用驱含有外枸橼径酸钠色和肝采素抗锅凝标庄本2.撞用牲聚凝驻胺试岔验技派术交夏叉配展血，成出现课不配砌合时唉，要思用抗兄球蛋五白试优验重投做，乌结果提不一晨致时嚼，以求抗球报蛋白脉试验障为主手。3.鸭聚凝月胺只唐能是铲正常逐红细声胞发某生凝创集，温对缺夏乏唾割液酸昨的细苹胞（如忽：T言细胞匹及B抹细胞败）无思作用尿。53红细寒胞血智型检暗测第六增节旷微昌柱凝迟集试言验技能术一、句实验池原理凝胶万具有亚分子托筛效犁应和虹亲和院效应慎，在椅微柱绘凝胶但介质型中红水细胞存抗原搏与相孔应的值抗体微结合搂，利衰用凝驼胶的酒空间药位阻懒经低蛋速离狸心，鲜凝集供的红通细胞苹悬浮稿在凝泼胶的付上层其，而游未和白抗体允结合倚的红梢细胞木则沉卸于凝看胶的找底部搬（管挎底尖因部）倚。54红细橡胞血鸭型检悼测第六淋节桂微犹柱凝慨集试捷验技掩术一、微柱取凝胶管试验爽原理将红缘瑞细胞搅和抗崇血清盈加在旅凝胶塘上部携反应梨，离席心后斑观察连凝集什的红降细胞本，被贼阻挡具在小性柱中针凝胶坊的上传部或项中央撕，证勤明发传生凝蒜集反筑应，忽判断岁凝集感反应默阳性,游离盗的红仇细胞收，被炭挤过示装有闸过滤裕介质石的小粪柱，避而到赌达小盾柱的遇底部羡，证联明未卵发生摄凝集越判断券阴性.操作乖及结慰果的抄判定55红细虹胞血负型检绒测第六宵节厘微垦柱凝虫集试抚验技如术二、窗应用1.鞋抗球炊蛋白宋试验电直惠接抗筑球蛋翼白试议验和坦间掠接抗初球蛋母白试离验。2.录AB痰O血初型鉴架定顿可做董单纯跑正定错型，虎也可诵同时育做正盛反定锄型。3.阁其他威血型鸽系统棚检测理如R纺h其燥他抗山原（免Cc说Ee胜）定贱型三、董特征扭及优沫点1.汉简便2.压准确档结舅果清绸晰明框确岩，可魂重复嚷性强甲。3.笼敏感4.俱结果芹保存坑时间长长5.飘标本浆用量催少6.昂标准击化7.检安全56红细掩胞血婚型检轰测第六始节雀微雅柱凝框集试冬验技钳术四、系微柱颜凝集颤试验先中可哨能存勇在的统问题1.昏抗勇凝剂炮不足限或不管含抗壳凝剂嫩的血刻浆标拉本常波出现娃假阳先性。2.挎实贼验室毙温度平较低在时，浆易出秆现假蔬阳性嘱结果续。3.货抗始原、辅抗体直过少祸、过诊弱；论抗原渣、抗刷体比酷例不负当时生易出躬现假驼阴性曲。4.切离简心力供过大乒时，申容易茄使弱多阳性掩成为晨阴性枕格局煌。5.众溶血怎反应利：①反紧应液棍是低仙渗溶诵液②温菜度过卵冷或蓄过热③红株细胞钉或抗剂体被闷污染④其他佣可使撇红细系胞破欧坏的照理化尸因素57红细瓦胞血涂型检木测第六纯节利微停柱凝脖集试移验技烟术五、贸局限委性与抖发展子前景微柱纲凝集乞抗人旋球蛋捆白试弟验及羞微柱辣胶免旁疫检芽测技奏术的割本质挽是血视凝试驳验，穗这理以论上斧位制量备抗稠原抗皇体包崇被的熊红细秧胞为惨指示晌红细贞胞，摸以间阿接血样凝试雹验来捐检测竖红细榴胞抗资原抗失体以蓬外的护其他学血液芳红细鸽胞、汽中路侄标志神、病哭原微辅生物慎，以羊及人夏体中末其他用可溶座性抗毒体，论如对兴药物岁抗体购、自店身抗瞧体的薄检测虫等提雅供了逢比传引统血昆凝检蒙验更供为敏悄感、欺准确块、简朴单易慌行的颜方法捕。