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第三节种子净度分析第八章种子的检验种子净度的概念一、种子净度分析的概念及分析目的种子净度:指种子清洁干净的程度。具体讲:指样品中除去杂质和其它植物种子后留下本作物(种)净种子重量占分析样品总重量的百分率。01目的检验样品各种组分,以此推断该样品所属种子批的组成情况,从而为种子质量分级提供依据。分离出的净种子可以作为种子质量其它项目测定的样品。了解杂质种类及其比例的分析,有助于决定采用适宜的种子加工处理;了解其他植物种子的种类和含量,可以决定种子批的取舍和危害。
二、净度分析方法(1)精确法(严法)样品好种子废种子有生命杂质无生命杂质对好种子的要求比较严格,只有那些从外观上看有可能发芽的种子才列为好种子界线较难划分、技术复杂、主观性大、分析费时,且分析结果误差较大早为国际淘汰第一部《农作物种子检验规程》GB3543-1983中的净度分析就采用此法作为标准。(2)快速法(宽法)样品净种子其它植物种子杂质我国现行的《农作物种子检验规程》GB3543-1995中的净度分析就采用此法作为标准。国际上也采用此法。精确法:净度低而发芽率高。快速法:净度高而发芽率低。净度高,发芽率低,种子批不适于作为种用;净度低,发芽率高,可采取种子清选处理种子净度分析时关键要抓住种子所属种的归属,而不是考察种子发芽力、活力及完整性等质量情况。检验员消除检验净度时同时带有其地质量指标的误区,毕竟其它指标还会另行检测。指检测样品中所指明的种(包括该种的全部植物学变种和栽培品种)符合国家或国际种子检验规程净种子定义要求的种子单位或构造。如武都16号、永良5号两者均为普通小麦,合在一起均视为净种子。1.净种子三、净度分析的标准各个属或种的净种子区分要严格按照GB/T3543.3-1995附录A净种子定义进行。种子单位(seedunit)
:即通常所见的传播单位,包括九类:真种子、瘦果、分果、小花、小穗、颖果、种球、小坚果、类似坚果。禾本科中,种子单位如是小花,需带有一个明显含有胚乳的颖果或裸粒颖果(缺乏内外稃)。凡能明确地鉴别出它们是属于所分析的种,即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的种子单位都应作为净种子(已变成菌核、孢子团或者线虫瘿的除外)。大于等于原来大小1/2的破损种子单位。⑴一般原则Ⅲ.如不能迅速做出这种判断,则将其列为净种子。Ⅰ.如没有损伤到种皮或果皮,则不管饱满度或充实度是多少应均作为净种子或其它植物种子Ⅱ.如种皮或果皮有一裂口时,必须判断留下部分是否超过原来大小一半,超过一半者归为净种子或其它植物种子;⑵一些例外Ⅱ.即使有胚芽和胚根的胚中轴,并超过原来大小1/2的附属种皮,豆科种子的分离子叶也列为杂质。Ⅲ.甜菜属复胚种子超过一定大小的种子单位才列为净种子,但单胚品种除外。一定大小:指用规定筛面200mm×300mm,筛孔为1.5mm×20mm的筛子,筛1min仍留在筛上的。Ⅰ.豆科、十字花科、松柏科,种皮完全脱落的种子单位应列为杂质。Ⅴ.黑麦草属、羊茅属及付枝冰草属的颖果达到或超过内稃长度的1/3才为净种子。Ⅵ.黑麦草属所附不育小花未达到结实小花顶端的也列为净种子。Ⅶ.鸭茅属和羊茅属保留完整的复粒种子单位归入净种子。Ⅳ.燕麦属、早熟禾属和高梁属中,附着的不育小花不需除去而列为净种子。高粱燕麦黑麦草羊茅属冰草属鸭茅⑶主要作物净种子鉴定标准1、玉米属、小麦属、黑麦属、小黑麦属①颖果;②大小超过原来1/2的破损颖果。
