食品微生物检验方法

食品微生物检验方法（FDA与ISO对比）内容提要：菌落总数检测大肠菌群及大肠杆菌检测金黄色葡萄球菌检测沙门氏菌检测单核细胞增生李斯特氏菌检测菌落总数测定——菌落总数的概念菌落总数是指在被检样品的单位重量（g）、容积（ml）或表面积（cm2）内，所含能于某种固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。菌落总数测定——卫生学意义判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。及时反映食品加工过程是否符合卫生要求，为被检食品卫生学评价提供依据。通常认为，食品中细菌数量越多，则可考虑致病菌污染的可能性越大，菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。FDABAM菌落总数测定流程检样xg/mL+9xml稀释液（磷酸盐缓冲液）杏适当新十倍列稀释关样品辉选择枪2~萍3间个连昂续适睡宜稀币释度其各取枪1m足L蛙分别符加入敏灭菌望平皿条内况（每志个稀祖释度助做两栋个平咐行）访每皿紧内加随入适彼量平寸板计杨数琼超脂（嗽PC示A狡）构35捷汤℃前4催8流±端2啄h凡菌落宾计数乱FD拳A洒BA加M勾菌落昨计数康方法贝选择窃25扰~2辞50群CF斯U杂之间喘的菌革落进破行计赖数，亿计算阁公式迈如下奖：治N茅=柱∑弯C/帮（锋1*洁n题1恳+0础.1察*n域2片）并*d壳所有跑平板赤的菌核落数督都不库足爹25晶CF复U沸，报柱告啄EA内PC辟/m雷l命（销g为）为袍＜汇25总*1柜/d孝。紧E披AP嗓C行：惨es偿ti昌ma雪te身d对ae岗ro榜bi第c异pl梁at速e两co短un丸t即所有铲平板仿的菌打落数抚都超每过奴25诞0C命FU剪，但乞不足催1扩0蜻0/献cm怀2铺，报泡告攻EA久PC登/m筛l谱（活g载）为眼最接咬近袭25垃0C称FU贺的平支板菌铃落数详的估田计值斥，乘腹以相晃应的酱稀释龟度。决所有秤平板柜的菌翼落数恐都超刚过邪10骂0/给cm肝2彩，计观算平滥板的战面积磨（直犯径为剧90刘mm羽的平缺板面巧积为欢65稻cm兵2弄），铜估计闹最高饼稀释芦度每佳cm待2重的菌却落数索，乘群以相村应平答板面飞积作售为该识稀释延度的杠菌落晕计数喷结果炭，报斗告拒EA横PC单/m旅l板（累g嗽）为纽＞量65叨*1谦00岂*个1/译d按。欧无法宪计数令的平昼板报向告净LA渡（芽La隙bo俗ra屋to催ry怪A膛cc约id姑en四t形）。鹊最终夫结果转保留嗽前两贡位有夸效数听字。佩按照梁4毯舍杨6提入，元5探是奇珍进偶财不进敏。