微柱拣凝集老试验碰技术言奖在涝临床团各个采领域帽有更波为广棚阔的隆发展圣。58红细顷胞血数型检躁测第七地节桶吸妻收放逼射试辉验一、腔概念1.黄吸收斥试验穗:抗嘉原与粱抗体范的结盯合是脑特异甩性的厘，因否此具贫有抗货体活让性的虎血清酒加入予相应似抗原加后，掩抗体侄的活蹲性下燥降或顶消失筑，这质种作禾用称圾为吸煮收试背验。2.唯放散增试验堤是抗研原与贫抗体决的结榆合是音可逆勾的，毫在物秋理条上件改桐变时吧，抗泻体又欢会从反抗原箭抗体段复合淹物上贵分离恨下来水，将访抗体庆由抗峡原抗贫体复烟合物粥上分沿离下苹来的鸭试验翻称为赶放散仰试验59红细加胞血糠型检泉测第七标节袋吸雹收放膝射试袋验（一溪）相务关的复概念抗体渔可与睁相应风的抗可原在润适当电条件题下可纯发生掘凝集貌或致贸敏，烫这种嘉结合份是可别逆的排，如似改变那某些塘实验混条件堵，抗稻体可鲜从红享细胞佳解离炎下来犯，然典后检鸭测解里离下孕来的贱抗体源。这穿种实含验称祝为吸娱收放君散实想验。※冷自监身抗乘体：理论胶上讲袭凡是37贪℃与自肚身红袋细胞救不反草应，链而只掌有在比低于37龙℃环境惨下才悦能和司自身触红细回胞反符应的撇抗体浅均可肚称为恋冷自附身抗闯体。岩实际渡上，冤冷自痕身抗飞体大沃多数稿只能禽在很盛低的纵温度附下(例如4℃方)与自掌身细君胞反贤应。※温自明身抗鸭体：温自抖身抗礼体是啄指在37料℃条件戴下能邪和自搂身红尽细胞冶反应挖的抗渠体。束当患涨者血提清中它含有获温自探身抗灰体时驼，患椒者一拉般均叔有些姓贫血器或溶堆血症青状。守温自葛身抗持体可疤分为旬两类:大多图数情繁况下框为lg责G类温计自身北抗体各，极休少数背情况狂下也蜂会存槽在Ig巾M性质控的温踪蝶自身勒抗体。60红细羊胞血绍型检戴测第七躺节掘吸堵收放叛射试北验（二慨）吸握收实浓验冷抗搞体在4℃反应疮最强俭，通抬常用制冷吸甘收技病术（芹自身删抗体嫂用自姓身红繁细胞缩慧吸收芦；同砖种抗昨体用忍对应策红细泥胞吸育收）宵。Ig乔M抗体连通常惠在4℃条件哑下比22鼠℃或37卫℃更容寄易吸依收，曲且容检易完端全吸徐收。Ig立G抗体船通常周在37岂℃的吸够收效盲果最黄好，零但难挣以完愚全吸国收。1.冷抗庄体吸鞋收实昂验应用扫范围车：①自身呢冷抗票体的灭吸收厨②其姻他冷拣抗体笑的吸身收2.温抗盯体吸择收实男验应用香范围农：①自身雅冷抗债体的读吸收恒②其麻他冷牺抗体巷的吸气收61红细据胞血篇型检阿测第七挥节堵吸购收放规射试渡验（三朵）放盼散实沙验放散琴实验矩是把紧结合虾到红蹈细胞蜻膜上战的抗跌体解重离下偶来，愿用于副其他茄目的翁。通倍过放蛙散实辱验得朵到的霉含有爬或不胆含有仿抗体彼的溶宫液称竞为放淹散液君。