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文档简介

实验室常规操作第一页,共十三页,编辑于2023年,星期二实验室常用仪器:移液器暗室相关PCR仪离心机第二页,共十三页,编辑于2023年,星期二移液器:移液器检查量程的调节枪头(吸液嘴)的装配移液的方法移液器的放置第三页,共十三页,编辑于2023年,星期二移液器检查:测漏:取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水,如果是量程较小的移液器,请将吸头浸入液面1—2毫米,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降;如果是量程大的移液器(20-200ul、100-1000ul等),请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴;

如果出现漏气:A、检查吸头安装是否到位,换掉吸头再次测试,以排除因吸头的关系产生的漏气情况;B、检查白套筒的端口部份(即白套筒与吸头接触的部份)是否有刮痕;C、再检查白套筒与手柄之间的连接螺帽是否松动。如果这些情况都没有,就说明密封圈或活塞组件有损坏,请联系相关负责人员。第四页,共十三页,编辑于2023年,星期二量程的调节:如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;但如果要从小体积调为大体积时,则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。第五页,共十三页,编辑于2023年,星期二枪头的装配:常见的错误方法:使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法:将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。枪头卡紧的标志是略微超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。第六页,共十三页,编辑于2023年,星期二移液的方法:移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度(酶类除外)。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。一般采取两种移液方法:A、前进移液法:用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体,最后松开按钮;B、反向移液法:此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体。方法是是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体(最大吸取刻度-第一停点刻度即所需液体的体积),继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。第七页,共十三页,编辑于2023年,星期二移液器的放置:使用完毕,可以将其竖直挂在移液枪架上,但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时,切勿将移液器水平放置或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。如有液体吸入移液器腔体,应立即控干液体,然后视溶液性质是否需要洗涤(擦洗时,用75%乙醇或肥皂水)。如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧(各使用人员,在下班前要将各自所使用移液器调至最大量程)。第八页,共十三页,编辑于2023年,星期二暗室物品使用相关:暗室物品使用原则:A、专物专用,暗室里的所有均为专用物品,严禁与实验室物品混用,且暗室内物品使用时需带好一次性PE膜手套(EB有毒性,注意个人防护),用完后丢弃手套,方可接触实验室中的物品;B、实验室所有物品,原则上不允许带入暗室,若需带入暗室,严禁放置于暗室内的实验台上,且应尽量避免与暗室中物品接触;C、暗室操作过程中注意个人安全防护!相关仪器:紫外分析仪、微波炉、电泳仪第九页,共十三页,编辑于2023年,星期二PCR仪使用注意事项:放入样品前或取出样品前,向逆时针推动热盖的彩色手轮,可以松开热盖。加入样品后,顺时针推动手轮可以压紧热盖;压紧热盖时注意以下原则:当旋动手轮听到"咔咔"声后即可,这样可保证热盖压紧又不会因压力过大导致样品管变形。注意打开或关闭热盖时,应轻抬轻放,以防过强震动而导致热盖机械故障。;运行程序前,先检查热盖状态;使用过程中,避免用坚硬的物体磕碰、划伤显示及操作部分,以免损坏;严格按照正常的操作规程进行实验,以保证仪器正常运行。第十页,共十三页,编辑于2023年,星期二离心机按照功能划分为:高速冷冻离心机:主要用于大量和需要低温环境的DNA

提取;普通离心机:主要用于常温小量的DNA提取和纯化。第十一页,共十三页,编辑于2023年,星期二普通离心机使用注意事项:打开电源键后,等显示稳定后才可以进行转速和时间调节,检查离心机转轴松紧度;放置立新样品时,一定要对称放入(质量);离心结束后,等离心机显示【end】才可以按开盖健打开离心机盖;否则容易导致离心机程序错误,以致出现开不了盖或者是离心机不能停转的现象;定期对离心机进行清洁维护,一般2-3天一次.,主要是清洗离心机转头,以及离心机侧壁和放置离心机的台面;

注意:所有涉及加液的步骤需在板上进行,严禁在离心

机中进行

加液操作

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