绍IS俭O4果83育3-酷20白03掉啦菌落醒总数揉测定施流程悔检样示xg疤/m渠L+固9x倒ml瓶稀释中液（认磷酸栗盐缓表冲液仰）狠适当被十倍乔稀释燕样品忍选择依2~钢3阻个连狸续适败宜稀尾释度泛各取度1m份L日分别效加入捕灭菌押平皿区内逼（每组个稀料释度蛙做两邻个平调行）圣每皿柏内加构入适亩量（辫12陆~1赶5m饥L讽）盘平板冈计数倾琼脂莲（己PC昼A工），阳30桥±上1耍℃商，骄72个惑±趟3迅h杏菌落芽计数亏IS劝O4皂83训3欲-2束00脉3创菌落昏计数店方法燥选择什连续据2挥个稀访释度宾不超揪过狮30塌0C朝FU仆的平曾板，彩且一玉个平宁板至乌少含悲15偿CF艳U浆进行药计数劫，计录算公蓄式如搏下：龙N撒=别∑源C/框（刃n付1蚕+0红.1载*n潮2处）促*d金所有危平板浅的菌错落数闷都不咽足胁15象CF否U公，计庸算虹2食平板楼菌落乏的算晚术平忘均值俩m脂，液涉体样侮品：策N烦E拢=m责固体革样品糕：招N透E班=m榜×满d测-1披无菌零生长仿：液订体样咳品：冲le离ss粒t嘉ha血n师1;鹊具摩饰固体饶样品泥：秧le圾ss鸽t冰ha年n烤1盗×嗽d束-1畏最终截结果经保留似前两俗位有漆效数舅字。登菌落解总数猎测定身几点织说明辱由于珍检样拢中采抚用棒30表/3串5朽℃们有氧活条件榴下培蚊养，默因而按并不徒是样逼品中忧实际猴的总葡活菌捉数，碎一些惨特殊级营养浇要求诸的细额菌、式厌氧枕菌、剃微需侄氧菌免、以浮及非坊嗜中扒温细痰菌，粘均难拥以反烂映出权来。派鉴于须食品基检样擦中的叔细菌栏细胞猜是以掌单个言、成县双、术链状与、葡苏萄状拔或成昨堆的顶形式煎存在当，因拐而在棋平板劈上出贵现的呀菌落貌可以近来源耻于细妨胞块颠，也具可以独来源闹于单厘个细彼胞，散因而揭平板艳上所脑得菌蜂落的价数字超不应走报告荣活菌兴数，幅而应代以单卷位重忘量、族容积望或表倡面积仪内的挣菌落台数或济菌落连形成陈单位节（抽co槐lo狠ny芬f凳or邮mi耐ng凶u伤ni泪ts怨，计CF扯U蜜）报穗告。荷菌落介总数海测定伟几点厘要求眯每个欧样品傻从开佣始稀棒释到榜倾注由最后定一个彼平皿才所用茄的时夕间不识得超纵过班15控mi碧n碗，主类要为舅防止唱细菌认增殖表和产鸟生片袍状菌般落。盆样液翠与琼粒脂应连充分冷混合苍，避疏免将助混合绘物溅杨到平乒皿壁狗和皿凭盖上神。皿茧内琼付脂凝纳固后澡，不也要长挥时间织放置咬，然崖后倒盈置培伤养，列可避晨免菌组落蔓搭延生彻长。绢检样衬过程敬中应岛用稀煎释剂迹做空见白对芒照，枪用以学判定苏稀释缸液、林培养景基、龄平皿繁或吸凡管可风能存张在的江污染虎。同劈时，技检样浅过程谣中应唇在工蓬作台垃上打蓄开一状块空新白平湾板计趟数琼吩脂，调其暴览露时响间应食与检乡样时艳间相彼当，岗以了扇解检遭样在葵检验锅操作默过程趋中有筝无受裳到来塘自空畏气的桥污染闻。险检样造稀释煤液有灾时带赏有食航品颗振粒，械为避刺免与沟细菌痒菌落慢发生蚂混淆唉，可相作一蔑检样督稀释晒液与秋平板段计数额琼脂你混合讽的平滔皿，梢不经晚培养货，于篇4贫℃叠放置怎，以允便在恭计数晋检样惭时用换作对胡照。彼大肠鼻菌群组的定战义疲大肠立菌群吐系指式一群恢能发锄酵乳储糖、弟产酸葡产气箩、需利氧和谢兼性劫厌氧竞的革跃兰氏摆阴性类无芽蕉孢杆遥菌。景大肠啄菌群涨不是币细菌膛学上犹的分存类命改名，代而是旅根据暮卫生漫学方泡面的哭要求蜘，提品出的婚与粪街便污枣染有苦关的店细菌兴，即捉作为馋食品眠、水偿体等梨是否孤受过神人畜低粪便志污染坚的指最示菌宁，这有些细体菌在拘生化冲及血鸭清学紫方面知并非油完全选一致固。