⑵稻属①由颖片、内外稃包着一个颖果的小穗;②由内外稃包着颖果的小花;③颖果;④大小超过原来一半的破损颖果。⑶蓖麻属①带有或不带种皮,带有或不带种阜的种子;②带有或不带种皮而大小超过原来1/2破损种子。⑷豆科、十字花科①附着部分种皮的种子,②附着部分种皮而大小超过原来1/2的破损种子⑸茄属、番茄属、辣椒属、南瓜属、丝瓜属、冬瓜属、苦瓜属、西瓜属、甜瓜属、胡麻属、亚麻属、黄麻属、葱属、苋属、甘薯属、百合属、烟草属、木槿属、石刁柏属①带有或不带种皮的种子;②带有或不带种皮而大小超过原来1/2破损种子2.其他植物种子其他植物种子:指除净种子以外的任何植物种类的种子单位,包括其他植物种子和杂草种子。如小麦种子中混有扁豆、油菜种子,只要当这两种植物种子达到扁豆属、油菜属的净种子标准才算其他植物种子,达不到相应属净种子标准则为杂质。01以下情况例外:甜菜属种子单位作为其他植物种子时不必过筛,可用遗传单胚的净种子定义。鸭茅、草地早熟禾、粗茎早熟禾不必经过吹风程序。复粒种子单位先分离,然后将单粒种子按净种子和杂质定义划分。菟丝子属的种子单位脆而易碎,呈灰白色以至乳白色,列入杂质。草地早熟禾菟丝子复粒种子单位(MSU):指由数个小穗或一个以上小花所组成的全部小穗,符合下列构造时一个可育小花附着1个以上可育和(或)任何长度不育小花一个可育小花附着1个可育或不育小花,后者延伸到或超过该可育小花顶端(不包括芒在内)一个可育小花基部附着任何长度不育小花或颖片一个可育小花附着1个可育或不育小花,后者延伸长度未达该可育小花顶端04030201判定标准3.杂质杂质:除净种子和其他植物种子以外的所有种子单位、其他物质及构造。明显不含真种子的种子单位。甜菜属复胚种子单位大小未达到净种子规定的最低大小的。破裂或受损伤种子单位的碎片为原来大小的1/2或不及1/2。种皮完全脱落的豆科、十字花科的种子。稃壳、茎叶、病原体、泥土、砂粒及所有其他非种子物质。四、种子净度分析的步骤——依据GB3543.3-1995送验样品称重重型杂物检出称重(重量和体积明显大于种子)分取试验样品并称重(试验样品重的最小重量见附表1)试样分析、称重(净种子、其它植物种子、杂质)计算结果报告(各成分%保留一位小数)25000粒种子重M以2500粒种子重为宜其它植物种子杂质分取试验样品全试样半试样⑴全试样分析的程序与步骤送检样品的称重重型混杂物的检查与称重分取一份全试样样品分离分析全试样样品各种成分称重计算⑵半试样分析的程序与步骤送验样品的称重重型混杂物的检查与称重独立分取一份半试样、再分取另一份半试样分别分离分析两份半试样两份半试样各种成分称重计算例:小麦送验样品1000克,如何取得两份半试样?1000g500g500g250g250g250g250g125g125g125g125g62.5g62.5g62.5g62.5g一份半试样一份半试样试样分取原则:⑴送验样品充分混合,再进行分样;⑵独立分取(一)送验样品称重(二)重型混杂物检查与称重净度分析试样重量的10倍以上(见附表)从送验样品中,检查并挑出与供检种子在大小和重量上明显不同且严重影响结果的重型杂质,如土块、石块或在小粒种子中混有的大粒种子等。分别按杂质或其他植物种子挑选归类,分别称重计算重型杂质的含量。(三)试验样品的分取和称重1、试样重量净度分析时,试样重量大小会缺乏代表性,太大则分析费时。规定重量(至少含有2500个种子单位)2、试样分取分取一份试样(全试样)、两分半试样(试样重量的一半)进行分析。试样或半试样及各种成分重量/g小数位数1.0000以下41.000-9.999310.00-99.992100.0-999.911000或以上03、试样称重分样至接近规定的试样最低重量时称重。试样称重的精确度因试样重量而异(见表)。其他植物种子杂质净种子