※放散顽的目墙的：得到喷红细疲胞上祥致敏缴的抗绞体或刺没有同抗体恐吸附斤的红倚细胞速，前旨者得栏到的晒是自速身抗穿体，企用于达自身眯吸收爱；后梢者得市到的厦是红博细胞尤，用爷于血抛型鉴故定和氧交叉珍配血。※放散点的方双法：热放盈散技倾术、盏乙醚免放散陈技术谅、磷洲酸氯戒喹放除散技曾术、歇冻融作放散燃技术罪、柠尤檬酸盲放散初技术排、二霜甲苯蜻放散咽技术皇等。62红细闹胞血姜型检本测第七戒节当吸缓收放士射试朱验1.热放票散技劈燕术§应用战范围AB积O抗体遭的放丝式散（陆新生问儿溶循血病脆实验管）§注意跌事项温度绑过高贸，抗大体可份能变茶性；坝温度樱过低兰，容结易使抗体中从红辜细胞植上解奇离不耍完全2.乙醚斯放散沾技术§乙醚且为有堡机溶保剂，乞可以可破坏辱红细模胞膜对，解题离Ig节G抗体阅，该故方法盒制备汁的放待散液槽，抗穷体回趋收率枪高。§适用朝范围主要允用于辆红细跑胞上假的各布种Ig躺G抗体禁的扩孕散。3.磷酸鼓氯喹天放散倘技术§主要设用于涌得到歪没有冤任何势抗体过附着磁的红械细胞肺。此烤方法僻不能悲将补钓体从陡红细抹胞膜叉上解俱离下远来。63红细漂胞血胖型检所测第七动节柿吸谅收放暗射试萄验4.冻融糟放散散技术§适用较范围AB景O抗体贼的放接散，签如新蔽生儿不溶血百病的本相关棕检测跳实验截。5.柠檬装酸放强散技零术§适用归范围薯用于溪解离贩红细勒胞膜袖上致核敏的Ig浆G抗体岂对红北细胞徒进行焦抗原的鉴触定，牛但Ke旨ll系统目的鉴亭定除狡外。§注意君事项划该方万法可返破坏Ke怀ll系统签抗原畏，特浙别是K抗原贸，因吨此本简方法放散尝后的伯细胞废不能壶进行Kl淹l系统馋定型春试验陶。64红细唐胞血站型检典测第七肯节差吸攻收放错射试访验（四更）吸井收放对散试天验的盛应用☆罗证实平存在版于红健细胞威上的寺若抗拨原☆分捉离、聋鉴定阿混合漫液体☆除凭去血蕉清中缩慧不需射要的别抗体☆浓伏缩低产效价瘦抗体☆核贞实抗况体特坡异性☆利姓用吸季收放刊散技贵术鉴修定引衔起新垮生溶璃血病塔和免掀疫性震输血飘反应唯的抗白体☆研夫究鉴只别免跳疫性辅溶血知性贫绒血的金抗体65红细允胞血疗型检少测第八率节登凝排集抑忽制试挥验一、概述哄：抗体朽能与痛有相明应抗茄原的响红细坦胞发扩生特坛异性帝凝集贿，体沙液中储的可莫溶性健抗原着物质恩能与衫该抗们体发蚂生特纱异的商中和寻，抑攻制了炸抗体魄凝集颂红细笼胞的证作用加。用密这种缝可溶是性物冰质来号抑制兰抗体发与红驶细胞副凝集镜的试厦验，肯称为千凝集勺抑制改试验掠。常年用于亭AB汽H或瞎Le锹wi成s分县泌状壤态的安检查雨，帮膏助A称BO蛮亚型炕的确搏认以蚊及特善殊情处况下塔（红桶细胞策标本旅完全俭溶血姿）途AB旬O血悠型的发鉴定萌。66红细鱼胞血义型检畅测第八寄节积凝看集抑怖制试舒验二、波抑制圆物处责理及猎抗体胖标化☆收颜集液蝴体唾液忧标本拉作为慕抑制欧物，挎煮沸锣使酶糕失活鉴。☆标质化人蔑源抗告血清抗体茂需通胞过倍读比稀钉释，警找出顺可也战