根贴据进蹄一步卧的生雅化试趁验，另可将拴这群盆细菌词再分搜为大悼肠艾疑希氏熟菌（糖俗称均大肠素杆菌末）、皇弗氏唱柠檬真酸杆才菌、券肺炎摘克雷悼伯氏饲菌和萝阴沟素肠杆买菌等坡。闷大肠认杆菌赞的定阅义枝大肠裙杆菌诚（也朝称大荐肠埃午希氏么菌）阿，分惑类于宽肠杆侨菌科健，归北属于刺埃希恼氏菌闭属。聪大肠坐杆菌使指革筑兰氏舰阴性灯无芽番孢杆句菌、怀乳糖惠发酵蒜产酸乱产气统、厨IM类Vi真C赛试验恐（靛洋基质弟、贤MR惧、兔V-酬P众、柠勇檬酸窑盐试赴验）牢为呆++杂--莲或拉-+搞--检的细烂菌。涌与人治类有太关的鄙大肠歉杆菌替统称渔为致酿泻性腾大肠浇杆菌拳，包顽括五曾种：姥肠毒村素性喂大肠巩杆菌秒（国ET豪EC捞）、俱致病尽性大暴肠杆肺菌（假EP古EC穷）、缠出血下性大寄肠杆滨菌（富EH呆EC血）、掀侵袭低性大摘肠杆弊菌（看EI集EC碌）、桨黏附欠性大评肠杆勺菌（睁EA馅EC寺）。撇卫生棵学意寨义造大肠草菌群树和大雄肠杆姐菌是而评价筹卫生层质量弓的重鼓要指或标，徒作为懒食品宴中的就粪便仁污染伴指标俱。六食品丙中检泽出大民肠菌阳群，昌表明这该食风品有岂粪便盲污染浴，既狮可能首有肠凶道致稿病菌顽存在田，因胜而也胶就有蓄可能倘通过跪污染绢的食妨品引翠起肠缎道传触染病沫的流骑行。幕大肠鄙菌群垫数的吸高低爱，表箱明了森粪便僚污染怨的程棚度，附也反误映了糟对人奶体健坟康危秀害性条的大怖小。抖大肠甲杆菌慈在外鸟界存捏活时死间与吹一些凤主要描肠道愿致病掉菌接烈近，理它的暮出现摇预示晨着某衣些肠僻道病择原菌暮的存雷在，肉因此震该菌嫩是国巩际上撑公认腊的卫贼生监痰测指焰示菌酒。近济年来扫，有崭些国略家在冒执行辈HA症CC包P暮管理艇中，鸣将大艰肠杆冻菌检陷测作控为微季生物豆污染穿状况横的监若测指耕标和袋HA今CC戚P鲜实施姻效果职的评竟估指剧标。保大肠截杆菌闭的生颗物学蹈特性泽基本熄形态认：情此菌匠为两滚端钝皇圆的斯短小完杆菌爽，一挎般约欺0.央5-挠0.誓8造μ顷m*草1.接0-恼3.月0脚μ恶m走，多妻单独产存在其或成兔双，影但不姓呈长砖链排鹅列。站约春50费%奔的菌结株有炒周生致鞭毛樱，但匹多数秃只有追1-酿4益根，掩一般凤不超曲过警10锡根，鲜故菌睬体动介力弱云。多凭数菌掠株有味菌毛遍，有刚的有馆荚膜填或微洁荚膜屯，不赏形成倾芽孢生，对相普通夺碱性根染料殿着色选良好况，革拘兰氏馆染色统阴性刷。匠培养凡特性忘：纳大肠掠杆菌强合成仆代谢茧能力乒强，记在含础无机起盐、敲铵盐紧、葡父萄糖妹的普愈通培产养基成上生绿长良和好。碍最适些生长永温度细为增37忆℃吓，在佛42矩-4形4联℃枪条件织下仍林能生鉴长，牌生长恩温度锻范围鬼15泻-4更6斧℃演。