利用镊子或小刮板按样品顺序逐粒观察鉴定。把试样分成净种子、其他植物种子和杂质;分离后各组分分别称重,保留规定小数位数。(四)分离分析试验样品手持放大镜和双目显微镜:分离小粒种子单位和碎片;各成分重量总和与原试样重量比较两者之间重量差异超过原试样重的5%可能有差错,必须重新分析种子净度工作台多功能种子净度工作台反射光净度台:禾本科可育小花与不育小花的分离,线虫瘿和真菌体的检查;
吹风机:从较重的种子中分离较轻的杂质,如稃壳及禾本科牧草的空小花。
筛子筛理:选用筛孔适宜的筛子2层。上层为大孔筛,下层筛为小孔筛,小孔筛下面套一筛底,上套大孔筛,将试样倒入其中,再加筛盖。
落入筛底的:泥土、砂粒、碎屑及细小的其他植物种子;留在上层筛内:茎、叶、稃壳及较大的其他植物种子等;大部分试样则留在小孔筛中;对各层筛上物分别进行分析。(五)计算(1)试样中无重型杂质的计算①上式分母应为分析后的各成分重量之和;而不是实验样品的原始重量。②全试样保留到一位小数,半试样保留到二位小数;③各成分%相加之和应为100.0%,否则应予以修正。注:例:采用两份半试样分析水稻种子的净度。第一份半试样:试样重20.15g,经分析,净种子重19.53g,其他植物种子重0.2118g,杂质重0.4082g;第二份半试样:试样重20.12g,经分析,净种子重19.51g,其他植物种子重0.2108g,杂质重0.4101g。计算该批水稻种子3种成分的百分率。⑴检查分析期间的重量增失第一份半试样:三种成分之和与试样原重量相同。第一份半试样三种成分重量总和=19.53+0.2118+0.4082=20.15第二份半试样三种成分重量总和=19.51+0.2108+0.4101=20.13第二份半试样:分析后三种成分重量之和比试样原重量增加20.13-20.12=0.01g,其百分率为0.01×100/20.12=0.049%,小于规定的5%。可继续计算各种成分的重量百分率。第一份半试样:保留2位小数点⑵计算各种成分的重量百分率第二份半试样:计算两份半试样各组分的平均百分率:净种子=96.92%其他植物种子=1.05%杂质=2.04%。如何进行数字修约?数字修约规则:四舍六入五考虑;五看前后定进弃。五后非零要进一;五后皆零视偶奇。五前奇数须进一;五前偶数应舍去。五前零作偶数看:修约取舍要仔细。修约后保留一位小数3.7454→3.73.7634→3.83.7513→3.83.6504→3.73.7506→3.83.5500→3.6检查重复间误差是否超过允许差距,使用的是两重复的算术平均值。⑶检查重复分析间的误差杂质:平均百分率2.04%,查表得容许差距为0.55%,两份半试样分析误差为0.01,未超过容许误差。净种子:平均百分率96.92%,查容许差距表得容许差距为1.88%,两份半试样分析误差为96.92-96.77=0.15%,未超过容许差距。其他植物的种子:平均百分率1.05%,查表得容许差距为杂质0.49%,两份半试样分析误差为0,未超过容许误差。表同一实验室内同一送检样品净度分析容许差距(5%显著水平的两尾测定)两次分析结果平均不同测定之间的容许差距半样品全样品50%~100%<50%无稃壳种子有稃壳种子无稃壳种子有稃壳种子98.50~98.741.25~1.491.191.260.80.998.25~98.491.50~1.741.291.370.91.098.00~98.241.75~1.991.371.471.01.097.75~97.992.00~2.241.441.541.01.197.50~97.742.25~2.491.531.631.11.297.25~97.492.50~2.741.601.701.11.297.00~97.242.75~2.991.671.781.21.396.50~96.993.00~3.491.771.881.31.396.00~96.493.50~3.991.881.991.31.495.50~95.994.00~4.491.992.121.41.5有稃壳的种子是由下列构造或成分组成的传播单位:⑴易于相互粘连或粘在其他物体上(如包装袋、扦样器和分样器);⑵可被其他植物种子粘连,反过来也可粘连其他植物种子;⑶不易被清选、混合或扦样。