月季的花药培养详解

请拿出你的38号导学案，课本，双色笔(sèbǐ)和典题本，还有你的激情！今日赠言：当一个人先从自己的内心开始奋斗(fèndòu)，他就是个有价值的人。

第一页，共三十六页。花中皇后月季又称“月月红”，自然花期(huāqī)5至11月，开花连续不断，通常扦插就可以成活。

第二页，共三十六页。编辑课件课题(kètí)2月季的花药培养第三页，共三十六页。编辑课件【课题(kètí)目标】1.识记被子植物花粉发育的过程。2.通过学习花药培养的基本技术(jìshù)，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力。第四页，共三十六页。【课题(kètí)重点】1.被子植物花粉(huāfěn)发育过程。2.花药离体培养过程。第五页，共三十六页。【课题(kètí)难点】花药离体培养(péiyǎng)过程。第六页，共三十六页。【导学案(xuéàn)反馈】1.优点：书写认真，整体完成情况较好。2.不足：①探究能力(nénglì)有待提高

。②解决实际问题的能力较弱。③部分同学预习不充分，答题欠思考。3.改进措施：认真研读课本，理清思路，注重分析，养成好的自学习惯。第七页，共三十六页。小组优秀个人得分1组2组3组4组5组6组小组优秀个人得分7组8组9组10组11组第八页，共三十六页。知识(zhīshi)回顾单倍体育种(yùzhǒng)的过程？花药(huāyào)离体培养（N）单倍体植株（N）秋水仙素处理，使染色体翻倍植株（2N）特点：1明显缩短育种年限2后代植株都为纯合子。正常植株（2N）第九页，共三十六页。编辑课件花的结构(jiégòu)花托(huātuō)花萼花瓣雄蕊(xióngruǐ)花药花丝雌蕊柱头花柱子房第十页，共三十六页。编辑课件花丝(huāsī)花药(huāyào)：囊状结构，内有很多花粉（一）被子植物(bèizǐ-zhíwù)的花粉发育1雄蕊一、基础知识2花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞.第十一页，共三十六页。编辑课件被子植物花粉(huāfěn)的发育过程小孢子母细胞减数分裂4个小孢子(小孢子四分(sìfēn)体时期)小孢子(单核居中期)小孢子(单核靠边期)小孢子生殖细胞核+花粉管细胞核有丝分裂（花粉粒的双核期）生殖细胞将再进行一次有丝分裂(yǒusīfēnliè)，形成两个精子第十二页，共三十六页。编辑课件小孢子母细胞（2n）小孢子时期（n）四分体时期（n）双核期4个生殖细胞核（n）4个花粉管细胞核（n）4个生殖细胞（n）4个营养细胞（n）4×2个精子(n)有丝分裂减数分裂单核期（n）有丝分裂第十三页，共三十六页。编辑课件注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子(jīngzǐ)在花粉管中形成）4个小孢子减数分裂有丝分裂4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有丝分裂8个精子1花粉母细胞③②三核花粉粒：有些(yǒuxiē)植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个花粉管细胞核和两个精子。例题1：两个(liǎnɡɡè)精子和花粉管细胞核的基因型相同？2NNNN第十四页，共三十六页。编辑课件1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（）A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果C、被子植物的花粉的发育要经历四分(sìfēn)体时期、单核期、双核期等阶段D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央BD注：花粉(huāfěn)母细胞经减数分裂形成4个单核花粉(huāfěn)粒，每个花粉(huāfěn)粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉(huāfěn)管细胞核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。第十五页，共三十六页。编辑课件雌蕊(círuǐ)的结构第十六页，共三十六页。编辑课件（二）产生花粉植株(zhízhū)的两种途径①②移栽(yízāi)花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常(fēicháng)相似的结构，发育过程亦与合子胚类似原因：培养基中的激素种类及浓度配比第十七页，共三十六页。编辑课件部分花药(huāyào)通过胚状体途径形成小植株烟草(yāncǎo)花药培养胚状体发育(fāyù)途径第十八页，共三十六页。编辑课件愈伤组织(zǔzhī)转接种到再生培养基愈伤组织分化(fēnhuà)形成再生植株水稻(shuǐdào)花药培养愈伤组织发育途径部分花药产生愈伤组织接种在平板上的水稻花药第十九页，共三十六页。编辑课件1、材料的选择不同植物的诱导成功率不同.同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响.（一般选月季的初花期）合适(héshì)的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间）2、培养基的组成（MS培养基+不同比例的植物生长调节激素）此外，植株生长条件、材料(cáiliào)低温预处理、接种密度等(三)、影响花药培养的主要(zhǔyào)因素注意：选择最合适的花粉发育时期:单核期①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎；②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难；③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，微生物少，易消毒。第二十页，共三十六页。编辑课件实验(shíyàn)操作一、材料(cáiliào)的选取二、材料的消毒三、接种和培养第二十一页，共三十六页。编辑课件（一）材料(cáiliào)选取2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。方法：醋酸(cùsuān)洋红法(将染色体染成红色)

焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。1、从花药看：月季的初花期(huāqī)从花粉看：单核期

从花蕾看：完全未开放的

花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上→焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成蓝黑色）第二十二页，共三十六页。编辑课件月季(yuèjì)花药培养时的花粉粒最好是（

）A、四分体时期B、二核或三核花粉粒C、单核期C第二十三页，共三十六页。编辑课件（二）材料(cáiliào)的消毒5、无菌水冲洗3～5次

花药的外面有花萼、花瓣保护(bǎohù)，通常处于无菌状态1、花蕾用体积(tǐjī)分数为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟（质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）第二十四页，共三十六页。编辑课件为什么花瓣松动(sōngdòng)会给材料的消毒带来困难？

答：花瓣松动后，微生物就可能侵入(qīnrù)到花药，给材料的消毒带来困难。

为什么花瓣松动会给材料(cáiliào)的消毒带来困难？讨论：第二十五页，共三十六页。编辑课件（三）接种(jiēzhòng)和培养

1灭菌后花蕾，要在

下除去(chúqù)萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。3通常每瓶接种花药(huāyào)

，温度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2在剥离花药时，要尽量

（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底

，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。

4进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化无菌条件不损伤花药去除花丝7-10个25℃不需要光照需要光照主要原因是花粉管核和生殖核融合造成的第二十六页，共三十六页。编辑课件植物组织培养技术(jìshù)与花药培养技术(jìshù)的比较项目

植物组织培养

花药培养技术相同点1、培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。2、都经过了脱分化不同点1、离体培养的外植体为体细胞。2、有丝分裂(yǒusīfēnliè)的过程，染色体数量不变。1、花粉是生殖细胞，得到的单倍体植株，弱小(ruòxiǎo)且高度不育。2、秋水仙素处理，染色体加倍，恢复正常的染色体数，为纯种。第二十七页，共三十六页。编辑课件课题成果(chéngguǒ)评价一选材是否恰当(qiàdàng)二无菌技术是否过关三接种是否成功人工(réngōng)种子：胚状体/顶芽/不顶芽等+人工(réngōng)种皮+人工(réngōng)胚乳课外知识第二十八页，共三十六页。编辑课件练习：小麦高杆（D）对矮杆（d）为显性，抗锈病（T）对不抗锈病（t）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体，要获得矮杆抗锈病的良种，可用杂交育种和单倍体育种法，步骤(bùzhòu)如下：

高杆抗锈病（DDTT）×矮秆不抗锈病（ddtt）

F1：的基因型和表现型

a各种(ɡèzhǒnɡ)配子的种类

a

↓符合要求的单倍体的基因型

良种的基因型表现型

单倍体育种方法的主要优点是

。1、可以明显(míngxiǎn)缩短育种年限

2、后代为纯合子↓P：DdTt，高秆抗锈病DT，Dt,dT,dtddTT矮秆锈病杂交育种花药离体培养DT，Dt,dT,dt↓秋水仙素处理第二十九页，共三十六页。编辑课件内容：1.导学案上不能自己解决的问题。2.合作探究(tànjiū)部分的问题。3.在预习过程中发现的新问题。要求：1.分层讨论，先一对一再组内共同讨论，总结完善自纠成果。2.时刻(shíkè)联系课本，注重效率，及时整理总结，记录组内疑问。3.学习组长和学科组长宏观调控，做好结果反馈及展示点评准备。4.每个同学都要做到：认真、热烈、高效、有序、激情、投入。

分层目标：A层：深入探究，解决所有疑难问题，做好总结与点评准备；B层：高效讨论，总结探究点答案，并找出自己的疑难点；C层：能够(nénggòu)对比区别核心内容，杂交育种和诱变育种。让激情快乐流淌！第三十页，共三十六页。展示基本要求：

①言简意赅；②认真规范;③注重小结；④双色粉笔；⑤注意(zhùyì)效率，可多人展示，务必在6分钟内完成展示内容。展示内容小组方式展示内容小组方式自主探究一