粉大肠赖菌群奖及大索肠杆木菌测耽定茎菠——糠MP脊N久法检盏验流蚀程（呢FD山A挠BA拒M徒）越检样俘50章g馋+4周50甜ml渐稀释岭液等适当茄十倍处稀释米样品息选择卷3岩个适承宜的轨连续贱稀释老度的住样品违稀释汇液，睁每个肿稀释杨度接毙种三察管哗LS享T样肉汤资（每帝管班9m鞭lL紧ST谨肉汤订并加雄有导嗓管）积，点每管其接种轿1m盆L西35粘℃呆，追24仪挪±恨2柄h术~4咳8简±腔2桑h滨没有焰产气插管眠有产渴气管倘报告斯阴性吧接种类BG者LB脱肉汤蛇管芽接种菊EC挽肉汤众44熟.5羽±当0.证5锅℃摆（水售浴培寇养）毯24断回±史2既h石~4支8洽±前2详h挣查玻MP烘N委表报梳告结没果鲜产气惭管接逮种冰EM虑B戴平板触（唯35街℃峰、睬18笋~2浆4h骑）夺（大笋肠菌替群）狱从霞EM垒B尖平板尖上挑追取套5连个可凭疑菌沸转接晌到皱PC逢A螺斜奏面，刘进行迫革兰族氏染罢色、葛IM诸VC蹦生化物鉴定抓、接吧种桐LS螺T听复检絮产气莲查克MP威N尸表报亏告结机果（番大肠初杆菌甜）绕大肠剧菌群向测定辰——揭MP倒N南法检窝验几昏点说幼明楚MP甚N净检索阀表：货献M牵PN油检索叉表只肢给了扣三个透稀释高度，勒如改萝用不谦同的啄稀释德度，场则表摆内数浆字应桌相应液降低铃或增佛加怪10章倍。项初发举酵和韵证实侦试验摔：啊兵荷1谊）两纯步法纯进行雁了两导次乳认糖发瑞酵试杨验。肯初发气酵和歇证实底实验化所用往培养达基不持同，心但都炸是为诱了证且实培搅养物婆是否路符合身大肠位菌群缩的定皱义，笨即河“竟在梨37另℃终分解皂乳糖午产酸润产气牌”巧。疑朝弟2示）初冈发酵饿阳性米管，恨不能状肯定寻就是挨大肠镰菌群牵细菌盒，经齐过证钻实试熊验后循，有设时可占能成栽为阴暴性。哑有数惜据表挽明，楼食品危中大肺肠菌通群检坛验步水骤的壳符合悟率，疮初发欣酵与川证实墙试验蹦相差傲较大鸭。因行此，促在实虑际检观测工厚作中肢，证恳实试犁验是遣必需颗的。坑产气易量与么倒管裂：老在乳敏糖发仍酵试深验工清作中骂，经顺常可雁以看纺到在讨发酵送倒管灵内极迫微少朝的气哗泡（京有时削比小尖米粒赛还小促），店有时捎可以艺遇到岂在初倚发酵冈时产吩酸或诊沿管衡壁有下缓缓宋上浮尼的小柿气泡往。实铲验表轰明，盗大肠状菌群横的产懒气量尸，多仁者可芽以使用发酵氧倒管浆全部耐充满楼气体羊，少悔者可闭以产控生比呢小米昼粒还晓小的渡气泡末。如敬果对扎产酸菠但未砌产气贸的乳善糖发恢酵如妈有疑夸问时腐，可裕以用阅手轻读轻打方动试海管，羡如有忌气泡勿沿管颤壁上泪浮，仗即应鲜考虑剖可能够有气梨体产毯生，锄而应宪作进适一步呀试验饱。卫大肠艰杆菌秩测定简——描EM刘B夜选择呜性分们离鉴抗别枣EM销B锋平板化典型将大肠羞杆菌浮菌落节特征柳：遗中心守黑色菌或紫灯红色桥，有任或无士绿色豪金属感光泽深大肠勒杆菌油测定各——某EM鸡B训选择龄性分究离鉴堤别辅EM赛B竭是一项种弱燃选择光性培烫养基内，一扒些球弃菌也播可在舟该培顿养基甜上生穷长；父高压日灭菌吗可使亮得美蜂蓝还为原从堪而使肝培养翁基的急颜色予呈不虎均一必橘黄削色，驰轻轻维摇动叔培养曲基可死以恢谦复原叹有的牲正常钞紫色抚，倾袍注平鲜板前均应先安摇匀肆；抖大肠销杆菌洋在该元培养界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