如果稃壳构造(包括稃壳杂质)占一个样品的1/3或更多,则认为是有稃壳的种子。在《农作物种子检验规程》中,有稃壳种子的种类包括芹属(Apium)、花生属(Arachis)、燕麦属(Avena)、甜菜属(Beta)、茼蒿属(Chrysanthemum)、薏苡属(Coix)、胡萝卜属(Daucus)、荞麦属(Fagopyrum)、茴香属(Foeniculum)、棉属(Gossypium)、大麦属(Hordeum)、莴苣属(Lactuca)、番茄属(Lycopersicon)、稻属(Oryza)、黍属(Panicum)、欧防风属(Pastinaca)、欧芹属(Petroselinum)、茴芹属(Pimpinella)、大黄属(Rheum)、雅葱属(Scorzonera)、狗尾草属(Setaria)、高粱属(Soruhum)、菠菜属(SDinacia)。⑷计算加权平均值净度分析填报结果的平均值为加权平均值,不是算术平均值。以净种子的各重复质量之和与各重复分析后各成分总质量之和相比,其它两种成分也是。⑸修约净种子%=96.92%≈96.9%其他植物种子%=1.05%≈1.0%杂质%=2.03%≈2.0%①各种成分最后填报结果保留一位小数,最后还须进行修约。各种成分百分率之和为:
净种子+其他植物种子+杂质=99.9%(少0.1%),最后填报结果:净种子=96.9%+0.1%=97.0%。其他植物种子%=1.0%
杂质%=2.0%②检查各种成分之和是否为100.0%,小于0.05%的微量成分可略去不计。③如果各种成分之和为99.9%或100.1%,那么从最大值中增减0.1%,如果修约值大于0.1%,则应检查计算有无差错。如何进行误差检查?⑴采用全试样分析时:如果在某些情况下有必要分析第二试样时,两份试样结果的差距不得超过规定的容许误差。①若所有成分的误差在容许范围内,取其算术平均值。②若超过容许误差,再分析一份试样,若3份试样结果的最高值和最低值之差小于容许误差的两倍时,填报三者的平均值。若结果中的一次或几次显然是由于差错而不是由于样品随机变异所引起的,则须将不准确的结果除去。⑵采用半试样分析时:①若所有成分的实际差距都在容许范围内,则可计算2次重复的加权平均值。②若实际差距超过容许差距Ⅰ.再重新分析成对样品,直到一对数值在允许范围内为止(全部分析不要超过4对)Ⅱ.凡1对间的差值超过容许差距2倍的数据去掉。最后计算加权平均数。例:由两个不同检验员在同一检验室分别对两份水稻半试验样品进行核对检查。检测结果为:第一份净种子重量百分率为98.6%,第二份为94.9%。⑴先计算这两份试样结果的平均值:⑵用96.75查表,查得容许误差为1.88。两份试样间的实际差异为:98.6-94.9=3.7,超过了1.88的容许误差。⑶需再分析第2对试样,其净度分析结果为:第三份净种子重量百分率为98.7%,第四份为97.1%。⑸用97.9查表,得容许误差为1.54。第二对试样间的实际差异为98.7-97.1=1.6,超过了1.54的容许误差。⑷计算第2对试样结果的平均值:⑹还需分析第3对试样。净度分析结果为:第五份净种子重量百分率为98.4%,第六份为98.9%。⑺计算第3对试样结果的平均值:⑻用98.65查表,得容许误差为1.37。该两份试样间的实际差异为98.9-98.4=0.5,未超过1.37的容许误差。最后的填报结果还得判别这三者有无可比性:最后填报结果是不是就是填第三对的平均值呢?①第一对两份试样间的差异为3.7,而二倍的容许误差为1.88×2=3.76,实差未超过2倍容许误差,应保留这一对;②第二对的两份试样间的差异为1.6,而二倍的容许误差为2.9,实差未超过2倍容许误差,应保留;③第三对的两份试样间的差异为0.5,而二倍的容许差异为2.4,实差未超过2倍容许误差,应保留。最后的填报结果?如何计算?分别计算三对半试样的加权平均值,再计算三对加权平均值的算术平均值。第一对半试样半试样第一对半试样半试样第一对半试样半试样加权平均加权平均加权平均算术平均表同一实验室内同一送检样品净度分析容许差距(5%显著水平的两尾测定)两次分析结果平均不同测定之间的容许差距半样品全样品50%~100%<50%无稃壳种子有稃壳种子无稃壳种子有稃壳种子98.50~98.741.25~1.491.191.260.80.998.25~98.491.50~1.741.291.370.91.098.00~98.241.75~1.991.371.471.01.097.75~97.992.00~2.241.441.541.01.197.50~97.742.25~2.491.531.631.11.297.25~97.492.50~2.741.601.701.11.297.00~97.242.75~2.991.671.781.21.396.50~96.993.00~3.491.771.881.31.396.00~96.493.50~3.991.881.991.31.495.50~95.994.00~4.491.992.121.41.5在种子检验中常常用到一尾测定与两尾测定,什么情况下用一尾测定,什么情况下用两尾测定。⑴如果测定的是单向误差就用单尾测定。如种子公司调种复检结果和调出方检验结果不一致。若复检结果比调出方检检结果差值大,就要测定这个差异是由试验误差造成的还是种子质量本身造成的,这时只考虑复检结果(调出方检验结果的情况),就要用一尾测定。因这时的误差可能是正向误差,也可能是负向误差。⑵如果同一种子批经两次检验结果不一致(同一或不同检验机构),就要用两尾测定。(2)送验样品中含重型杂物的计算式中M:送验样品重/g;m:重型混杂物重/gm1:重型混杂物中其它植物种子重/gm2:重型混杂物中杂质重/g;
P1:除去重型杂物后净种子重量/%OS1:除去重型杂物后其它植物种子重量%;
I1:除去重型杂物后杂质重量/%送验样品重M试验样品剩余样重M-m重型杂物重m净种子百分率:P1其他植物种子百分率:OS1杂质百分率:I1剩余样中净种子重:P1×(M-m)剩余样中其他植物种子重:OS1×(M-m)剩余样中杂质重:I1×
(M-m)其他植物种子重m1杂质重m2送验样品中净种子重:P1×(M-m)分取送验样品中其他植物种子重:OS1×(M-m)+m1送验样品中杂质重:I1×(M-m)+m2例:从水稻送验样品402.0g(M)中分拣出重型混杂物石块和玉米种子1.0000g(m),其中分别有玉米种子0.5000g(m1)和石块0.5000g(m2)。然后从该送验样品中分取两份半试样,净度分析结果,其三种成分重量百分率分别为:P1(净种子)=97.8%,OS1(其他植物种子)=0.2%,I1(杂质)=2.0%。最后检查三种成分之和:97.6+0.3+2.1=100.0%对某批水稻种子送验样品1030g进行净度分析。测得重型其他植物种子1.430g,重型杂质4.720g。从送验样品分取两份半试样,第一份半试样为64.65g,测得净种子64.22g,其他植物种子0.0510g,杂质0.3700g;第二份半试样为62.52g,测得净种子62.15g,其他植物种子0.0212g,杂质0.3203g;求水稻种子的净度及其他各组分的百分率。作业:全试样与半试样分析对比(1)误差分析对比(2)结果计算对比(3)结果错误隐蔽性对比从种子检验结果的精度要求来说,分析一份全试样和分析两份半试样是相同的。(1)误差分析对比只需检查分析前后重量增失在5%范围内,没有重复间的误差对比分析。⑴全试样分析⑵半试样分析误差对比次数多。误差对比次数少。①分析重量增失是否在5%范围内。②两份半试样重复间的误差对比,超过容许误差要进行另一成对半试样样品的分析。(2)结果计算对比⑴全试样分析只有一份试样,若无重型混杂物,各成分的重量百分率计算一次可以完成;若有重型混杂物时,按规程规定进行一次换算即可,结果计算简便。⑵半试样分析Ⅰ.无重型混杂物,计算各成分重量百分率算后,进行误差对比,若在容许误差内,方可确定试样净种子重量百分率,不仅数据多,而且计算复杂。Ⅱ.有重型混杂物,计算方法更复杂。(3)结果错误隐蔽性对比⑴全试样分析结果错误隐蔽性大只有一份试样,当操作不规范或操作有失误时,如没有发现的成分丢失或者成分分离不彻底,即净种子中含有碎杂质和不易觉察的小种子等,这时候直接计算,得出的结果失去准确、真实性,但这种失误不易察觉,隐蔽性大,仅凭查验原始记录记载表是发现不了的。⑵半试样分析结果错误隐蔽性小由于是两份半试样,操作不规范或有失误时,实际误差很可能大于容许误差,错误容易发现,按要求重新分析另一对半试样,能保证结果准确、真实。(六)其它植物种子数目测定其他植物种子的数目测定也归于净度分析。主要用于测定种子批中是否含有有毒或有害种子,用供检样品中的其他植物种子数目来表示。如需鉴定,可按植物分类鉴定到属。(1)测定内容内容:其它植物种子数的测定是据送验人所提要求进行的。主要测定那些有毒的、惹人厌恶的植物种子。①完全检验从规定的整个试验样品中找出所有其它植物种子。试验样品不得小于25000个种子单位的重量或所规定的重量(种子批和样品的重量表)。借助于放大镜、筛子和吹风机等器具,按照规定逐粒进行分析鉴定,取出试样中所有的其他植物种子,并数出每个种的种子数。有的种子不能准确确定所属种时,允许鉴定到属。⑵测定方法完全检验有限检验简化检验②有限试验从整个试验样品中只限于找出送验者指定的其它植物种子。检验方法同完全检验,但只限于从整个试验样品中找出送验者指定的其他植物种的种子。如送验者只要求检验是否存在指定的某些种,则发现一粒或数粒种子即可。③简化检验如果送验者所指定的种难以鉴定时,可采用简化检验。简化检验是用规定试验样品重量的1/5(最少量)对该种进行鉴定。检验方法同完全检验。⑶结果计算结果用实际测定试样重量中所发现的种子数表示。通常折算为样品单位重量所含的种子数,以便比较。进行其他植物种子数目测定时,将测定种子的实际重量、学名和该重量中找到的各个种的种子数应填写在结果报告单上。注明采用完全检验、有限检验或简化检验。答:其他植物种子平均粒数为:(66-50)/2=58,查表得容许误差为22,而两份试样间的差异为66-50=16,因此这两份测定结果是可比的。最后填报的检测结果为:在2000g总重量样品中,有116粒野燕麦种子(注意最后填报不用平均值)。当需要判断同一检验站或不同检验站对同一批种子的两个测定结果之间是否有明显差异时,可查其它植物种子计数的容许差距表(进行比较时,两个样品的重量须大体相等)。例:在1000g试样的种子中发现野燕麦66粒,而另一份1000g试样的种子中发现野燕麦50粒,试问这两次测定是否一致?表其他植物种子计数的容许差距两个测定值的平均数
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